TNBS诱导的啮齿动物模型研究机械应力在克罗恩病中的致病作用

因此，在我们的方案中，TNBS的结肠内滴注导致滴注部位的透壁炎症和炎症近端节段的机械扩张。所以这模仿了狭窄的克罗恩病。由于近端节段在机械上膨胀但不显示可见的炎症，因此对近端节段和炎症部位的比较研究有助于确定机械应力是否在克罗恩结肠炎中起作用。

以前的研究仅关注炎症部位。我们在模型中不同部位的工作方案强调了机械应力在克罗恩病中的关键作用，特别是在狭窄性克罗恩病中。首先，将大鼠以仰卧姿势放在麻醉台上。

要诱发结肠炎，将医用级开口端聚氨酯导管插入肛门边缘约 7 至 8 厘米，然后轻轻地将 TNBS 滴入结肠。用250微升盐水施用假对照大鼠。为了帮助TNBS或盐水的分布并避免溢出，使大鼠保持仰卧姿势，头部朝下，角度约为30度，肛门闭合两分钟。

使用手术级剪刀和镊子打开大鼠腹部。小心地取出肛管上方的整个结肠，并立即将结肠转移到冰冷的1x HBSS缓冲液中。拉直缓冲液中的冒号，并使用标尺测量结肠长度。

取一根尼龙线，并在结肠周围盘旋，以测量对照和TNBS处理大鼠中结肠节段的外周长。取全层组织进行组织学检查。沿着肠系膜板切开结肠，并用HBSS缓冲液彻底清洁结肠。

根据预定义的标准评估结肠的宏观炎症评分，只需进行最少的修改。在P，I和P位点P之前两到三厘米处收集TNBS处理的大鼠的结肠组织样本，D.Site P是炎症部位口腔边缘前两到三厘米的部分。I位点是TNBS被灌注的炎症部位，通常距离结肠末端四到六厘米。

最后，D位点是炎症部位的腹缘远端一至两厘米的部分。在大鼠中结肠内滴注TNBS诱导局部透壁炎症，长度约为两厘米，肠壁增厚，远端结肠滴注部位管腔变窄。TNBS滴注部位称为 I.As 位点是透壁炎症和狭窄的结果，I部位存在炎症和机械应力.I位点的狭窄导致TNBS滴注部位近端的段内有明显的管腔膨胀，称为P位点，与假控结肠相比，P和I部位的结肠周长显着增加。

当机械扩张时，P位点没有显示可见的炎症。相反，称为D位点的TNBS滴注远端的结肠节段既没有炎症也没有机械性扩张。与结肠炎大鼠P和D位点的假对照相比，TNBS处理大鼠I部位炎症的宏观评分显着增加。

与假体相比，P和D位点的炎症评分没有显着增加。因此，重要的是不仅要研究模型中的位点I，还要研究位点P和D，因为这有助于识别克罗恩病中机械应力的致病意义。为了进一步确定机械应力是否是肠道炎症的致病因素，人们也可以尝试通过仅用流质饮食喂养动物来释放机械扩张，看看这是否有助于炎症和肠道功能。