Bu yöntem, doğal deride bulunan çeşitli hücre tipleri ve yapıları yerine nasıl deri dokusu rejenerasyon alanında temel sorulara cevap yardımcı olabilir. Bu tekniğin en büyük avantajı otolog tam kalınlıkta cilt minimal donör site morbidite ile toplanabilir olmasıdır. Prosedürü gösteren Bill Farinelli, bizim laboratuvarda bir araştırma görevlisi olacaktır.
Bu yordamı metin protokolünde açıklandığı gibi üretim aşamasının kurulumuyla başlayın. Döner alete eşmerkezli olarak iki kesme tekerleği törleyin. Daha büyük bir ızgara taş kesme tekerleği üzerinde daha küçük bir alt ızgara elmas kesme tekerleği kullanın.
Kesme tekerleklerini hedefleyen ışıkla döner aletin üzerine ayarlanabilir bir kol la havai bir ışık kaynağı yerleştirin. Görselleştirmeyi geliştirmek için, bir diseksiyon mikroskobu üretim kurulumu üzerine yerleştirin, böylece mercek kesme disklerine odaklanın. İğne ucunu yeniden şekillendirirken, ince metal parçacıkların gözlere veya solunum yollarına girmesini önlemek için koruyucu gözlük ve cerrahi maske takın.
Deneysel gereksinimlere göre uygun ölçü boyutunda hipodermik iğneler seçin. Her hasat iğnesi üzerinde amaçlanan uzunluğu işaretleyin. İğneyi, işaretlenen noktada iğnenin fazla uzunluğunu kesmek için dış kesme diskinin kenarını kullanarak güçle döner alete dik olarak indirin.
Kısaltılmış künt iğneyi üretim aşamasındaki dişi Luer kilit konektörüne bağlayın. Yatay dönüş aşamasını, iğnenin döner aletteki kesme disklerine paralel olarak 12 derecelik açıda olması için ayarlayın. Havai ışığı açın ve büyütme altında iğneyi gözlemlerken konumunu ayarlayın, ta ki ışık iğnenin orta çizgisinden yansıyana kadar.
Döner aletin gücü. Daha sonra iğneyi iç kesme diskine doğru ilerletmek için çeviri aşamasını kullanın. Kesme diski iğnenin yaklaşık orta hattına ulaşana kadar iğneyi kesme diskine doğru yavaşça ilerletmeye devam edin.
Kesme iğne yüzeyini iç elmas tekerlekten dış taş tekerleğe doğru yavaşça hareket ettirin ve kesme iğne yüzeyini daha ince bir cilayla tamamla. İğneyi kesme diskinden uzaklaştırın. Dikey dönüş aşamasını kullanarak iğneyi 180 derece döndürün.
İğnenin diğer tarafını yeniden şekillendirmek için bu adımları tekrarlayın. Şimdi iğneyi üretim aşamasından çıkarın. İğnenin iç çapından biraz daha küçük metal bir tel ile iç deliği temizleyin.
Keskin bir tahta sopa kullanarak, hala yeni oluşturulan iğne kenarlarına bağlı olabilir herhangi bir çapak kaldırın. Yüksek hacimli mikrokoller gerektiğinde, 20 mililitrelik bir şırıngadan pistonu çıkarın. Sonra bir emme adaptörü için şırınga takın.
Şırıngaya hasat iğnesi takarak montajı tamamlayın. Emme adaptörünü steril bir emme tüpüne bağlamak için bir parça steril emme tüpü kullanın. Hasat cihazının, sıvının engellenmeden kutuya akmasını sağlayan bir kutu girişine bağlı olduğundan emin olun.
Şimdi cihazı negatif basınç kaynağına bağlayın. Hasat iğnesini cilde ekleyerek mikrokolleri hasat edin. Aralıklı olarak sistemi yıkamak için hasat işlemi sırasında steril salin bir kap içine hasat iğne daldırma.
Elde bir metal tel veya hasat iğnesinin iç çapından biraz daha küçük bir iğne tutun. İğne tıkanırsa, metal telin iğne deliklerine takılması ile temizlenebilir. İstenilen miktarda mikrokol kutuda biriktiğinde, aygıtın emmeile bağlantısını kesin.
Daha sonra mikrosütunları toplamak için emme kutusunun içindekileri bir filtreden dışarı dökün. Burada gösterilen bir bitmiş hasat iğnesi önden ve yandan görülüyor. Ucundaki iki kesme noktasını not edin.
Hasat iğneleri yaklaşık % 80-90 başarı oranı ile tam kalınlıkta cilt dokusundan mikrokoller toplamak gerekir. Bu şekilde, onay işaretleri bir milimetreyi temsil ediyor. Her mikrokolon epidermis, dermis ve bazı deri altı yağ içermelidir.
Mikrokoller doğrudan yara iyileşmesiiçin uygulanabilir veya kombinasyon yapıları üretmek için farklı matris malzemelerle kombine edilebilir. Mikrokolonlar in vitro çalışmalar için kültür de muhafaza edilebilir. Yüksek hacimli hasat yaparken, aralıklı bir tuzlu floş dahil etmeyi unutmamak önemlidir.
Bu yöntem deri yara onarımı için tasarlanmış olsa da, benzer bir ilke otolog doku greftleme gerekli olduğu kaslar gibi diğer organ sistemleri için uygulanabilir.
