نموذج مورين من مرض التهاب الدماغ الفيروسي الحاد الناجم عن فيروس حمى الضنك

هذا البروتوكول لنموذج المرض ترى عدوى فيروس حمى الضنك في الدماغ تصبح منصة في الجسم الحي لفحص النواقل الفيروسية والمضيفة المرتبطة بنشوء الأمراض العصبية. على عكس النماذج السابقة، تستخدم نماذجنا أدوات العدوى مع تتر فيروسي منخفض، لإصابة معهد القوى المناعية لأبحاث السرطان الفئران التي تمتص الفئران لاستقراء الإنجاب الشبيه بالتهاب الدماغ. إثبات الإجراء سيكون (تينغ جينغ شين) مرشحة لنيل الدكتوراه من مختبري

قبل البدء في إجراء العدوى، تمييع فيروس حمى الضنك غير المكيفة اثنين من الأسهم، إلى واحد مرات 10 لتشكيل البلاك الخامس وحدات كل 40 ميكرولترات من تركيز 1640 1640 1640 متوسطة. بعد ذلك، قم بتحميل حقنة واحدة 0.3 ملليلتر مجهزة بإبرة قياس 30 مع 10 ميكرولترات من الفيروس المخفف. ومحاقن واحدة 0.3 ملليلتر مجهزة بإبرة قياس 30، مع 30 ميكرولترات من الفيروس لكل.

للتسليم بين فصلي للفيروس، اضغط على أوراكل بين الإبهام وإصبع السبابة لكبح بلطف معهد الرضاعة من العمر سبعة أيام من الماوس معهد أبحاث السرطان في موقف عرضة وحقن حجم 10 ميكرولتر من الفيروس المخفف في منطقة لامدا، عند تقاطع خياطة القوس وحامد. بعد الحقن بين النخاع، واستخدام الإبهام وإصبع السبابة لعقد الماوس في موقف سوبين، وبلطف intraperitoneally، وحقن 30 ميكرولتر حجم الفيروس المخفف، في البطن مورين. لتسجيل تطور المرض ، قم بتعيين درجة من صفر إلى خمسة لكل فأر مطعوم يوميًا ، وفقًا لدرجات الأمراض الشبيهة بالتهاب الدماغ الفيروسي الحاد ، وارسم الدرجات لكل يوم كشخصية تعتمد على المنحنى ، باستخدام متوسط زائد وناقص الانحراف المعياري لعشرات الاختبار اليومية في كل مجموعة.

بالمقارنة مع التغيرات وزن الجسم تقاس في وهمية، المتوسطة فقط الفئران المحقح، والحيوانات التي تلقيح فيروس حمى الضنك تظهر انخفاضا في وزن الجسم في كل نقطة زمنية خلال التجربة. بالإضافة إلى ذلك، تظهر الحيوانات المصابة بفيروس حمى الضنك زيادة كبيرة في مواقف الظهر الحدس، والنوبات الحوفية، والضعف الحوفي، والشلل، والوفاة مقارنة بالأعراض التي تظهرها الحيوانات الملقح وهمية. في الواقع ، تظهر الفئران المصابة بحمى الضنك انخفاضًا في معدلات البقاء على قيد الحياة لا يتم ملاحظته في الحيوانات الملقدة ، مما يؤكد إنشاء نموذج معدي لفيروس حمى الضنك داخل الجهاز العصبي المركزي يوضح تطور الأمراض الحادة الشبيهة بالتهاب الدماغ الفيروسي في الفئران.

ثقب الموقع الخطأ قد يؤدي إلى انسداد إبرة من قبل النتيجة وتجاوز حل الفيروس خارج الرأس، مما أدى إلى فشل الحقن وفشل العدوى. بعد الإجراء ، يمكن حصاد عينات الدماغ للضرر المرضي ، وتسلل الخلايا المناعية ، وتحليل النسخ الفيروسي من قبل الهماووكسيلين وosin التي تلطيخ قياس تدفق الخلايا ، وقياس تشكيل البلاك ، على التوالي. ويوفر نموذجنا لليورين المناعي منصة لاستكشاف الآليات المسببة للأمراض للعدوى بفيروس حمى الضنك، لتطوير لقاحات فيروس حمى الضنك، أو الأدوية المضادة لفيروس حمى الضنك.

فيروس حمى الضنك هو عامل أمراض من مستوى السلامة البيولوجية 2، وعلى هذا النحو، ينبغي أن تكتمل جميع التجارب مع هذا الفيروس في مختبر مؤهل للسلامة البيولوجية الحيوانية المستوى الثاني.