この方法は、天然皮膚に含まれる多様な細胞タイプおよび構造を置き換える方法である皮膚組織再生分野の本質的な質問に答えるのに役立ちます。この技術の主な利点は、自己の完全な厚さの皮膚が最小限のドナー部位の罹患率で収集することができるということです。この手順を実証するのは、私たちの研究室の研究員であるビル・ファリネリです。
テキスト プロトコルで説明されているように、実稼働段階の設定からこの手順を開始します。2つのカットオフホイールを回転ツールに同心円状に取り付けます。より大きな高いグリッドストーンカットオフホイールの上に小さな下グリッドダイヤモンドカットオフホイールを使用してください。
切削ホイールを対象としたライトで、回転ツールの上に調整可能なアームを備えたオーバーヘッド光源を配置します。可視化を強化するために、切断ディスクに接眼レンズが焦点を当てるように、解剖顕微鏡を生産設定の上に配置します。針先を整形するときは、目や気道に金属微粒子が入るのを防ぐために、保護アイウェアと外科用マスクを着用してください。
実験要件に基づいて適切なゲージサイズの皮下注射針を選択します。各収穫針の目的の長さをマークします。外切断ディスクの端を使用して、マークされた点で針の余分な長さを切断するために電源を入れて、回転工具に垂直に針を下げます。
短くした鈍い針を生産段階の女性ルアーロックコネクタに接続します。回転工具の切断ディスクに対して針が12度の角度になるように、水平回転ステージを調整します。頭上の光を点灯し、光が針の正中線から反射されるまで、拡大の下で針を観察しながら、その位置を調整します。
ロータリーツールの電源を入けます。次に、翻訳段階を使用して、針を内側の切断ディスクに向かって進めます。切断ディスクが針の正中線に近くなるまで、切断ディスクに対して針をゆっくりと進め続けます。
カット針の表面を内側のダイヤモンドホイールから外側の石の車輪にゆっくりと移動し、カット針の表面を細かく磨きます。切断ディスクから針を引き込みます。垂直回転ステージを使用して、針を180度回転させます。
これらの手順を繰り返して、針の反対側の形状を変更します。今、生産段階から針を取り除きます。内側の穴は、針の内径より少し小さい金属線で清掃します。
鋭利な木製の棒を使用して、新しく形成された針の端にまだ取り付けられている可能性のあるバリを取り除きます。大量のマイクロカラムが必要な場合は、20ミリリットルのシリンジからプランジャーを取り除きます。次に、シリンジを吸引アダプターに取り付けます。
収穫針をシリンジに取り付けて、組み立てを完成させます。滅菌吸引管の一部を使用して、吸引アダプターを無菌吸引キャニスターに接続します。収穫装置がキャニスター入力に接続されていることを確認して、液体が妨げられずにキャニスターに流れ込むことができます。
装置を負圧源に接続します。採取針を皮膚に挿入して、マイクロカラムを収穫する。収穫針を回収手順中に滅菌生理食いの容器に断続的に浸し、システムをフラッシュする。
金属製のワイヤーや針は、収穫針の内径より少し小さく保ちます。針が詰まった場合は、針穴に金属線を挿入することでクリアできます。所望の微小列量がキャニスターに蓄積されたら、吸引からデバイスを取り外します。
次に、フィルターを通して吸引キャニスターの内容物を注ぎ出し、マイクロカラムを収集します。ここに示されているのは、前部と側面から見た完成した収穫針です。先端の 2 つの切断点に注意してください。
収穫針は、およそ80〜90%の成功率で完全な厚さの皮膚組織からマイクロカラムを収集することができるべきである。この図では、チェック マークは 1 ミリメートルを表します。各マイクロカラムには、表皮、真皮、皮下脂肪が含まれている必要があります。
マイクロカラムは創傷治癒に直接適用することができ、異なるマトリックス材料と組み合わせて組み合わせ構造を作り出すことができます。マイクロカラムは、インビトロ研究のための培養中に維持することもできる。大量の収穫を行っている間、断続的な生理食いのフラッシュを組み込むことを忘れないでください。
この方法は皮膚創傷修復のために設計されたが、同様の原理は、自家組織の移植が必要な筋肉などの他の器官系に適用することができる。
