著者スポットライト:CRISPRmass を使用したゲノムワイドプラスミドライブラリー構築の簡素化(英語)

機能的ゲノムスクリーニングは、遺伝子機能を調べるための強力なアプローチを提供し、ゲノムワイドなプラスミドライブラリーの構築に依存しています。プラスミドライブラリー構築のための従来のアプローチは、時間と手間がかかります。この問題を解決するために、私たちはシンプルで効率的な方法、CRISPRベースのモジュラーアセンブリ(CRISPRmass)を開発しています。

CRISPR/Cas9によるcDNAまたはORFプラスミドの共有ベクター配列の切断と、それに続く隣接アセンブリによるUASモジュールの挿入により、CRISPRmassによるゲノムワイドプラスミドライブラリーの構築手順は、細菌の形質転換前の超並列な2ステップ試験管反応として標準化されています。CRISPRmassは、さまざまなプラスミドライブラリーをシンプル、迅速、効率的、かつ費用対効果の高い方法で構築することができます。また、一般的にさまざまなゲノムワイドプラスミドライブラリの編集にも適用でき、ハイスループットプラスミドライブラリ編集におけるゲートウェイ技術の代替手段であり、生物学的ネットワークのグローバルな研究への道を開きます。