制备及<em&gt;体外</em&gt;磁共振成像基于树状大分子造影剂的表征

摘要

本协议描述携带CYCLEN基于大环螯合物协调顺钆离子树枝状磁共振成像（MRI）造影剂的制备和表征。在一系列的体外 MRI实验中，相对于可商购的单体类似物时此代理产生的放大的磁共振信号。

摘要

钆（III）与无环或大环螯合物的顺磁性配合物是用于磁共振成像（MRI）中最常用的造影剂（CA）的。他们的目的是提高在组织的水质子的弛豫率，从而增加了MR图像对比度和磁共振测量的特异性。当前临床批准的造影剂是正在迅速从体内清除的低分子量分子。作为顺磁性螯合剂的载体的使用树枝状聚合物可以在更高效的MRI造影剂的未来发展中发挥重要作用。具体地，增加在一个较高的信号对比度顺磁物质的结果的局部浓度。此外，此CA提供由于其高分子量和尺寸较长的组织的保留时间。这里，我们证明了基于聚（酰氨基胺）大分子MRI造影剂（PAMAM）与monomacro树枝状聚合物的制备便利过程环状DOTA型螯合剂（DOTA - 1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸）。螯合单元通过利用朝向PAMAM树枝状聚合物的胺基表面基团的异硫氰酸酯（NCS）基团的反应性，以形成硫脲桥追加。树枝状产物纯化并通过核磁共振谱，质谱和元素分析法分析。最后，高清晰度的MR图像记录和从制备树枝状和市售单体剂获得的信号反差进行比较。

引言

磁共振成像（MRI）是广泛用于生物医学研究和临床诊断的有力和非电离成像技术，由于其非侵入性和优良特性的软组织的对比。最常用的MRI方法利用从水的质子获得的信号的基础上，在水信号的密度差异的组织中提供高清晰度的图像和详细的信息。的信号强度和在MRI实验的特异性可以使用造影剂（CA）的进一步提高。这些都是影响的纵向（T _1）和横向分别^1,2-顺磁性或超顺磁性物质（T _2）弛豫时间。

用聚氨基聚羧酸配体的镧系元素离子钆配合物是最常用的_Ť1的CA。钆（III）缩短的T ₁松弛因此水的质子的时间，增加的MRI实验³中的信号对比度。然而，钆离子是有毒的;它的大小近似于钙（Ⅱ），它严重影响钙辅助细胞信号传导。因此，无环和大环螯合物被用来抵消这种毒性。各种多齿配体迄今已开发的，导致具有高的热力学稳定性和动力学惰性¹钆（Ⅲ）配合物。那些基于所述12元azamacrocycle CYCLEN，特别是其四衍生物DOTA（1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸）是此CA类的最研究和应用的复合物。

尽管如此，GdDOTA型CA是低分子量的系统，其中显示某些缺点，例如低对比度效率和快速的肾排泄。大分子和多价的CA可能是一个很好的解决了这些问题^，4。由于CA biodistribu化主要是由它们的大小决定的，大分子的CA显示组织中更长的保留时间。同样重要的是，在单体的MR 探测器 （ 如 GdDOTA复合），基本上改善所获取的MR信号和测量质量的增加的局部浓度这些试剂的结果的多价。

树枝状聚合物之间的编写多价的CA用于MRI ^4,5最好支架。这些具有良好定义的尺寸的高度支化的大分子易于在其表面上的不同的偶合反应。在这项工作中，我们报道的制备，纯化和树枝状的CA用于MRI由第4代（G4）聚（酰氨基胺），耦合到GdDOTA状螯合物（DCA）（PAMAM）树枝状聚合物的表征。我们描述了反应性的DOTA衍生物的合成及其与PAMAM树枝状耦合。在与钆（III），标准的理化性质络合procedu再DCA的进行。最后，进行核磁共振实验证明DCA的以产生具有比从低分子量的CA获得的那些较强的对比度的MR图像的能力。

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研究方案

1. DCA的制备

1. 单体单元4 ⁶的合成。
   1. 4-（4-硝基苯基）-2-（4,7,10-三- 叔丁氧基羰基环十二烷-1,4,7,10-四氮杂-1-基）丁酸叔丁基酯（2）。
      1. 溶解（4,7-双- 叔丁氧基羰基- 1,4,7,10-四氮杂cyclododec -1-基）在N -乙酸叔丁基酯1（1.00克，1.94毫摩尔），N-二甲基甲（ DMF，5ml）中，加入碳酸钾（0.67克，4.86毫摩尔，2.5当量）和在室温下搅拌45分钟该混合物。
         注:大环1从CYCLEN制备和叔根据先前公布的程序⁷ -丁基溴。
      2. 添加叔丁基-2-溴-4-（4-硝基苯基）丁酸甲酯（0.87克，2.53毫摩尔，1.3当量）分批1小时。继续下ŧ搅拌混合物他相同的反应条件下18小时。
         注: 叔丁基-2-溴-4-（4-硝基苯基）丁酸根据先前公布的程序⁸由4-（4-硝基苯基） -丁酸，亚硫酰氯和溴制备。
      3. 通过球对球真空蒸馏的手段在^40-60℃9除去DMF。
      4. 将该残余物通过柱色谱法（硅胶，7％甲醇/二氯甲烷），得到产物2，为棕色无定形固体（1.09克^{，72％）10。}
   2. 4-（4-氨基苯基）-2-（4,7,10-三- 叔丁氧基羰基环十二烷-1,4,7,10-四氮杂-1-基）丁酸叔丁基酯（3）。
      1. 溶解硝基苯衍生物2（1.00克，1.28毫摩尔）在乙醇（10毫升）和甲醇（150微升）的7N氨溶液。活性炭上添加钯作为催化剂（钯/炭，150毫克，15重量％）至soluti上。
      2. 摇在帕尔氢化装置中在氢气氛（2.5巴）下16小时的非均相混合物。
      3. 通过它在乙醇中悬浮，并通过烧结的玻璃漏斗过滤该悬浮液制备硅藻土饼。倾从1.1.2.2悬浮在所制备的滤饼通过过滤除去Pd / C催化剂。
      4. 在旋转蒸发器（水浴温度〜40℃）除去通过温和蒸馏溶剂，得到化合物3，为棕色无定形固体（0.91克，95％）。
   3. 的4-（4-异硫氰基）合成-2-（4,7,10-三- 叔丁氧基羰基- 1,4,7,10-四氮杂-1-基）丁酸叔丁基酯（4）。
      1. （0.124毫升，1.58毫摩尔，1.3当量）加入二氯硫化碳为3的三乙胺的混合物（0.91克，1.22毫摩尔）和（0.685毫升，4.87毫摩尔，4当量）的二氯甲烷（15毫升）中。
      2. 大力搅拌反应英里在室温下用磁力搅拌器16小时夹具。
      3. 在旋转蒸发器（水浴温度〜40℃）除去通过温和蒸馏出溶剂，然后纯化通过柱色谱法（硅胶，5％甲醇/二氯甲烷）粗产物，得到产物4，为浅棕色无定形固体（0.51克，53％）。
2. 树枝状DCA的合成。
   1. 树枝状聚合物5的合成。
      1. 取G4-PAMAM树枝状聚合物（667毫克，在甲醇中10％的树枝状聚合物的溶液，4.67微摩尔），蒸发通过温和蒸馏甲醇用旋转蒸发器（水浴温度〜40℃），并溶解于DMF，残余物（4毫升）中。
      2. 添加三乙胺（0.105毫升，0.75毫摩尔，160当量），在60℃下搅拌45分钟，并添加异硫氰酸酯4（354毫克，0.45毫摩尔，1.5当量相对于树枝状聚合物的氨基表面基团）分批OVE，R 1小时。
      3. 搅拌用磁力搅拌器将反应混合物在45℃下48小时。
      4. 在40-60℃除去的球对球真空蒸馏装置中的溶剂。
      5. 净化用亲脂性凝胶过滤介质和甲醇作为洗脱剂通过大小排阻层析残余物。收拾列中，不施加压力溶胀该过滤介质在甲醇中在室温下（>4毫升每1g粉末的甲醇）至少3小时。通过收集1毫升分数进行重力分离。
      6. 分析用薄层色谱（TLC）所收集的级分。开发在15％甲醇/二氯甲烷的TLC板（仅位于基线时的最极性点是从树枝状产物衍生）。蒸发在旋转蒸发器（水浴温度〜40℃）通过温和蒸馏收集到的馏分，得到产物5（270毫克，91％）。
   2. 树枝状聚合物的合成 6。
      1. 溶解在甲酸（5毫升）中的受保护的树枝状螯合剂5（270毫克，4.23微摩尔），搅拌在60℃下该混合物24小时。
      2. 蒸发在旋转蒸发（约15毫巴的压力，水浴温度〜40℃）通过蒸馏甲酸并冷冻干燥该产物，得到6-（压力〜0.2毫巴^）9。
   3. 所述树枝状造影剂的合成（DCA）
      1. 溶解在水中的树枝状螯合剂6（4.35微摩尔）和将pH调节至7.0与0.1M氢氧化钠。
      2. 溶解GdCl _{3·6H 2} O（113毫克，304微摩尔）的水（1毫升）中，并添加其滴加至螯合剂6的历时4小时的溶液;保持与氢氧化钠水溶液（0.05M），通过测量pH值用pH计的pH值在7.0。
      3. 搅拌在室温吨磁力搅拌器将混合物emperature 24小时。
      4. 乙二胺四乙酸（EDTA，158毫克，426微摩尔）的溶液中分批添加经4小时以除去过量的Gd（III），同时保持与氢氧化钠水溶液（0.05M）pH在7.0。在室温下搅拌该混合物24小时。
      5. 执行大小排阻层析以除去大部分GdEDTA的和过量的EDTA。在使用水溶胀亲水凝胶过滤介质收拾列。混合物降低至合适的体积，并装载柱。洗脱用离子交换水列不施加压力。
      6. 使用3 kDa的离心过滤单元30分钟，在离心力1800 XG删除GdEDTA和EDTA的残留离心机样品。重复此步骤（左右五次）直到滤液显示不存在EDTA和GdEDTA的。将样品转移到一个烧瓶中，蒸发，然后冷冻干燥该溶剂，得到灰白色产物作为最终的DCA（186毫克，71％）。
         注:ESI-MS的方法检查没有EDTA和GdEDTA的。
      7. 确认没有钆（III）的作为使用二甲酚橙测试一个自由离子。溶解在醋酸盐缓冲液（pH 5.8），滤液（0.5毫升）中。添加二甲酚橙溶液几滴和跟踪变色（黄色或紫色表明不存在或游离钆（Ⅲ）分别离子在溶液中，存在^）11。

2.树枝状产品在体外表征

1. 联接到PAMAM树枝状聚合物（具有DOTA状的大环化合物的树枝状聚合物的载量）大环DOTA-单元的数目的估计
   1. 估计用¹ H-NMR（核磁共振-核磁共振光谱）。
      注意:此过程有可能在树枝状5和6，但不是在DCA。
      1. 记录¹ H NMR谱^12。
      2. 整合芳香族区和两个单独的脂族区（1脂族树枝状聚合物和大环的质子的信号; 2。第t -Bu基的信号）为树枝状聚合物5和6或只是一个脂族区域，分别。
         注意:没有单独的信号中的脂族区来自第t -Bu组树枝状6，因为它们已被水解。
      3. 运用EQ。 1或公式。 2来估计大环单元（n），其中R =积分的比值的数量（脂族/在等式1或脂族-树枝状芳香族/脂肪- 叔卜在公式2），H _DEND =质子数在树枝状聚合物， 高度 _的Ar =芳族质子的数量，H _t中 _BU =质子在叔 -Bu组的数量，和H _MAC =在一个大环的质子数。
         注意:无论是公式。 1或公式。 2 FO可以使用ř树枝状5，而只有等式1可用于树枝状聚合物6。由于可交换质子（在胺，酰胺，硫脲，或羧酸盐）通常被用氘取代，他们没有在计算假定。这里，H _DEND = 1128（5）或1000（6），H _氩 = 4，和H _MAC = 27被使用。
         （1）
         （2）
   2. 通过使用氮气的比率为硫从元素分析估计。
      1. 执行对固体样品枝（DCA在此工作）的元素分析。
      2. 运用EQ。 3估计大环单元（n），其中R =测定％N和％S，N _DEND或S _DEND的比例数=数氮或树枝状聚合物中的硫原子，和N _MAC或S _MAC =氮或硫原子的一个大环单元的数目。
         注意:因子2.29是从硫和氮的原子质量的比获得。在这项工作中，N- _DEND = 250，S _DEND = 2，N _MAC = 5和S _MAC = 1被使用。
         （3）
   3. 估计用的飞行基质辅助激光解吸/电离飞行时间（MALDI-TOF）。
      1. 执行MALDI-TOF MS分析^13。
      2. 计算大环单元（n）的根据式的数目。 4，其中M _Z =所观察到的质量（M / Z）中，z =电荷的物种中，M _DEND =树枝状部分的质量，以及M _MAC =一个大环单元的质量。
         没有TE:M = _DEND 14,306和M _MAC = 719在这项工作中使用。
         （4）
2. DCA浓度（[DCA]）的测定:散装磁化率测量（BMS）
   1. 在一个塑料瓶中管（[DCA]〜5-10毫摩尔）溶解在水（360微升）的DCA（5-10毫克）。
      注:[DCA]应在5-10毫的范围，以避免叔丁醇共振的可能的重叠在样品浓度> 15毫米，与水的谐振在δ= 4.7 ppm的。
   2. 添加60微升D ₂ O中的: 叔丁醇混合物（2:1体积/体积）至DCA的水溶液，并使用涡旋混合器将所得的溶液（420微升）混合。
   3. 转移400微升样品放入一个外NMR管，并放置一同轴NMR插入管与叔丁醇:H ₂ O的混合物（10:90体积/体积）到样品管中。
   4. 记录¹ H NMR谱，并测量在内部和外部的NMR管中（参考^）12从叔丁醇衍生谐振信号之间的频移。
   5. 运用EQ。 5，以确定[DCA]，其中T =绝对温度，Δχ=记录的移位，μ _有效 =有效磁的镧系元素离子为钆^{（III）14，}和s =一个常数依赖力矩（μ _有效 = 7.94在样品的形状和其在磁场（0，1/3，和在一个球体，平行于气缸，和气缸垂直于磁场的情况下的1/6，分别地）的位置。
      注:对于[DCA]得到的计算值应该被校正的原始浓度由于加入的D ₂ O中的: 叔丁醇溶液（60微升）。
      （5）
3. 动态光散射（DLS）测量。
   1. 制备过滤DCA溶液（0.2微米聚四氟乙烯/ PTFE过滤，每钆0.75毫（III））在4-（2-羟乙基）-1-哌嗪乙磺酸（HEPES）缓冲液（25mM，pH7.4）中，并将其转移到一个比色皿为DLS测量。
   2. 放置反应杯插入DLS装置和设置以下参数:30秒之前记录5次重复的15扫描（1次扫描= 12秒，折射率= 1.345，吸收= 1％），而不会在扫描之间，并与温度平衡延时。
   3. 导出所获取的数据和通过绘制人口（％），为大小（流体动力学直径）的函数得到的粒度分布的直方图。
4. 纵向和横向弛豫的测量。
   注意:使用弛豫时间分析仪¹⁵用类似的方法已经描述;使用具有的Topspin 300MHz的NMR波谱仪进行此过程软件。
   1. 准备一套H中DCA解决方案₂ O的:D ₂ O（500微升，10％D ₂ O H中₂ O，[DCA] = 2.0，2.5，3.0，3.5，4.0，4.5和5.0毫米，[HEPES ] = 25毫米）从DCA股票样本（见第2.2节）。
   2. 转移450微升溶液进入核磁共振管，并将其放入仪器中。
   3. 优化采集参数（90°激励脉冲持续时间（P1），以及辐射频率偏移（O _1）），然后执行T使用反转恢复（IR）和台车式赛尔Meiboom -吉尔_和 T2实验（CPMG ）的脉冲序列。
   4. 的_T1和T2 ₂弛豫时间测定。
      1. 选择所记录的测量，过程在F2尺寸的二维频谱，并执行交互式相位校正。
      2. 在分析/ T选择适当的切片（最大强度峰值） _{1 / T 2松弛窗口，整合它，以及该地区出口到放松模块。}
      3. 选择合适的拟合函数（invrec或uxnmrt2红外和CPMG实验，分别），得到的T ₁或T ₂弛豫时间。
   5. 重复步骤2.4.4.2-2.4.4.4的所有剩余[DCA]解决方案。
   6. 计算从所获得的_Ť1值的弛豫率（R ₁和R _{2）（R 1,2} = 1 / T _1,2）。
   7. 情节_的 R ₁和R _2（秒^-1），为钆（III）浓度的在毫函数。
   8. 确定纵向和横向弛豫，R ₁和R _2（毫^-1秒^-1），从拟合直线的斜率，由式所定义。 6，其中R _{I，观测值} =纵向（ⅰ= 1）或横向（ⅰ= 2）抗磁松弛率水在实验中所用的情况下顺磁物质的和[钆] =钆（III）的浓度。
      （6）

3. 在体外 MRI; DCA和GdDOTA的比较

1. 管幻影的制备
   1. 为两组实验其中计算造影剂的浓度制备的DCA（4×350微升）和GdDOTA（4×350微升）以及水样（4×350微升）的水溶液:（3.1.1.1）每钆（III）或每分子（3.1.1.2）。
      1. 准备两个样品DCA和两个GdDOTA 样品的分别每钆0.5和1.0毫米（III）的浓度。此外，准备两个水样（如控制管）。
      2. 准备两个DCA样品（2.5和每钆（III）或0.05 5.0毫和每个树枝状分子0.1毫摩尔），二GdDOTA样品（0.25，0.5毫摩尔）和两个水样（CONTRO升管）。
         注意:适当的DCA和GdDOTA浓度应通过稀释各自的股票样本通过BMS法测定浓度制备（参见2.2节）与HEPES缓冲液（pH 7.4）。为了简化计算，假设为平均每树枝状聚合物分子的大环单元的N = 50。因此，DCA的比率:GdDOTA为1:5，计算上的每个分子基础。
   2. 放置在300μl的塑料瓶管中的样品，从而避免气泡的在溶液中的存在。
      注:在塑料小瓶管的尺寸取决于所使用的射频线圈的类型和大小（在此，与卷线圈给出一个例子）。
   3. 插入样品的注射器（60 ml，此）的内部，用1mM GdDOTA填充 溶液，并将其放置在扫描仪。
      注:样品置于GdDOTA的水溶液，以避免易感性的影响（在磁场的Field变化对发生的不同磁化率的物质之间的接口附近）trength。
2. 参数优化和成像。
   1. 使用解剖扫描（航向/ Tripilot）与样品的注射器放置在磁体的等角点。
   2. 按红绿灯（调整扫描）来执行调整为垫补整个卷，中心频率（O _1），接收器增益（RG），并且所述发射增益（TX0和TX1）的（磁场均匀的调整）。
   3. 用于T ₁ -加权（T _1W）成像，选择快速低角度拍摄（FLASH）法。
   4. 选择在扫描仪使用扫描定位器垂直放置（注射器水平）样本冠状切片。
   5. 运用EQ。 7对比度-噪声（CNR）采集的优化参数^16，其中α=翻转角，TE =回波时间TR =重复时间，T _{1，A，T 1，B} =第t样品A的₁倍（T _1，A）和样品B（T _1，B）该CNR应该最大化（同样是有效的_ŧ2次:T _2，A和T _2，B）。
      注:t ₁和T ₂弛豫时间应设置为从纵向和横向弛豫（第2.4节）的测量获得的值，而TE，TR，α应距离CNR优化计算而获得。
      （7）
   6. 取得使用在前面的步骤（3.2.5）中获得的参数的图像。
   7. 计算信噪比（SNR）。
      1. 加载收购牛逼 _1瓦特图像（扫描）转换成图像显示及处理窗口，单击定义感兴趣区域 （ROI） 的区域 。
      2. 选择一个圆形的投资回报率，并在样品位置和背景绘制。接着，点击显示以获得的平均信号振幅（S _信号 ）和背景（S _噪声 ）的标准偏差。
      3. 重复步骤3.2.7.2对于DCA，GdDOTA和水样。
      4. 用计算公式SNR:SNR = S _信号 / S _的噪音 。
   8. 经过稍微修改程序，用快速采集弛豫增强（RARE）方法执行_T2加权（T _2W）成像。对于CNR采集参数的优化，运用EQ。 8。
      （8）

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结果

DCA的制备包括两个阶段:1）的单体的DOTA型螯合剂的合成（ 图1）和2）与G4 PAMAM树枝状聚合物和树枝状钆（III）络合物的后续制备螯合剂的耦合（ 图2） 。在第一阶段，制备含有四个羧酸的基于CYCLEN-DOTA型螯合剂和适合于进一步合成修饰的正交基。从1（DO3A- 叔丁基酯^）7开始制备，这是烷基化叔丁基2-溴...

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讨论

所述树枝状MRI造影剂的制备需要的单体单元的适当选择（ 即，螯合剂为钆（III））。它们减少这种顺磁性离子的毒性，迄今为止，各种各样的无环的和大环螯合剂用于此目的^1-3。在这些中，大环DOTA型螯合剂具有最高热力学稳定性和动力学惰性的，因此，是惰性MRI造影剂^1,18的制剂最优选的选择。此外，它们易发生各种合成转化，这导致双官能螯合剂，能够链接到各种功能分...

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材料

Name	Company	Catalog Number	Comments
Cyclen	CheMatech	C002
tert-Butyl bromoacetate	Alfa Aesar	A14917
N,N-Dimethylformamide	Fluka	40248
Potassium carbonate	Sigma-Aldrich	209619
4-(4-Nitrophenyl)butryic acid	Aldrich	335339
Thionyl chloride	Acros Organics	382662500	Note: Corrosive substance; toxic if inhaled
Bromine	Acros Organics	402841000	Note: causes severe skin burns, fatal if inhaled
Diethyl ether	any source
Sodium sulphate	Acros Organics	196640010
Chloroform	VWR Chemicals	22711.29
tert-Butyl 2,2,2-trichloroacetimidate	Aldrich	364789	Note: flammable substance; irritrant to skin and eyes
Boron trifluoride etherate	Acros Organics	174560250	48% BF3. Note: Flammable substance; causes skin burns, fatal if inhaled
Sodium bicarbonate	Acros Organics	424270010
Ethyl-acetate	any source		For column chromatography
n-Hexane	any source		For column chromatography
Bulb-to-bulb (Kugelrohr) distillation apparatus	Büchi		Model type: Glass oven B-585
Silicagel	Carl Roth GmbH	P090.2
Methanol	any source		For column chromatography
Dichloromethane	any source		For column chromatography
Ethanol	VWR Chemicals	20821.296
Ammonia	Acros Organics	428381000	7 N Solution in Methanol
Palladium	Aldrich	643181	15% wet
Hydrogenation apparatus PARR	PARR Instrument Company
Celite 503	Aldrich	22151
Sintered glass funnel	any source
Thiophosgen	Aldrich	115150	Note: irritrant to skin; toxic if inhaled
Triethylamine	Alfa Aesar	A12646
Dichloromethane	Acros Organics	348460010	Extra dry
Magnetic stirrer	any source
PAMAM G4 Dendrimer	Andrews ChemService	AuCS - 297	10% wt. solution in MeOH
Lipophylic Sephadex LH-20	Sigma	LH20100
Thin-layer chromatography plates	Merck Millipore	1.05554.0001
Formic acid	VWR Chemicals	20318.297
Lophylizer	any source
Gadollinium(III) chloride hexahydrate	Aldrich	G7532
Sodium hydroxide	Acros Organics	134070010
pH meter	any source
Ethylenediaminetetraacetic acid disodium salt dihydrate	Aldrich	E5134
Mass spectrometer (ESI)	Agilent		Ion trap SL 1100
Acetate buffer	any source		pH 5.8
Xylenol orange	Aldrich	52097	20 μM in acetate buffer
Hydrophylic Sephadex G-15	GE Healthcare	17-0020-01
Amicon Ultra-15 Centrifugal Filter Unit	Merck Millipore	UFC900324	Ultracel-3 membrane (MWCO 3000)
Centrifuge	any source
NMR spectrometer	Bruker		Avance III 300 MHz
Topspin	Bruker		Version 2.1
Combustion analysis instrument	EuroVector SpA		EuroEA 3000 Elemental Analyser
MALDI-ToF MS instrument	Applied Biosystems		Voyager-STR
Deuteriumoxid	Carl Roth GmbH	6672.3
tert-Butyl alcohol	Carl Roth GmbH	AE16.1
Vortex mixer	any source
Norell NMR tubes	Deutero GmbH	507-HP-7
NMR coaxial tube	Deutero GmbH	coaxialb-5-7
DLS instrument	Malvern		Zetasizer Nano ZS
0.20 μm PTFE filter	Carl Roth GmbH	KC94.1
HEPES	Fisher BioReagents	BP310
Plastic tube vials	any source
Dotarem	Guerbet		NDC 67684-2000-1
MRI scanner	Bruker		BioSpec 70/30 USR magnet (7 T). Note: potential hazards related to high magnetic fields
RF coil	Bruker		Dual frequency volume coil (RF RES 300 1H/19F 075/040 LIN/LIN TR)
Paravision (software)	Bruker		Version 5.1