Characterizing Modulators of Protease-Activated Receptors with a Calcium Mobilization Assay Using a Plate Reader(플레이트 리더를 사용한 칼슘 동원 분석으로 프로테아제 활성화 수용체의 조절인자 특성 분석)

우리 연구실은 프로테아제 활성화 수용체의 조절이 어떻게 염증을 억제할 수 있는지 이해하기 위해 노력하고 있습니다. 우리는 PAR1의 활성을 조절하는 파모듈린이라는 새로운 종류의 소분자를 개발했습니다. 목표는 약물 후보로 잠재적으로 사용할 수 있도록 개선된 특성을 가진 파모듈린을 발견하고 그들의 작용 방식을 이해하는 것입니다.

공동 연구자들과의 전임상 연구에서 우리는 파모듈린이 신장, 간 및 심혈관 질환을 포함한 혈전 염증으로 인한 질환 치료에 특히 유망할 수 있다고 결정했습니다. 이들의 작용 방식은 또한 이전의 PAR1 표적 약물 후보보다 더 나은 안전성 프로파일을 가진 화합물의 개발을 가능하게 할 수 있습니다. 수용체 PAR1은 혈소판을 활성화하는 데 중요하지만, 내피 세포에서의 신호 전달도 수많은 병리학에서 중요하고 관련이 있습니다.

따라서 우리는 파모듈린과 배양된 내피 세포의 활성을 테스트하기 위한 저렴하고 편리한 프로토콜을 개발하고자 했습니다. 우리는 표준 플레이트 리더를 사용하고 자동화된 액체 처리기가 필요하지 않은 칼슘 동원을 측정하는 업데이트된 프로토콜을 공유하기 위해 여기에 있습니다. 내피 세포에서 PAR1 리간드를 스크리닝하는 데 적합하지만 이론적으로는 칼슘 동원에 영향을 미치는 모든 화합물의 활성을 측정하는 데 사용할 수 있습니다.