Questo metodo può aiutare a rispondere a domande essenziali nel campo della rigenerazione del tessuto cutaneo, che è come sostituire i diversi tipi di cellule e strutture contenute nella pelle naturale. Il vantaggio principale di questa tecnica è che la pelle autologa a pieno spessore può essere raccolta con una morbilità minima del sito del donatore. A dimostrare la procedura sarà Bill Farinelli, che è un ricercatore associato nel nostro laboratorio.
Iniziare questa procedura con l'impostazione della fase di produzione come descritto nel protocollo di testo. Installare due ruote di taglio concentricamente sull'utensile rotante. Utilizzare una ruota di taglio del diamante a griglia inferiore più piccola su una ruota di taglio in pietra a griglia più grande.
Posizionare una sorgente luminosa aerea con un braccio regolabile sopra l'utensile rotante con la luce rivolta alle ruote da taglio. Per migliorare la visualizzazione, posizionare un microscopio di sezionamento sulla configurazione di produzione in modo che l'oculare sia focalizzato sui dischi di taglio. Quando si rimodella la punta dell'ago, indossare occhiali protettivi e una maschera chirurgica per evitare che particelle metalliche fini entrino negli occhi o nelle vie aeree.
Scegliere aghi ipodermici della dimensione di gauge appropriata in base a requisiti sperimentali. Contrassegnare la lunghezza prevista su ogni ago da raccolta. Abbassare l'ago perpendicolarmente all'utensile rotante con l'alimentazione sull'uso del bordo del disco di taglio esterno per tagliare la lunghezza in eccesso dell'ago nel punto contrassegnato.
Collegare l'ago smussato accorciato al connettore di blocco Luer femmina nella fase di produzione. Regolare lo stadio di rotazione orizzontale in modo che l'ago sia con un angolo di 12 gradi parallelo ai dischi di taglio sull'utensile rotante. Accendere la luce aerea e regolarne la posizione osservando l'ago sotto ingrandimento fino a quando la luce non viene riflessa dalla linea mediana dell'ago.
Accensione dello strumento rotativo. Quindi utilizzare la fase di traslazione per far avanzare l'ago verso il disco di taglio interno. Continuare ad avanzare lentamente l'ago contro il disco di taglio fino a quando il disco di taglio raggiunge approssimativamente la linea mediana dell'ago.
Spostare lentamente la superficie dell'ago tagliato dalla ruota diamanta interna sulla ruota esterna in pietra per finire la superficie dell'ago tagliata con uno smalto più fine. Ritrarre l'ago lontano dal disco di taglio. Utilizzando lo stadio di rotazione verticale, ruotare l'ago di 180 gradi.
Ripetere questi passaggi per rimodellare l'altro lato dell'ago. Ora rimuovi l'ago dalla fase di produzione. Pulire il foro interno con un filo metallico leggermente più piccolo del diametro interno dell'ago.
Utilizzando un bastone di legno affilato, rimuovere eventuali bave che possono ancora essere attaccate ai bordi dell'ago appena formato. Quando è necessario un volume elevato di microcolonne, rimuovere lo stantuffo da una siringa da 20 millilitri. Quindi attaccare la siringa a un adattatore di aspirazione.
Completare il montaggio attaccando un ago da raccolta alla siringa. Utilizzare un pezzo di tubo di aspirazione sterile per collegare l'adattatore di aspirazione a un contenitore di aspirazione sterile. Assicurarsi che l'apparato di raccolta sia collegato a un ingresso contenitore che consente al fluido di fluire nel contenitore senza impedimenti.
Ora collegare l'apparato a una fonte di pressione negativa. Raccogliere le microcolonne inserendo l'ago da raccolta nella pelle. Immergere a intermittenza l'ago da raccolta in un contenitore di soluzione salina sterile durante la procedura di raccolta per lavare il sistema.
Tenere a portata di mano un filo metallico o un ago leggermente più piccolo del diametro interno dell'ago di raccolta. Se l'ago si intasa, può essere cancellato inserendo il filo metallico nel foro dell'ago. Quando la quantità desiderata di microcolonne si è accumulata nel contenitore, scollegare il dispositivo dall'aspirazione.
Quindi versare il contenuto del contenitore di aspirazione attraverso un filtro per raccogliere le microcolonne. Qui è mostrato un ago da raccolta finito visto dalla parte anteriore e laterale. Si notano i due punti di taglio sulla punta.
Gli aghi di raccolta dovrebbero essere in grado di raccogliere microcolonne da tessuti cutanei a pieno spessore con un tasso di successo approssimativo dell'80-90%. In questa figura, i segni di spunta rappresentano un millimetro. Ogni microcolonna deve contenere epidermide, derma e del grasso sottocutaneo.
Le microcolonne possono essere applicate direttamente alla guarigione delle ferite o possono essere combinate con diversi materiali matriciografici per produrre costrutti combinati. Le microcolonne possono anche essere mantenute in coltura per studi in vitro. Durante l'esecuzione di una raccolta ad alto volume, è importante ricordare di incorporare uno scarico salino intermittente.
Sebbene questo metodo sia stato progettato per la riparazione delle ferite cutanee, un principio simile potrebbe essere applicato ad altri sistemi di organi come i muscoli in cui è necessario l'innesto autologo dei tessuti.
