En este protocolo, la reconstrucción uretral mediante un injerto de mucosa bucal se desarrolla por primera vez en un entorno fisiopatológico local, que es crucial para imitar la enfermedad. Esta técnica nos permite desarrollar terapias innovadoras y estudiar sus mecanismos moleculares y ventajas clínicas de forma traslacional. Para comenzar, aplique gel protector para los ojos en ambos ojos de la rata anestesiada.
Coloque al animal en la posición de decúbito dorsal sobre una almohadilla térmica y coloque un microscopio de disección sobre la rata para el procedimiento quirúrgico. Después de retraer el prepucio del pene, coloque dorsalmente una sutura superficial de siete ceros en las glándulas del pene. Deje un soporte para agujas en su lugar para mantener el pene retraído.
Coloque un catéter venoso de calibre 22 en la uretra para su cateterismo con gel lubricante. Realice una incisión ventral de un centímetro de largo en la piel del pene con una hoja de bisturí quirúrgico. Diseccione las capas de tejido del pene con pinzas y tijeras de resorte hasta que la uretra quede expuesta al nivel medio del cuerpo.
Aplique corriente con un dispositivo de electrocauterización en un lado lateral de la uretra y ventralmente en la mitad del cuerpo del pene. Cierre la incisión con una sutura absorbible de seis ceros. Retire el catéter uretral y la sutura de tracción del pene.
Coloque a la rata en decúbito ventral y administre una inyección subcutánea de la solución antisedante. Limpie el labio inferior, la mucosa bucal, el pene y la piel abdominal de una rata anestesiada con povidona yodada. Coloque tres suturas de siete ceros en ambos lados y en el centro del labio inferior.
Coloca un mosquito en cada uno para retraer el labio y exponer la mucosa interna. Con unas tijeras de resorte y unas pinzas puntiagudas, extraiga un injerto de cuatro milímetros de la mucosa bucal interna del labio inferior. Coloque el injerto en un recipiente pequeño con solución salina estéril al 0,9%.
Comprima el área donante con una esponja. Retire las suturas de soporte previamente colocadas del labio inferior y exponga el pene. Coloque un catéter venoso de calibre 22 en la uretra para cauterizarlo con un gel lubricante.
Con unas tijeras de resorte, haga una incisión subcoronal circunferencial y desguante el pene hasta la base. Disecciona las capas restantes para exponer la uretra. Realizar una incisión ventral longitudinal de cuatro milímetros a unos tres milímetros distal al surco coronal, espatulando la uretra a la altura de la estenosis.
Coloque dos suturas de siete tirantes a cada lado de la espatulación. Deja un mosquito en cada uno para retraer la uretra. Coloque dos suturas no absorbibles de siete ohs en cada extremo de la espatulación.
Coloque el injerto de mucosa bucal en forma de incrustación ventral con el lado de la mucosa mirando hacia la luz uretral. Pasar una de las suturas a través del injerto y realizar una media elipse con una sutura corrida. Retire el catéter uretral y vuelva a colocar la piel del pene.
Cierre la incisión subcoronal circunferencial con una sutura interrumpida absorbible de seis ceros. Retire la sutura de tracción del pene y, a continuación, administre la solución antisedante como se ha demostrado anteriormente. La rata sometida a inducción de estenosis mostró un diámetro de uréter de 0,92 milímetros, que mejoró a 1,59 milímetros dos semanas después de la uretroplastia del injerto.
El flujo sanguíneo medio se redujo significativamente después de la uretroplastia en comparación con los animales antes de la uretroplastia. Demasiada corriente puede conducir a un riesgo de cierre uretral. El injerto debe colocarse con la mucosa orientada hacia la luz uretral con una sutura corredera estanca para evitar fístulas.
Se puede realizar cualquier tipo de uretroplastias con injertos, se pueden evaluar diferentes tipos de injertos. Este modelo experimental nos permite optimizar el uso de injertos y explorar nuevas estrategias terapéuticas, como materiales de ingeniería tisular con impacto en la investigación traslacional para adaptarse a las necesidades clínicas.
