功能基因组筛选为探测基因功能提供了一种强大的方法,并依赖于全基因组质粒文库的构建。传统的质粒文库构建方法既费时又费力。为了解决这个问题,我们开发了一种简单有效的方法,即基于CRISPR的模块化组装,或CRISPRmass。
通过CRISPR/Cas9切割cDNA或ORF质粒的共享载体序列,然后通过相邻组装插入UAS模块,通过CRISPRmass构建全基因组质粒库的过程被标准化为细菌转化前的大规模平行两步试管反应。CRISPRmass可以简单、快速、高效且经济高效地构建各种质粒文库。它还可以应用于编辑各种全基因组质粒文库,在高通量质粒文库编辑方面是网关技术的替代方案,为生物网络的全球研究铺平了道路。