Dans ce protocole, la reconstruction urétrale à l’aide d’une greffe de muqueuse buccale est développée pour la première fois dans un environnement physiopathologique local, ce qui est crucial pour imiter la maladie. Cette technique nous permet de développer des thérapies innovantes et d’étudier leurs mécanismes moléculaires et leurs avantages cliniques de manière translationnelle. Pour commencer, appliquez un gel protecteur pour les yeux sur les deux yeux du rat anesthésié.
Placez l’animal en position de décubitus dorsal sur un coussin chauffant et placez un microscope de dissection sur le rat pour l’intervention chirurgicale. Après avoir rétracté le prépuce du pénis, placez dorsalement une suture superficielle à sept zéros sur les glandes péniennes. Laissez un porte-aiguille en place pour maintenir le pénis rétracté.
Placez un cathéter veineux de calibre 22 dans l’urètre pour le cathétérisme à l’aide d’un gel lubrifiant. Faites une incision ventrale d’un centimètre de long dans la peau du pénis avec une lame de scalpel chirurgical. Disséquez les couches de tissu pénien avec des pinces et des ciseaux à ressort jusqu’à ce que l’urètre soit exposé au niveau de la tige médiane.
Appliquez du courant à l’aide d’un dispositif d’électrocautérisation sur un côté latéral de l’urètre et ventralement au milieu de la tige du pénis. Fermez l’incision avec une suture de course résorbable six-zéro. Retirez le cathéter urétral et la suture de traction pénienne.
Placez le rat en position de décubitus ventral et administrez une injection sous-cutanée de la solution antisédative. Nettoyez la lèvre inférieure, la muqueuse buccale, le pénis et la peau abdominale d’un rat anesthésié avec de la povidone iodée. Placez trois sutures sept-zéro des deux côtés et au milieu de la lèvre inférieure.
Placez un moustique dans chacun d’eux pour rétracter la lèvre et exposer la muqueuse interne. À l’aide de ciseaux à ressort et de pinces pointues, prélevez un greffon de quatre millimètres de la muqueuse buccale interne de la lèvre inférieure. Placez le greffon dans un petit récipient avec une solution saline stérile à 0,9 %.
Comprimez la zone donneuse avec une éponge. Retirez les sutures de la lèvre inférieure précédemment placées et exposez le pénis. Placez un cathéter veineux de calibre 22 dans l’urètre pour la cautérisation à l’aide d’un gel lubrifiant.
À l’aide de ciseaux à ressort, faites une incision sous-coronaire circonférentielle et dégantez le pénis jusqu’à la base. Disséquez les couches restantes pour exposer l’urètre. Faites une incision ventrale longitudinale de quatre millimètres à environ trois millimètres distale du sillon coronaire, en spatulant l’urètre au niveau de la sténose.
Placez deux sutures à sept zéros de chaque côté de la spatule. Laissez un moustique dans chacun d’eux pour rétracter l’urètre. Placez deux sutures sept oh non résorbables à chaque extrémité de la spatulation.
Placez la greffe de muqueuse buccale en mode d’incrustation ventrale avec le côté muqueuse face à la lumière urétrale. Passez l’une des sutures à travers le greffon et effectuez une demi-ellipse avec une suture courante. Retirez le cathéter urétral et repositionnez la peau du pénis.
Fermez l’incision sous-coronaire circonférentielle avec une suture interrompue résorbable à six zéros. Retirez la suture de traction pénienne, puis administrez la solution antisédative comme démontré précédemment. Le rat soumis à l’induction de la sténose a montré un diamètre d’uretère de 0,92 millimètre, qui s’est amélioré à 1,59 millimètre deux semaines après l’urétroplastie du greffon.
Le débit sanguin moyen a été significativement réduit après l’urétroplastie par rapport aux animaux pré-urétroplastie. Trop de courant peut entraîner un risque de fermeture urétrale. Le greffon doit être placé avec la muqueuse face à la lumière urétrale avec une suture coulante étanche pour éviter les fistules.
Tout type d’urétroplastie avec greffes peut être effectué, différents types de greffes peuvent être évalués. Ce modèle expérimental nous permet d’optimiser l’utilisation des greffons et d’explorer de nouvelles stratégies thérapeutiques, telles que les matériaux issus de l’ingénierie tissulaire, avec un impact sur la recherche translationnelle pour répondre aux besoins cliniques.
