Cette méthode peut aider à répondre aux questions essentielles dans le domaine de régénération des tissus cutanés qui est de savoir comment remplacer les différents types de cellules et les structures qui sont contenues dans la peau naturelle. Le principal avantage de cette technique est que la peau autologue pleine épaisseur peut être recueillie avec la morbidité minimale de site de donneur. Bill Farinelli, associé de recherche dans notre laboratoire, démontrera la procédure.
Commencez cette procédure par la configuration de l’étape de production telle que décrite dans le protocole de texte. Installez deux roues de coupure concentriquement sur l’outil rotatif. Utilisez une plus petite roue de coupe de diamant de grille inférieure au-dessus d’une plus grande roue de coupure de pierre de grille plus élevée.
Placez une source lumineuse aérienne avec un bras réglable au-dessus de l’outil rotatif avec la lumière dirigée vers les roues de coupe. Pour améliorer la visualisation, placez un microscope disséquant au-dessus de la configuration de production de sorte que l’oculaire soit concentré sur les disques de coupe. Lors du remodelage de la pointe de l’aiguille, portez des lunettes de protection et un masque chirurgical pour empêcher les particules métalliques fines d’entrer dans les yeux ou les voies respiratoires.
Choisissez des aiguilles hypodermiques de la taille appropriée de la jauge en fonction des exigences expérimentales. Marquer la longueur prévue sur chaque aiguille de récolte. Abaissez l’aiguille perpendiculairement à l’outil rotatif avec la puissance sur l’utilisation du bord du disque de coupe externe pour couper la longueur excédentaire de l’aiguille au point marqué.
Connectez l’aiguille émoussée raccourcie au connecteur femelle de serrure de Luer sur l’étape de production. Ajustez l’étape de rotation horizontale de sorte que l’aiguille soit à un angle de 12 degrés parallèle aux disques de coupe sur l’outil rotatif. Allumez la lumière aérienne et ajustez sa position tout en observant l’aiguille sous grossissement jusqu’à ce que la lumière soit réfléchie hors de la ligne médiane de l’aiguille.
Puissance sur l’outil rotatif. Ensuite, utilisez l’étape de traduction pour avancer l’aiguille vers le disque de coupe interne. Continuez à avancer l’aiguille lentement contre le disque de coupe jusqu’à ce que le disque de coupe atteigne approximativement la ligne médiane de l’aiguille.
Déplacez lentement la surface de l’aiguille coupée de la roue intérieure en diamant sur la roue extérieure en pierre pour terminer la surface de l’aiguille coupée avec un poli plus fin. Retirer l’aiguille du disque de coupe. À l’aide de l’étape de rotation verticale, faites pivoter l’aiguille à 180 degrés.
Répétez ces étapes pour remodeler l’autre côté de l’aiguille. Maintenant, retirez l’aiguille de l’étape de production. Nettoyez l’alésage intérieur avec un fil métallique légèrement plus petit que le diamètre intérieur de l’aiguille.
À l’aide d’un bâton en bois tranchant, retirer les bavures qui peuvent encore être fixées aux bords de l’aiguille nouvellement formée. Lorsqu’un volume élevé de microcoumns est nécessaire, retirez le piston d’une seringue de 20 millilitres. Attachez ensuite la seringue à un adaptateur d’aspiration.
Terminer l’assemblage en attachant une aiguille de récolte à la seringue. Utilisez un morceau de tube d’aspiration stérile pour connecter l’adaptateur d’aspiration à une boîte d’aspiration stérile. Assurez-vous que l’appareil de récolte est relié à une entrée de boîte qui permet au fluide de s’écouler dans la boîte sans entrave.
Connectez maintenant l’appareil à une source de pression négative. Récolter les microcoumns en insérant l’aiguille de récolte dans la peau. Tremper par intermittence l’aiguille de récolte dans un récipient de solution saline stérile pendant la procédure de récolte pour rincer le système.
Gardez sous la main un fil métallique ou une aiguille légèrement plus petit que le diamètre intérieur de l’aiguille de récolte. Si l’aiguille est obstruée, elle peut être déblayée en insérant le fil métallique dans l’alésage de l’aiguille. Lorsque la quantité désirée de microcoumns s’est accumulée dans la boîte, déconnectez l’appareil de l’aspiration.
Versez ensuite le contenu de la boîte d’aspiration à travers un filtre pour recueillir les microcoumns. On y voit une aiguille de récolte finie vue de l’avant et du côté. Notez les deux points de coupe à la pointe.
Les aiguilles de récolte devraient être en mesure de recueillir des microcoumns à partir de tissus cutanés de pleine épaisseur avec un taux de réussite d’environ 80 à 90 %. Dans ce chiffre, les marques de contrôle représentent un millimètre. Chaque microcoumn doit contenir de l’épiderme, du derme et de la graisse sous-cutanée.
Les microcoumns peuvent être appliqués directement à la cicatrisation des plaies ou ils peuvent être combinés avec différents matériaux matriciels pour produire des constructions combinées. Les microcoumns peuvent également être maintenus en culture pour des études in vitro. Tout en effectuant une récolte à fort volume, il est important de se rappeler d’incorporer une chasse d’eau saline intermittente.
Bien que cette méthode ait été conçue pour la réparation des plaies cutanées, un principe similaire pourrait être appliqué à d’autres systèmes organiques tels que les muscles où la greffe de tissu autologue est nécessaire.
