Neste protocolo, a reconstrução uretral com enxerto de mucosa bucal é desenvolvida pela primeira vez em ambiente fisiopatológico local, o que é crucial para mimetizar a doença. Esta técnica nos permite desenvolver terapias inovadoras e estudar seus mecanismos moleculares e vantagens clínicas de forma translacional. Para começar, aplique gel protetor ocular em ambos os olhos do rato anestesiado.
Colocar o animal em decúbito dorsal sobre uma bolsa térmica e posicionar um microscópio de dissecção sobre o rato para o procedimento cirúrgico. Depois de retrair o prepúcio do pênis, coloque dorsalmente uma sutura superficial de sete zero nas glândulas penianas. Deixe um porta-agulhas no lugar para manter o pênis retraído.
Coloque um cateter venoso de calibre 22 na uretra para cateterismo com gel lubrificante. Faça uma incisão ventral de um centímetro de comprimento na pele peniana com uma lâmina de bisturi cirúrgica. Disseque as camadas de tecido peniano com pinça e tesoura de mola até que a uretra seja exposta ao nível médio da diáfise.
Aplicar corrente com um dispositivo de eletrocautério em um lado lateral da uretra e ventralmente no eixo médio do pênis. Fechar a incisão com uma sutura contínua absorvível de seis graus. Remova o cateter uretral e a sutura de tração peniana.
Colocar o rato em decúbito ventral e administrar uma injeção subcutânea da solução anti-sedativa. Limpe o lábio inferior, a mucosa bucal, o pênis e a pele abdominal de um rato anestesiado com iodopovidona. Coloque três pontos sete zero em ambos os lados e no meio do lábio inferior.
Coloque um mosquito em cada um para retrair o lábio e expor a mucosa interna. Com tesoura de mola e pinça pontiaguda, retirar um enxerto de quatro milímetros da mucosa bucal interna do lábio inferior. Coloque o enxerto em um recipiente pequeno com soro fisiológico 0,9% estéril.
Comprimir a área doadora com uma esponja. Remova as suturas de permanência do lábio inferior previamente colocadas e exponha o pênis. Coloque um cateter venoso de calibre 22 na uretra para cauterização usando um gel lubrificante.
Usando tesoura de mola, faça uma incisão subcoronal circunferencial e desenluve o pênis até a base. Dissecar as camadas restantes para expor a uretra. Fazer uma incisão ventral longitudinal de quatro milímetros cerca de três milímetros distal ao sulco coronal, espatulando a uretra ao nível da estenose.
Coloque duas suturas de sete e zero de permanência em cada lado da espatulação. Deixe um mosquito em cada um para retrair a uretra. Coloque duas suturas inabsorvíveis de sete oh em cada extremidade da espatulação.
Colocar o enxerto de mucosa bucal de forma onlay ventral com o lado da mucosa voltado para a luz uretral. Passe uma das suturas através do enxerto e realize uma meia elipse com uma sutura contínua. Remova o cateter uretral e reposicione a pele peniana.
Fechar a incisão subcoronal circunferencial com uma sutura absorvível interrompida de seis zeros. Remova a sutura de tração peniana e, em seguida, administre a solução anti-sedativa conforme demonstrado anteriormente. O rato submetido à estenose apresentou diâmetro do ureter de 0,92 milímetros, que melhorou para 1,59 milímetros duas semanas após a uretroplastia do enxerto.
O fluxo sanguíneo médio foi significativamente reduzido após a uretroplastia em comparação com os animais pré-uretroplastia. Muita corrente pode levar a um risco de fechamento uretral. O enxerto deve ser colocado com a mucosa voltada para a luz uretral com uma sutura estanque para evitar fístulas.
Qualquer tipo de uretroplastia com enxertos pode ser realizada, diferentes tipos de enxertos podem ser avaliados. Este modelo experimental nos permite otimizar o uso de enxertos e explorar novas estratégias terapêuticas, tais como materiais de engenharia de tecidos com impacto na pesquisa translacional para atender às necessidades clínicas.
