这种方法可以帮助回答生殖领域的关键问题,例如如何通过预注射分离、阴道开放以及在进行生育研究之前建立第一个雌激素来确定小鼠和小鼠的青春期发病。该技术的主要优点是,通过使用证明的非侵入性方法建立青春期发作,可以跟踪和进行性成熟动物的生育研究。这项技术的影响延伸到诊断生殖缺陷,如基因突变或治疗易受影响生殖能力,如内分泌破坏化学品造成的。
虽然这种方法可以提供对小鼠生殖能力的洞察,但它也可以应用于其他模型系统,如大鼠和仓鼠。这种方法的视觉演示至关重要,因为它需要良好和细腻的动物处理技能。正确握住小鼠,以进行以下肿瘤前分离和阴道开口的视觉识别尤为重要。
要准备工作区,请将垫子放在桌子上。然后放置一个干净的鼠标笼顶部与网格朝上,在垫子上。接下来,在工作区中设置比例。
将干净的 500 至 1000 毫升烧杯放在秤上,然后进行皮。然后在工作区旁边放置一个工作表以记录数据。在此之后,将鼠标笼放在工作区中。
打开笼子,将盖子、水瓶和食物架放在桌子上。将鼠标握在尾巴上时,请放在干净的鼠标笼顶部。在保持尾部的保持的同时,允许鼠标探索笼子顶部的网格。
轻轻地向后拉尾巴,接近另一只手靠近颈部和耳朵的皮肤。用拇指和食指抓住肩膀和颈部之间的松弛皮肤。然后用剩下的手指抓住背部的皮肤,轻轻按压鼠标。
用自由手,轻轻地推皮周围的阴道背。在预吸分离时,预发皮肤向后滑动,露出青光的性气。检查后,记录是否存在预处理分离。
在此之后,称量鼠标并记录其重量。然后将鼠标重新引入外壳笼,将烧杯放在笼子地板上,让鼠标自己退出。在工作区放置棉球、大烧杯和一瓶无菌水。
将无菌水倒入烧杯中。然后,用烧杯中的无菌水加湿棉球,并放在干净的笼子顶部旁边。将鼠标笼放在工作区中。
然后将鼠标移到笼子顶部,握住它的尾巴底部。轻轻拉上鼠标的尾巴,鼓励鼠标向前移动。在此之后,抬起尾巴,同时用三根手指支撑臀部。
用加湿的棉球轻轻清洁外阴,然后检查外阴以确定阴道是否完全打开。记录阴道开口是否发生。然后称鼠标,然后回到家里的笼子里。
准备一个干净的老鼠笼与盖子,水,食物,床上用品和筑巢材料,每对繁殖的老鼠。然后填写笼卡,并填写必要的信息。将准备好的床上用品笼放在干净的桌子上,然后慢慢将戴手套的手放入鼠标笼中,并放在笼子里一小段时间。
用戴手套的手慢慢接近老鼠。当老鼠跑过手,抓住一只老鼠的尾巴在拇指和食指之间,然后抬起鼠标的尾巴。鼠标可以由尾巴保持,而无需身体的支持长达两到三秒钟。
将小鼠放在准备好的繁殖笼中,然后在确保雌性小鼠有食物、水和筑巢材料后关闭笼子。运用该方法,研究了两种不同的转基因小鼠模型。阴道开放和预注射分离发生在相同的年龄和重量在异质小鼠和对照小鼠。
相反,阴道开放和预分娩分离在有条件的淘汰女性和男性中显著延迟,并随着体重增加。在4.5周大时,雌性对等小鼠和有条件的淘汰小鼠的体重相当,而有条件的淘汰雄性则略重于对组。这表明,有条件敲除小鼠阴道开放和预分离的延迟与体重增加的延迟没有关系。
青春期发作结束后,生育研究开始于10至16周。雄性小鼠和雌性异卵小鼠均为亚育鼠。在三个月的研究中,异质雌性产生的垃圾较少,雄性小鼠和雌性异卵小鼠产生的垃圾较少。
为了说明在建立生育分析之前确认青春期发病的重要性,在有条件的敲孔小鼠中评估了生殖能力。在70天的生育研究中,无论是有条件的淘汰男性还是女性都没有产生任何垃圾。在尝试此程序时,重要的是要记住小心处理小鼠,并在接近和处理动物时保持冷静。
按照这个程序, 其他方法, 如测量循环性激素水平可以回答其他问题, 如不孕不育或其他亚不育是由异常睾酮, 雌激素, 卵泡刺激激素, 和叶黄素激素水平.不要忘记,由于有咬人和过敏的风险,与老鼠一起工作可能是危险的。为了减少接触,在执行此过程时,应始终采取预防措施,如戴上手套和实验室外套,以及小心处理小鼠。