이 방법은 생식 분야의 주요 질문에 대답하는 데 도움이 될 수 있습니다, 예컨대 preputial 분리를 통해 마우스와 쥐의 사춘기 발병을 결정하는 방법과 같은, 질 개구부, 불임 연구를 수행하기 전에 첫 번째 에스트루를 확립. 이 기술의 주요 장점은 입증 된 비 침습적 접근법을 사용하여 사춘기 발병을 확립함으로써 성적으로 성숙한 동물에서 불임 연구를 따르고 수행 할 수 있다는 것입니다. 이 기술의 의미는 화학 물질을 방해하는 내분비와 같은 생식 능력에 영향을 받기 쉬운 유전 돌연변이 또는 처리에 기인하는 재생에 있는 적자의 진단을 향해 확장합니다.
이 방법은 마우스에 있는 생식 능력에 통찰력을 제공할 수 있더라도, 또한 쥐와 햄스터와 같은 그밖 모형 시스템에 적용될 수 있습니다. 이 방법의 시각적 데모는 좋은 섬세한 동물 처리 기술이 필요하기 때문에 매우 중요합니다. 미리 분리 및 질 개방의 다음 시각적 식별을 위해 마우스를 올바르게 유지하는 것이 특히 중요합니다.
작업 영역을 준비하려면 패드를 테이블에 놓습니다. 그런 다음 깨끗한 마우스 케이지 위에 그리드가 위를 향하여 패드에 놓습니다. 다음으로 작업 영역에 스케일을 설정합니다.
깨끗한 500 ~1000 밀리리터 비커를 스케일에 놓고 그것을 잘 어울럽힙거라. 그런 다음 작업 영역 옆에 시트를 배치하여 데이터를 기록합니다. 이 후 마우스 케이지를 작업 영역에 배치합니다.
케이지를 열고 뚜껑, 물병 및 음식 홀더를 테이블에 제거합니다. 꼬리에 마우스를 들고있는 동안, 깨끗한 마우스 케이지 상단에 놓습니다. 꼬리를 잡는 동안 마우스가 케이지 상단의 격자를 탐색하도록 합니다.
꼬리를 부드럽게 뒤로 당기고 다른 손으로 목과 귀에 가까운 피부에 접근합니다. 엄지와 집게 손가락으로 어깨와 목 사이의 느슨한 피부를 잡습니다. 그런 다음 나머지 손가락으로 뒷면의 피부를 잡고 부드럽게 손에 눌러 마우스를 잡습니다.
무료 손으로, 부드럽게 다시 음경 주위에 피부를 밀어. 현존적 분리에서, preputial 피부는 뒤로 미끄러져, 글랜 음경을 노출. 검사 후, 사전 분리의 존재 또는 부재를 기록합니다.
이 후, 마우스의 무게와 무게를 기록합니다. 그런 다음 케이지 바닥에 비커를 잡고 마우스가 자체적으로 종료할 수 있도록 하여 하우징 케이지에 마우스를 다시 소개합니다. 작업 공간에 면공, 대형 비커, 멸균수 한 병을 배치합니다.
비커에 멸균물을 붓습니다. 그런 다음, 비커에 멸균물로 면공을 가습하고 깨끗한 케이지 탑 옆에 놓습니다. 작업 영역에 마우스 케이지를 배치합니다.
그런 다음 꼬리의 베이스로 마우스를 잡고 케이지 상단으로 옮김합니다. 마우스의 꼬리를 부드럽게 당겨 마우스로 전진하는 움직임을 장려합니다. 그 후, 세 손가락으로 엉덩이를 지지하면서 꼬리를 들어 올립니다.
가습된 면공으로 외음부를 부드럽게 청소한 다음 외음부를 검사하여 질이 완전히 열려 있는지 확인합니다. 질 개구부가 발생한 경우 기록합니다. 그런 다음 마우스의 무게를 측정하고 홈 케이지로 돌아갑니다.
각 번식 쌍의 쥐에 대해 뚜껑, 물, 음식, 침구 및 중첩 재료로 깨끗한 마우스 케이지를 준비하십시오. 그런 다음 필요한 정보와 함께 케이지 카드를 작성합니다. 준비된 침구 케이지를 깨끗한 테이블에 놓고 천천히 장갑을 낀 손을 마우스 케이지에 넣고 짧은 시간 동안 케이지에 둡니다.
장갑을 낀 손으로 마우스에 천천히 접근하십시오. 마우스가 손 위로 달릴 때 엄지와 검지 손가락 사이에 마우스 한 마우스의 꼬리를 잡은 다음 꼬리로 마우스를 들어 올립니다. 마우스는 최대 2~3초 동안 바디의 지지 없이 꼬리에 의해 보관될 수 있습니다.
준비된 사육 케이지에 마우스를 놓고, 수컷과 암컷 마우스에 음식, 물 및 중첩 물질이 있는지 확인 한 후 케이지를 닫습니다. 제시된 방법을 사용하여, 두 개의 상이한 형질전환 마우스 모형이 연구되었다. 질 개구부 및 예의 분리는 이종화 마우스와 대조마우스 모두에서 동일한 연령과 무게에서 발생하였다.
반대로, 질 개구부 및 preputial 분리는 조건부 녹아웃 여성과 남성에서 현저하게 지연되었고, 체중 증가와 관련이 있었다. 나이의 4.5 주에, 여성 컨트롤및 조건부 녹아웃 마우스는 비교 체중을 했다, 조건부 녹아웃 남성 컨트롤 보다 약간 무거운 동안. 이는 조건부 녹아웃 마우스의 질 개구부 및 전량적 분리의 지연이 체중 증가지연과 관련이 없다는 것을 나타낸다.
사춘기 발병이 끝난 후, 불임 연구는 10주에서 16주에 시작되었습니다. 남성과 여성 이테로지고테 마우스는 모두 비옥하였다. 이테로지고테 암컷은 3개월 간의 연구에서 더 적은 쓰레기를 발생시켰으며, 남성과 여성 이종조 마우스는 모두 더 작은 쓰레기를 생성했습니다.
불임 분석서를 설치하기 전에 사춘기 발병을 확인하는 것의 중요성을 설명하기 위해, 생식 능력은 조건부 녹아웃 마우스에서 평가되었다. 70일 간의 불임 연구에서 조건부 녹아웃 남성이나 암컷모두 쓰레기를 생성하지 않았습니다. 이 절차를 시도하는 동안, 주의마우스를 처리하고 접근하고 동물을 처리하는 동안 침착유지하는 것이 중요합니다.
이 절차에 따라, 순환 성 호르몬 수준을 측정 하는 같은 다른 방법은 추가 질문에 대답 하기 위해 수행 될 수 있습니다., 불 임 또는 다른 비 모 는 비정상적인 남성 호르몬에 의해 발생 했다 여부, 에스트로겐, 여 포 자극 호르몬, 그리고 황 호르몬 수준. 마우스와 함께 일하는 것은 알레르기의 물고 발달의 위험 때문에 유해할 수 있다는 것을 잊지 마십시오. 노출을 줄이기 위해 장갑과 실험실 코트를 착용하는 것과 같은 예방 조치와 마우스의 주의 깊게 다루어질 때 항상 이 절차를 수행해야합니다.
