למודל של פגיעה לבבית יש השלכות משמעותיות על הבהרת מנגנון התחדשות הלב. פרוטוקול זה ביסס מודל כריתה אפיקלי ב- X.Tropicalis בוגרים, שניתן להשתמש בו כדי להבהיר את מנגנון התחדשות הלב הבוגר. מחקרים קודמים הצהירו כי הלב יכול להתחדש לאחר כריתה אפית אצל X.Tropicalis בוגר.
ופרוטוקולים של כריתת קודקוד פורסמו במודלים של דגי זברה ועכברים, אך לא פורסם פרוטוקול לכריתה אפית ב- X.tropicalis. אובדן יכולת ההתחדשות אצל יונקים בוגרים הופך את אי ספיקת הלב לאחד הגורמים המובילים למוות ברחבי העולם. להמחשת מנגנוני התחדשות הלב באמצעות טכניקה זו יהיו השלכות משמעותיות על טיפולים במחלות לב איסכמיות.
עדיף לתרגל את הטכניקה היטב לפני ביצוע הניתוח, שכן זה לא אמור להשפיע על זמן תהליך הניתוח. וחשוב מאוד להרדים את הצפרדע. כדי להתחיל, הניחו את הבטן של Xenopus tropicalis המורדם כלפי מעלה, וכסו את הבטן בגזה מזוקקת ספוגה במים כדי למנוע התייבשות של עור החיה במהלך הניתוח.
לחץ בעדינות על החזה עם מלקחיים ומצא את מרכז החזה במקביל לגפה הקדמית התחתונה. להרים את העור עם מספריים אופתלמיים, ובעדינות לעשות חתך קטן של כ 1 ס"מ. בעזרת מספריים אופתלמיים מרימים את שכבת השריר מתחת לעור ויוצרים פצע בשריר החזה המרכזי.
כמו הלב ממוקם במיקום העליון של אתר הפצע, בעדינות לחץ על החזה עם מלקחיים אופתלמיים כדי לסחוט את הלב מתוך הפצע. בעדינות, מהדק את קרום הלב עם מלקחיים לשבור אותו ברכות באמצעות מספריים אופתלמיים באמצעות קודקוד הלב. המתן עד שקרום הלב ירד עקב שאיבת דם סיסטולית.
החזיקו את קצה הלב עם מלקחיים ביד הלא דומיננטית, והרימו מעט את הלב בהתאם לקצב התכווצות הלב. כאשר הלב מתכווץ כדי להזרים דם דרך כלי הדם, לחתוך במהירות את החלק העליון של הלב, כ 14% של החדר. החזירו את הלב לחזה בעזרת מלקחיים וכדור סופג.
תפרו את העור בחוט כירורגי 4-0 שאינו סופג, וודאו שאין תפר לשכבת השריר כדי למנוע תמותה לאחר הניתוח. בקבוצת הדמה, לבצע את בית החזה ולפתוח את קרום הלב, כפי שהודגם קודם לכן, אבל תפר ללא ביצוע כריתת קודקוד. הניחו את בעל החיים לאחר הניתוח כשבטנו פונה כלפי מעלה בצלוחית פטרי המכילה כמות קטנה של מים שעברו דה-יוניזציה.
המתינו כ-10 דקות עד שבעל החיים יחזור להכרתו, והתבוננו בתנועתיותו ובתפר הפצע שלו במהלך הפעילות. מעבירים את הצפרדעים למיכל מלא במים טהורים לטיפוח ומחליפים אותו במים טהורים מדי יום כדי למנוע זיהום פצע. לאחר כריתה אפית של לב Xenopus tropicalis, קריש דם נוצר ואטם את הפצע בחדר, כפי שנצפה על ידי המטוקסילין ו eosin כתמים, כמו גם דרך צביעת trichrome של Masson.
ניתוח מורפולוגי של הלב לאחר 0, 7, 14 ו -30 ימים לאחר הכריתה גילה כי קריש הדם שנגרם על ידי הפגיעה בלב נעלם ביום 30. יחד עם זאת, ביום ה-14 נראתה התחדשות משמעותית של הקודקוד, וביום ה-30 קודקוד הלב המנותח התחדש כמעט לחלוטין. ניתוח היסטולוגי הראה מסת פיברין באתר הכריתה ביום ה-14, והלב התחדש לחלוטין ללא צלקות ביום ה-30.
ניתוח פיברוזיס שריר הלב של הלב על ידי צביעתו של מאסון הראה כי בתוך היום ה -14 לכריתה אפית, הקריש נעלם והוחלף בפיברין. מהיום ה-14 עד ה-30, שריר הלב החליף בהדרגה את הפיברין ותיקן את קודקוד החדר הפגוע. טכניקה זו תאפשר לחוקרים לחקור את המנגנון התאי של התחדשות הלב ב- Xenopus tropicalis ולדעת את התאים הקשורים להתחדשות הלב בלב צפרדעים באמצעות ניתוח מעקב אחר שושלת לאחר כריתת קודקוד.
