我们的数据表明,藻原减少抓伤行为,但辣椒素对抓伤行为的影响仍不清楚。因此,同时测量每一定量的疼痛是重要的。传统方法仅为发痒或疼痛的感觉提供信息,但脸颊注射模型分别同时提供发痒和疼痛的信息。
脸颊注射可能很难在第一,因为它需要练习区分抓伤,擦拭和梳理行为。注射和行为分析的视频演示有助于掌握技术。对于面颊注射实验,在评估前一天,用剪发器剃每只鼠标脸颊上的毛皮,并在温度、湿度和声音控制的环境中将以每秒 30 到 60 帧速率的摄像机安装到三脚架上。
将四个笼子放在相机的下面,以指示的方向放置,并在每个笼子之间放置屏幕,以防止老鼠看到对方。剃须后一天,将一只鼠标放入每个录音笼中一小时,使动物适应记录条件。如果要使用局部治疗,请此时应用。
当动物们适应时,将感兴趣的测试物质装入一个0.5毫升的注射器中,每只鼠标装有29或30针。在适应期结束时,在注射前开始录像。然后将测试物质的10微升溶液在觉醒动物的剃光脸颊中。
然后将注射的小鼠返回到各自的笼子,然后继续录像30分钟。在实验结束时,将视频加载到合适的视频编辑软件程序中。每次鼠标向脸颊抬起后腿,在一次或几秒钟内划伤数次,然后将腿作为一个划痕回合放下。
老鼠使用单前腿进行擦拭,两个前腿用于梳理,但只有擦拭行为算作与疼痛相关的行为。对于颈部注射实验,在实验前一天,用剪发器剃每个老鼠脖子上的皮毛。剃须一天后,在记录笼中适应小鼠一小时,然后将10微升的感兴趣的测试物质在清醒条件下,在剃光的颈部中。
将注射的动物返回到记录笼中,并记录小鼠行为30分钟。然后计算颈部的抓伤回合和任何面部擦拭行为,正如刚刚展示的。在颈部注射模型中,组胺诱发强烈的抓伤行为,而车辆诱发轻度抓伤。
在脸颊注射模型中,辣椒素不诱发刮伤行为,但诱发擦伤行为,被认为与疼痛有关。注射到脸颊后,组胺主要诱发刮伤行为,有微弱的擦拭行为。抗组胺试剂的应用可抑制抓痒,表明组胺引起的抓痒行为是由组胺对组胺受体的反应引起的。
在这个实验中,使用痒调解器诱发刮伤,但不是擦拭行为,表明经测试的调剂起到普鲁里托根的作用,但在小鼠中不具有藻原,类似于它在人类身上的影响。这种方法允许疼痛和疼痛的感觉很容易和清楚地区分与一个程序。详细的行为分析可以通过专注于痒或疼痛的感觉来完成。
痒和疼痛行为有不同的反应。此外,这些技术并不难。脸颊注射和观察程序可以让我们的各种训练同行掌握。
我们很欣赏耶鲁大学拉莫特教授介绍的面颊注射模型。