体外 人体牙浆干细胞向胰腺血统的诱导

这段视频展示了人类牙髓干细胞向胰腺谱系的体外诱导。干细胞在许多疾病中提供替代疗法，包括导致β细胞生物拉伤的I型糖尿病。胰岛素生成细胞的移植将是导致终生的新方法。

在本视频中介绍了产生胰岛素生成细胞的两种方法，包括集成和非综合感应协议。在这部分，解释了从人类牙髓干细胞中诱导胰岛素产生细胞的整合协议。因为诱导协议是混合自然胰腺发育过程。

获得天然和功能胰岛素产生细胞。用于从牙髓干细胞等中性干细胞生成胰岛素生成细胞，采用多步骤诱导协议。间质干细胞分别用于"确定内皮"、胰腺内分泌、胰腺内分泌，然后分别用于胰腺β细胞或胰岛素生成细胞。

为了诱导细胞，使用三步感应方法作为骨干协议。综合方案采用了人类牙髓干细胞对基本胰腺转录因子PDX-1的过期。然后，PDX-1超过表达的干细胞将进一步诱导使用三步分化协议。

胰腺分化潜力，由综合协议，将比较非综合协议，如动画中所示。这个想法是根据朱拉隆功大学牙科学院人类研究伦理委员会批准的协议，征得患者知情同意的。此协议以 PDX-1 过期开始。

2至5个部分的人体牙浆干细胞，70-80%的汇合，用于转导。细胞被尝试化和计数。然后，100万个细胞被安置在转染容器上，并在一夜之间孵育。

24小时后，根据所需的感染倍数，将携带PDX-1基因的新鲜制备的杀毒软件添加到培养容器中。然后，转染的细胞在孵化器中保存24小时。然后，新鲜培养介质被改变并再维持48个时期。

在使用进一步诱导步骤之前，先检查转染细胞的形态。人类牙髓干细胞与PDX-1过期后，然后尝试和悬浮在第一个胰腺感应介质，所以所谓的介质 A.In 这一步，低附件培养容器被使用。PDX-1的形态在观察到中等A诱导后的第3天超过表达的人类牙髓干细胞。

然后，具有良好形态的细胞将被用于进一步诱导步骤。下一步，第二感应介质，所谓的介质B被添加到培养容器中。PDX-1在观察到中等诱导后的第二天超过表达的人类牙髓干细胞的形态。

然后，具有良好形态的细胞将被用于进一步诱导步骤。下一步，第三个感应介质，所谓的介质C被添加到培养容器中。5天后观察到细胞形态。

收集细胞群落以作进一步分析。包括菌落形态和大小、胰腺基因标记表达和有关葡萄糖刺激的C-肽分泌物或GSCS检测的功能特性。对于非综合感应方法，采用了前面提到的三步感应协议。

一百万个细胞在中A中重新悬浮，并坐在低附件培养容器上。然后培养了三天。在形态检查后，分别在第三天和第五天将包括中B和C在内的一系列感应介质添加到培养容器中。

在第10天，观察细胞形态。收集细胞群落以作进一步分析，包括菌落形态和大小、胰腺基因标记表达以及有关葡萄糖刺激的C-肽分泌物或GSCS检测的功能特性。两个上岗协议的结果在两个协议中进行比较。

人类牙浆干细胞能够形成殖民地般的结构，因为第一天的诱导。殖民地的外观是圆和密集的。在整个上岗期间，所有的殖民地都漂浮在文化容器中。

综合诱导协议的总菌落计数比非综合诱导的菌落总数高一点。殖民地大小百分比下的进化显示出一种有益的趋势，从小到中小的殖民地形成后综合诱导，这对于减少殖民地内的坏死核心具有重要意义。胰腺基因标记分析表明，综合电感协议使菌落的胰腺标记（包括 MAP-A、GLUT-2、胰岛素和 GLP-1R）过期率较高，表明与测量胰岛素生成细胞的分化。

对功能葡萄糖C肽分泌很重要。结果表明，这两种诱导协议都使菌落对葡萄糖挑战有良好的反应。通过这项研究，两种胰腺诱导方案都能够在胰腺标记期满和功能特性方面在体外生成胰岛素生成细胞，这些协议显示了胰岛素产生细胞形成的更好质量。

建议人类间质干细胞的趋势，如人类牙髓干细胞在干细胞为基础的糖尿病治疗中应用在不远的将来。