热带非洲爪蟾成人心脏的根尖切除模型

心脏损伤模型对阐明心脏再生机制具有重要意义。该方案建立了成人热带X.Tropicalis的心尖切除模型，可用于阐明成人心脏再生的机制。以前的研究表明，成人热带X.Tropicalis的心尖切除后心脏可以再生。

尖端切除方案已在斑马鱼和小鼠模型中发表，但尚未公布热带弧线根尖切除方案。成年哺乳动物失去再生能力使心力衰竭成为全球死亡的主要原因之一。使用这种技术说明心脏再生的机制将对缺血性心脏病的治疗具有重要意义。

最好在进行手术之前充分练习该技术，因为它不会影响手术过程时间。保持青蛙麻醉非常重要。首先，将麻醉的热带爪蟾腹部向上放置，并用蒸馏水浸泡的纱布覆盖腹部，以避免在手术过程中动物的皮肤干燥。

用镊子轻轻按压胸部，找到与下前肢平行的胸部中心。用眼科剪刀提起皮肤，轻轻做一个约1厘米的小切口。使用眼科剪刀，捡起皮肤下的肌肉层，并在胸部中央肌肉上形成伤口。

由于心脏位于伤口部位的上部位置，用眼科镊子轻轻按压胸部，将心脏从伤口中挤出。轻轻地，用镊子夹住心包，并使用心脏顶点用眼科剪刀轻轻地折断它。等待心包因收缩期泵血而脱落。

用非惯用手用镊子握住心脏尖端，根据心肌收缩节律稍微抬起心脏。当心脏收缩通过血管再循环血液时，迅速切断心脏的顶点，约占心室的14%。使用镊子和吸收球将心脏放回胸部。

用4-0非吸收性手术线缝合皮肤，确保不缝合到肌肉层，以防止术后死亡。在假手术组中，如前所述，进行开胸术并打开心包，但不进行心尖切除术。将术后动物腹部朝上置于含有少量去离子水的培养皿中。

等待大约 10 分钟让动物恢复意识，并在活动期间观察其活动能力和伤口缝合线。将青蛙转移到装满纯净水的容器中进行栽培，并每天用纯净水代替，以避免伤口感染。热带爪蟾心脏根尖切除后，形成血凝块并密封心室中的伤口，如苏木精和伊红染色以及马森三色染色所观察到的那样。

切除后0、7、14和30天心脏形态学分析显示，心脏损伤引起的血凝块在第30天消失。同时，在第14天，可以看到心尖的显着再生，到第30天，切除的心脏心尖几乎完全再生。组织学分析显示，第14天切除部位出现纤维蛋白肿块，到第30天心脏完全再生，无瘢痕。

通过Masson染色对心脏进行的心肌纤维化分析表明，在根尖切除的第14天内，凝块消失并被纤维蛋白取代。从第14天到第30天，心肌逐渐替换纤维蛋白并修复受损的心室尖。该技术将使研究人员能够探索热带爪蟾心脏再生的细胞机制，并使用根尖切除后的谱系追踪分析了解与青蛙心脏再生相关的细胞。