在该方案中,使用颊粘膜移植物的尿道重建首次在局部病理生理环境中开发,这对于模拟疾病至关重要。该技术使我们能够开发创新疗法,并以转化方式研究其分子机制和临床优势。首先,将保护性眼凝胶涂在麻醉大鼠的双眼上。
将动物置于热垫上的背侧褥疮位置,并将解剖显微镜放置在大鼠上方进行外科手术。缩回阴茎包皮后,在阴茎腺体背侧放置浅表七零缝合线。将针架留在原位以保持阴茎缩回。
将一根 22 号静脉导管放入尿道,使用润滑凝胶进行导尿。用手术刀刀片在皮肤上做一个一厘米长的腹侧切口。用镊子和弹簧剪刀解剖组织层,直到尿道暴露于中轴水平。
用电烙装置在尿道的一侧和阴茎中轴的腹侧施加电流。用六零可吸收缝合线闭合切口。取出导尿管和牵引缝合线。
将大鼠置于腹侧褥疮位置,并皮下注射抗镇静溶液。用聚维酮碘清洁麻醉大鼠的下唇、颊粘膜、阴茎和腹部皮肤。在下唇的两侧和中间放置三条七零缝合线。
在每个里面放一只蚊子,使嘴唇缩回,露出内部粘膜。使用弹簧剪刀和尖镊子,从下唇的颊内粘膜中采集四毫米的移植物。将移植物放入装有无菌 0.9% 盐水的小受体中。
用海绵压缩供体区域。取下先前放置的下唇缝合线,露出阴茎。将一根 22 号静脉导管放入尿道,使用润滑凝胶进行烧灼。
使用弹簧剪刀,做一个环形的冠状下切口,并将阴茎脱到根部。解剖剩余层以暴露尿道。在冠状沟远端约3毫米处做一个4毫米的纵向腹侧切口,在狭窄处刮出尿道。
在刮刀的每一侧放置两条七零保持缝合线。在每个里面留下一只蚊子以缩回尿道。在刮刀的两端放置两条不可吸收的七哦缝合线。
将颊粘膜移植物以腹侧高嵌方式放置,粘膜侧朝向尿道腔。将其中一条缝合线穿过移植物,并用运行缝合线进行半椭圆。拔下导尿管并重新定位皮肤。
用六零可吸收间断缝合线闭合环形冠下切口。取下牵引缝合线,然后如前所述施用抗镇静溶液。狭窄诱导大鼠输尿管直径为0.92 mm,移植尿道成形术两周后改善至1.59 mm。
与尿道成形术前动物相比,尿道成形术后的平均血流量显着减少。电流过大会导致尿道闭合的风险。移植物必须使粘膜朝向尿道腔,并采用水密缝合线,以避免瘘管。
可以进行任何类型的移植物尿道成形术,可以评估不同类型的移植物。这种实验模型使我们能够优化移植物的使用并探索新的治疗策略,例如对转化研究产生影响的组织工程材料,以满足临床需求。