Este método puede ayudar a responder preguntas esenciales en el campo de regeneración de tejido de la piel que es cómo reemplazar los diversos tipos celulares y estructuras que están contenidos en la piel natural. La principal ventaja de esta técnica es que la piel autóloga de espesor completo se puede recoger con una morbilidad mínima en el sitio del donante. Demostrando el procedimiento estará Bill Farinelli, quien es un investigador asociado en nuestro laboratorio.
Comience este procedimiento con la configuración de la etapa de producción como se describe en el protocolo de texto. Instale dos ruedas de corte concéntricamente en la herramienta giratoria. Utilice una rueda de corte de diamante de rejilla inferior más pequeña sobre una rueda de corte de piedra de rejilla más grande.
Coloque una fuente de luz aérea con un brazo ajustable sobre la herramienta giratoria con la luz dirigida a las ruedas de corte. Para mejorar la visualización, coloque un microscopio de disección sobre la configuración de producción para que el ocular se centre en los discos de corte. Al remodelar la punta de la aguja, use gafas protectoras y una máscara quirúrgica para evitar que las partículas de metal fino entren en los ojos o las vías respiratorias.
Elija agujas hipodérmicas del tamaño de calibre adecuado en función de los requisitos experimentales. Marque la longitud prevista en cada aguja de cosecha. Baje la aguja perpendicularmente a la herramienta giratoria con la potencia encendida utilizando el borde del disco de corte exterior para cortar la longitud excesiva de la aguja en el punto marcado.
Conecte la aguja contundente acortada al conector de bloqueo Luer hembra en la etapa de producción. Ajuste la etapa de rotación horizontal de modo que la aguja esté en un ángulo de 12 grados paralelo a los discos de corte de la herramienta giratoria. Encienda la luz superior y ajuste su posición mientras observa la aguja bajo aumento hasta que la luz se refleje en la línea media de la aguja.
Encienda la herramienta giratoria. A continuación, utilice la etapa de traducción para avanzar la aguja hacia el disco de corte interior. Siga avanzando lentamente la aguja contra el disco de corte hasta que el disco de corte alcance aproximadamente la línea media de la aguja.
Mueva lentamente la superficie de la aguja de corte de la rueda interior del diamante a la rueda exterior de piedra para terminar la superficie de la aguja de corte con un pulido más fino. Retire la aguja del disco de corte. Usando la etapa de rotación vertical, gire la aguja 180 grados.
Repita estos pasos para remodelar el otro lado de la aguja. Ahora retire la aguja de la etapa de producción. Limpie el orificio interior con un alambre metálico ligeramente más pequeño que el diámetro interior de la aguja.
Con un palo de madera afilado, retire las rebabas que aún puedan estar unidas a los bordes de la aguja recién formada. Cuando se necesite un gran volumen de microcolumnas, retire el émbolo de una jeringa de 20 mililitros. A continuación, conecte la jeringa a un adaptador de aspiración.
Complete el conjunto fijando una aguja de cosecha a la jeringa. Utilice una pieza de tubo de succión estéril para conectar el adaptador de succión a un recipiente de succión estéril. Asegúrese de que el aparato de cosecha esté conectado a una entrada de recipiente que permita que el fluido fluya hacia el recipiente sin obstáculos.
Ahora conecte el aparato a una fuente de presión negativa. Cosecha las microcolumnas insertando la aguja de cosecha en la piel. Sumerja intermitentemente la aguja de cosecha en un recipiente de solución salina estéril durante el procedimiento de recolección para vaciar el sistema.
Mantenga a mano un alambre metálico o una aguja ligeramente más pequeña que el diámetro interno de la aguja de cosecha. Si la aguja se obstruye, se puede limpiar insertando el alambre metálico en el orificio de la aguja. Cuando se haya acumulado la cantidad deseada de microcolumnas en el contenedor, desconecte el dispositivo de la succión.
A continuación, vierta el contenido de la bombona de succión a través de un filtro para recoger las microcolumnas. Aquí se muestra una aguja de cosecha terminada vista desde el frente y desde el costado. Observe los dos puntos de corte en la punta.
Las agujas de cosecha deben ser capaces de recoger microcolumnas de tejido cutáneo de espesor completo con una tasa de éxito aproximada de 80 a 90%. En esta figura, las marcas de verificación representan un milímetro. Cada microcolumna debe contener epidermis, dermis y algo de grasa subcutánea.
Las microcolumnas se pueden aplicar directamente a la cicatrización de heridas o se pueden combinar con diferentes materiales de matriz para producir construcciones combinadas. Las microcolumnas también se pueden mantener en cultivo para estudios in vitro. Mientras se realiza una cosecha de gran volumen, es importante recordar incorporar un lavado salino intermitente.
Aunque este método fue diseñado para la reparación de heridas en la piel, un principio similar podría aplicarse a otros sistemas de órganos como los músculos donde se necesita injerto de tejido autólogo.
