此方法可以帮助回答皮肤组织再生领域的基本问题,即如何取代自然皮肤中所含的各种细胞类型和结构。该技术的主要优点是,可以收集自体全厚皮肤,以最小的供体站点发病率。演示这个程序的将是比尔·法里内利,他是我们实验室的研究员。
从生产阶段的设置开始此过程,如文本协议中所述。将两个切断轮同心地安装到旋转工具上。在较大的较高栅格石切割轮上使用较小的下格金刚石切割轮。
将可调节臂放在旋转工具上,将灯对着切割轮。为了增强可视化效果,在生产设置上放置解剖显微镜,以便目镜聚焦在切割盘上。重塑针尖时,请佩戴防护眼镜和手术面罩,以防止细金属颗粒进入眼睛或气道。
根据实验要求选择适当仪表尺寸的皮下针。标记每个收获针上的预期长度。将针头垂直于旋转工具,并打开电源,使用外部切割盘的边缘切断针在标记点上的多余的长度。
将缩短的钝针连接到生产阶段的母 Luer 锁连接器。调整水平旋转阶段,使指针与旋转工具上的切割盘平行 12 度角。打开头顶灯并调整其位置,同时在放大下观察针头,直到光线从针头的中线反射出来。
打开旋转工具的电源。然后使用平移阶段将针头推进到内部切割盘。继续缓慢地将针对着切割盘,直到切割盘到达针头的中线。
缓慢地将切割针表面从内金刚石轮移动到外石轮上,以更精细的抛光完成切割针表面。将针头从切割盘上收回。使用垂直旋转阶段,将针旋转 180 度。
重复这些步骤以重塑针头的另一侧。现在,将针头从生产阶段取出。用略小于针头内径的金属丝清洁内孔。
使用锋利的木棍,去除可能仍附着在新成型针头边缘的任何毛刺。当需要大量微柱时,从 20 毫升注射器中取出柱塞。然后将注射器连接到吸气适配器上。
通过将收获针连接到注射器来完成组装。使用一块无菌吸管将吸气适配器连接到无菌吸气罐。确保收割装置连接到罐式输入,使液体畅通无阻地流入罐体。
现在将设备连接到负压源。通过将收获针插入皮肤来收获微层。在收获过程中,间歇性地将收获针浸入无菌盐水容器中,以冲洗系统。
手放在一根金属线或略小于收获针内径的针。如果针头堵塞,可以通过将金属丝插入针孔来清除。当所需的微量在罐中积聚时,断开设备与吸力的连接。
然后将吸气罐中的内容物倒入过滤器中,收集微镜。此处显示的是从正面和侧面查看的成品收获针。请注意尖端的两个切割点。
收获针应该能够从全厚皮肤组织中收集微球,成功率约为80%至90%。在此图中,检查标记表示一毫米。每个微镜应包含表皮、真皮和一些皮下脂肪。
微哥伦布可以直接应用于伤口愈合,也可以与不同的基质材料结合,产生组合结构。微哥伦布也可以在培养中保持用于体外研究。在执行大容量收获时,重要的是要记住加入间歇性盐水冲洗。
虽然这种方法是为皮肤伤口修复而设计的,但类似的原理可以应用于其他器官系统,如需要自体组织移植的肌肉。