שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום הרבייה, כגון כיצד לקבוע התפרצות גיל ההתבגרות בעכברים וחולדות באמצעות הפרדה טרום נרתיקית, פתיחת הנרתיק, והקמת estrus הראשון לפני ביצוע מחקר פוריות. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא כי על ידי הקמת תחילת גיל ההתבגרות באמצעות הגישה הלא פולשנית הפגינו, ניתן לעקוב ולבצע מחקר פוריות בבעלי חיים כי הם בוגרים מינית. ההשלכות של טכניקה זו להרחיב לקראת אבחון של ליקויים רבייה, הנגרמת על ידי מוטציות גנטיות או טיפולים רגישים לפגיעה ביכולת הרבייה, כגון כימיקלים משבשים האנדוקרינית.
למרות שיטה זו יכולה לספק תובנה על יכולת הרבייה בעכברים, זה יכול להיות מיושם גם על מערכות מודל אחרות, כגון חולדות אוגרים. הדגמה חזותית של שיטה זו היא קריטית, מכיוון שהיא דורשת כישורי טיפול טובים ועדינים בבעלי חיים. חשוב במיוחד להחזיק את העכברים כראוי לזיהוי החזותי הבא של הפרדה טרום-גולגולתית ופתיחת הנרתיק.
כדי להכין את אזור העבודה, מניחים משטח על השולחן. לאחר מכן מניחים חלק עליון של כלוב עכבר נקי כאשר הרשת פונה כלפי מעלה, על הפנקס. לאחר מכן, הגדר קנה מידה באזור העבודה.
מניחים מקור נקי 500 עד 1000 מיליליטר על הסולם ו tare אותו. לאחר מכן מקם גיליון לצד אזור העבודה כדי לתעד את הנתונים. לאחר מכן, מקם את כלוב העכברים באזור העבודה.
פתח את הכלוב והסר את המכסה, בקבוק המים ומחזיק המזון לשולחן. תוך החזקת העכבר בזנב, מניחים אותו על החלק העליון של כלוב העכבר הנקי. תוך שמירה על אחיזה של הזנב, לאפשר לעכבר לחקור את הרשת של החלק העליון של הכלוב.
מושכים בעדינות את הזנב לאחור ומתקרבים ליד השנייה אל העור הקרוב לצוואר ולאוזניים. אחוז בעור הרופף שבין הכתפיים והצוואר עם האגודל והאגודל. ואז לתפוס את העור על הגב עם האצבעות הנותרות ולהחזיק את העכבר על ידי בעדינות לחיצה עליו על היד.
עם היד החופשית, בעדינות לדחוף את העור סביב הפין בחזרה. בהפרדה פוטית, העור הפוטנציאלי מחליק לאחור, חושף את הפין העטרה. לאחר הבדיקה, יש לתעד את נוכחותה או היעדרה של הפרדה בין-מוניטין.
לאחר מכן, לשקול את העכבר ולתקליט את משקלו. לאחר מכן להחזיר את העכבר לכלוב הדיור על ידי החזקת המק מעל רצפת הכלוב ומאפשר לעכבר לצאת בכוחות עצמו. מניחים כדור צמר גפן, מקור גדול ובקבוק מים סטריליים באזור העבודה.
יוצקים מים סטריליים לתוך הבקבוק. לאחר מכן, לחות את כדור הכותנה עם המים הסטריליים בבקבוק, והמקם אותו ליד החלק העליון של הכלוב הנקי. מניחים את כלוב העכברים באזור העבודה.
ואז להעביר את העכבר לראש הכלוב על ידי החזקת אותו על ידי הבסיס של הזנב שלה. בעדינות למשוך על הזנב של העכבר כדי לעודד תנועה קדימה על ידי העכבר. לאחר מכן, הרם את הזנב תוך תמיכה בירכיים בשלוש אצבעות.
לנקות בעדינות את הפות עם כדור צמר גפן לח, ולאחר מכן לבחון את הפות כדי לקבוע אם הנרתיק פתוח לחלוטין. רשום אם התרחשה פתיחה וגינלית. ואז לשקול את העכבר ולהחזיר אותו לכלוב הבית.
הכינו כלוב עכברים נקי עם מכסה, מים, מזון, מצעים וחומר קינון לכל זוג עכברים רבייה. ואז למלא את כרטיסי הכלוב עם המידע הנדרש. מניחים את כלוב המצעים המוכן על שולחן נקי, ואז לאט לאט להציג יד כפפה לתוך כלוב העכבר ולהשאיר אותו בכלוב לתקופה קצרה של זמן.
לאט לאט מתקרבים לעכברים עם היד הכפפות. כאשר העכברים לדרוס את היד, לתפוס את הזנב של עכבר אחד בין האגודל והאצבע המורה, ולאחר מכן להרים את העכבר על ידי הזנב. העכבר יכול להיות מוחזק על ידי הזנב ללא תמיכה של הגוף עד שתיים עד שלוש שניות.
מניחים את העכבר בכלוב הרבייה המוכן, ואז סוגרים את הכלוב לאחר שהבטיחו שלעכברים הזכריים והנקבות יהיה מזון, מים וחומר קינון. בשיטה שהוצגה נחקרו שני מודלים שונים של עכברים מהו מהודרים. פתיחה וגינאלית והפרדה טרום-לידתית התרחשו באותו גיל ומשקל הן בעכברים ההטרוזיגים והן בעכברי הבקרה.
לעומת זאת, פתיחה וגינאלית והפרדה פרפוטית התעכבו באופן משמעותי בנוקאאוט מותנה נקבות וזכרים, וקושרו למשקל גוף מוגבר. בגיל 4.5 שבועות, לפקדים הנשיים ולעכברי הנוקאאוט המותנים היה משקל גוף דומה, בעוד שהזכרים המותנים היו מעט כבדים יותר מהפקדים. הדבר מצביע על כך שהעיכוב בפתיחת הנרתיק וההפרדה הקדמה של עכברי הנוקאאוט המותנים לא היו קשורים לעיכוב בעלייה במשקל.
לאחר סיום תחילת גיל ההתבגרות, מחקר הפוריות החל בגיל 10 עד 16 שבועות. עכברי הטרוזיגוט זכר ונקבה היו תת-פוריים. נקבות הטרוזיגוטה יצרו פחות פסולת במחקר בן שלושת החודשים, ועכברי הטרוזיגוט זכר ונקבה יצרו מלטה קטנה יותר.
כדי להמחיש את החשיבות של אישור התפרצות גיל ההתבגרות לפני הקמת בדיקת פוריות, יכולת הרבייה הוערכה בעכברי נוקאאוט מותנים. במהלך מחקר הפוריות בן 70 הימים, לא זכרי נוקאאוט מותנים ולא נקבות יצרו פסולת. בעת ניסיון הליך זה, חשוב לזכור לטפל בעכברים בזהירות ולהישאר רגועים תוך התקרבות וטיפול בבעלי החיים.
בעקבות הליך זה, שיטות אחרות כמו מדידת רמות הורמון המין במחזור יכול להתבצע כדי לענות על שאלות נוספות, כמו אם פוריות או תת פוריות אחרת נגרמה על ידי טסטוסטרון חריג, אסטרוגן, הורמון מגרה זקיק, ורמות הורמון מזערי. אל תשכח כי עבודה עם עכברים יכול להיות מסוכן בשל הסיכון של ננשך ופיתוח של אלרגיות. כדי להפחית את החשיפה, אמצעי זהירות כגון לבישת כפפות ומעיל מעבדה, וטיפול זהיר בעכברים, תמיד יש לנקוט בעת ביצוע הליך זה.
