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In diesem Artikel

  • Zusammenfassung
  • Zusammenfassung
  • Einleitung
  • Protokoll
  • Ergebnisse
  • Diskussion
  • Offenlegungen
  • Danksagungen
  • Materialien
  • Referenzen
  • Nachdrucke und Genehmigungen

Zusammenfassung

Nach der Überprüfung durch Blut-Sauerstoff-Niveau-abhängigen funktionelle Magnetresonanztomographie (BOLD fMRT), die der entsprechenden somatosensorischen Fass Feld Kortex Bereich (genannt S1BF) korrekt aktiviert, die wichtigsten Ziel dieser Studie ist es, Laktat Inhalt zu quantifizieren Schwankungen in den aktivierten Ratte Gehirnen von lokalisierten Proton Magnetische Resonanzspektroskopie (1H-MRS) bei 7 T.

Zusammenfassung

Kernresonanzspektroskopie (NMR) bietet die Möglichkeit, zerebrale Metabolit Inhalt in Vivo zu messen und nicht-invasiv. Dank der technologischen Entwicklungen des letzten Jahrzehnts und die Erhöhung der Magnetfeldstärke ist es jetzt möglich, gute Auflösung Spektren in Vivo in der Rattengehirn zu erhalten. Neuroenergetics (d.h. das Studium der Stoffwechsel im Gehirn) und vor allem, metabolische Interaktionen zwischen den verschiedenen Zelltypen haben immer mehr Interesse in den letzten Jahren angezogen. Unter dieser metabolischen Wechselwirkungen ist die Existenz eines Laktat-Shuttle zwischen Neuronen und Astrozyten noch umstritten. Es ist daher von großem Interesse für funktionale Proton Magnetische Resonanzspektroskopie (1H-Frau) in einem Rattenmodell des Gehirns Aktivierung und Monitor Laktat durchführen. Jedoch die Methyl-Laktat-Spitze überlappt Lipid Resonanz Gipfeln und ist schwer zu quantifizieren. Die nachfolgend beschriebene Protokoll ermöglicht metabolische und Laktat-Schwankungen in einem aktivierten Hirnareal überwacht werden. Zerebrale Aktivierung erhält man durch Whisker Stimulation und 1H-MRS erfolgt in der entsprechenden aktivierten Fass Kortex, deren Gebiet mit Blut-Sauerstoff-Niveau-abhängigen funktionelle Magnetresonanztomographie (fMRT Fett) nachgewiesen ist. Alle Schritte sind ausführlich beschrieben: die Wahl von Anästhetika, Spulen und Sequenzen, effiziente Whisker Stimulation direkt in den Magneten und Datenverarbeitung zu erreichen.

Einleitung

Das Gehirn besitzt innere Mechanismen, mit denen die Regulierung von seinem großen Substrat (d.h., Glukose), sowohl für ihren Beitrag und dessen Nutzung, je nach Variationen in lokalen zerebralen Aktivität. Obwohl Glukose die wichtigsten Energie-Substrat für das Gehirn ist, haben in den letzten Jahren durchgeführten Experimente gezeigt, dass Laktat, die von den Astrozyten produziert wird, könnte eine effiziente Energie-Substrat für die Neuronen. Dies wirft die Hypothese eines Laktat-Shuttle zwischen Astrozyten und Neuronen1. Bekannt als ANLS, für Astrozyten-Neuron Laktat Shuttle2, die Theorie ist immer noch sehr umstritten, aber hat dazu geführt, den Vorschlag, dass Glukose, anstatt gehen direkt in Neuronen, gestattet die Astrocyten, wo es in verstoffwechselt wird Laktat, ein Stoffwechselprodukt, das ist , dann übertragen auf die Neuronen, die es als effiziente Energie-Substrat verwenden. Wenn solch ein Shuttle in Vivovorhanden ist, müsste es mehrere wichtige Konsequenzen für das Verständnis der grundlegenden Techniken in funktionelle zerebrale Bildgebung (Positronen-Emissions-Tomographie [PET]) und für die Entschlüsselung der Stoffwechselveränderungen beobachtet im Gehirn Pathologien.

Stoffwechsel im Gehirn zu studieren, und besonders, metabolische Interaktionen zwischen Neuronen und Astrozyten, vier Haupttechniken zur Verfügung (nicht einschließlich Mikro-/ Nanosensoren): Autoradiographie, PET, zwei-Photon fluoreszierende konfokalen Mikroskopie und Frau. Autoradiographie war eines der ersten Verfahren vorgeschlagen und liefert Bilder der regionalen Anhäufung von radioaktiven 14C-2-Deoxyglucose in Hirnschnitten, während PET Erträge in Vivo Bilder der regionalen Aufnahme von radioaktiven 18 F-Deoxyglucose. Beide haben den Nachteil der Verwendung von irradiative Molekülen beim produzieren niedrige räumliche Auflösung. Zwei-Photonen-Mikroskopie bietet zellulären Auflösung von fluoreszierenden Sonden, aber Lichtstreuung durch Gewebe begrenzt die bildgebende Tiefe. Diese drei Techniken haben früher, während Whisker Stimulation3,4,5,6Neuroenergetics bei Nagetieren zu studieren. In vivo MRS hat den doppelten Vorteil, nicht-invasive und nicht radioaktiven und jede Gehirnstruktur erkundet werden. Darüber hinaus kann MRS durchgeführt werden, während der neuronalen Aktivierung, eine Technik namens funktionale MRS (fMRS), die vor kurzem in Nagetieren7entwickelt wurde. Daher wird vorgeschlagen, ein Protokoll zum Stoffwechsel im Gehirn während der zerebralen Aktivität von 1H-Frau in Vivo und nicht-invasiv zu überwachen. Das Verfahren kann wird bei Erwachsenen gesunden Ratten mit Gehirn-Aktivierung erhalten durch einen Luftstoß Whisker Stimulation durchgeführt direkt in einen 7 T Magnetresonanz (MR) Imager beschrieben jedoch bei genetisch veränderten Tieren, sowie in einem pathologischen Zustand angepasst .

Protokoll

Alle tierische Verfahren wurden nach den Tier Experimente Vorgaben der Richtlinie der Europäischen Gemeinschaften der 24. November 1986 (86/609/EWG) durchgeführt. Das Protokoll erfüllt die ethischen Richtlinien des französischen Landwirtschaftsministeriums und Wäldern und von den lokalen Ethikkommissionen genehmigt wurde (Comité d 'Éthique pour L' Expérimentation Animale Bordeaux n ° 50112090-A).

Hinweis: Während der Herr Messungen, ein angemessenes Schutzniveau Anästhesie und physiologisches monitoring (Körpertemperatur, Atemfrequenz) sind unabdingbare Voraussetzungen.

(1) Tiere

  1. Verwenden Sie männliche Wistar-Ratten mit einem Gewicht zwischen 350 und 450 g.
  2. Halten Sie sie auf einem 12:12 h hell: Dunkel-Zyklus und liefern Nahrung und Wasser Ad Libitum.

(2) Anästhesie

  1. Bereiten Sie die notwendige Ausrüstung für Anästhesie (Abb. 1A, B, siehe Tabelle of Materials): eine 5 mL Spritze mit Medetomidine in physiologischer Kochsalzlösung (240 µg/kg/h, mit einer Perfusion Rate von 20 µL/min), eine 0,5 mL Spritze mit Atipamezol (20 μl in 0,5 mL Kochsalzlösung) und Augensalbe.
    Hinweis: Halten Sie alle Geräte unter der Dunstabzugshaube, mit Ausnahme der 5 mL-Spritze mit Medetomidine, die in der Spritzenpumpe in der Nähe der Magnet für Anästhesie bei Herrn Akquisitionen gelegt wird.
  2. Legen Sie die Ratte in der Induktion Kammer und starten Sie die Narkose durch die Bereitstellung von 4 % Isofluran passen Sie die Sauerstoff-Durchflussmenge bis 1,5 L/min.
  3. Bewerten Sie die Tiefe der Narkose durch die Beurteilung des Rückzug der Pfote Reflexe.
  4. Wenn die Ratte nicht auf Reize reagiert, nehmen Sie es aus der Narkose-Box, legen Sie es auf der Bank mit der Nase in der Isofluran-Maske und erhalten Sie Anästhesie durch die Bereitstellung von 2,5 % Sauerstoff bei 1,5 L/min zu.
  5. Sanft massieren Sie das Heck und legen Sie die Blutsperre (Abbildung 1).
    Hinweis: Die Massage kann in warmem Wasser mit einer Temperatur zwischen 38 und 42 ° C, um bessere Vasodilatation der Venen zu erhalten durchgeführt werden.
  6. Legen Sie die periphere intravenöse Katheter (22 G), zuvor heparinisierten, in der linken oder rechten Rute Ader. Beachten Sie, dass eine venöse Rückkehr beobachtet wird (ein Tropfen Blut ist sichtbar auf den distalen Teil der Nadel) wenn der Katheter ist korrekt eingefügt (Abbildung 1).
  7. Eventuelle Luftblasen vorhanden in den Katheter Totraum Volumen mit der 2 mL Spritze mit physiologischer Kochsalzlösung und Heparin ausblasen.
  8. Auftragen Sie der Augensalbe und bereiten Sie die Spritze mit Atipamezol (17 µg/mL) um die Ratte am Ende des Experiments zu wecken.

(3) Ratte Platzierung im Magnet für Whisker Stimulation

  1. Legen Sie einen Atem-Sensor auf dem Magnet-Bett und übertragen Sie dann die Ratte von der Bank auf dem Magnet-Bett. Legen Sie es in Bauchlage mit seiner Nase in der Isofluran-Maske mit der Atmung-Sensor befindet sich zwischen dem Brustkorb und dem Magnet-Bett.
    Hinweis: Alle Geräte, der den MRT-Raum betritt sollte MRT-sicher sein.
  2. Verringern Sie Isofluran (von 4 % auf 1,5 %-2 %) zu, während der Ratte Platzierung und wechseln Sie die Narkose zu Medetomidine am Ende dieses Verfahrens. Sicherstellen Sie, dass die richtige Schnurrhaare kostenlos sind, haben am rechten Rand an der Vorderseite der Ratte MRI Bett vorher für eine Bewegung der die Barthaare schneiden.
  3. Halten Sie die Ratte in Position mit Klebeband und überwachen Sie ihre Atmung, die zwischen 60 und 80 Atemzüge pro Minute liegen muss.
  4. Machen Sie ein Segel, das alles in Ordnung Schnurrhaare in den Papierstreifen (Abbildung 2) fallen. Richten Sie das flexible Auslaufrohr der Luftstoß Anlage entlang der Ratte MRI Bett, so dass das Teil beenden das Rohr senkrecht steht und ca. 1,5 cm aus dem Segel. Mit Papier-Klebeband befestigen.

4. Whisker Stimulation

  1. Verbinden Sie die flexible Zuleitung eine Druckluftquelle (1 Bar) mit einem Magnetventil Ventil Steuereingang und das Abzugsrohr an der Magnetspule Regelausgang Ventil (Abbildung 3). Sicherstellen Sie, dass das Magnetventil Kontrolle außerhalb des Magnet-Raumes bleibt.
  2. Stecken Sie das pulsierende Gerät in das Magnetventil und in den Magneten mit der Transistor-Transistor-Logik (TTL)-Port. Konfigurieren Sie es so, dass die pulsierenden Frequenz = 8 Hz, der Impuls-Zeit = 20 s und die Ruhezeit = 10 s.
    Hinweis: Diese Parameter visualisiert auf den kleinen Flüssigkristall Bildschirm (LCD), sind die drei engagierten analoge Potentiometer einstellbar über . Das elektronische pulsierende Gerät, das welches das Paradigma steuert, muss qualitativ hochwertige Elektronikbauteile vermeide jegliche Drift in Zeitparameter (für die richtige Nachbearbeitung) zusammengesetzt sein.

(5) BOLD fMRT Erwerb

  1. Platzieren Sie die Rattengehirn zu, so dass es in einer aufrechten Position und verwenden Sie die Ohr-Balken, um sie aufrecht zu erhalten. Legen Sie die Lautstärke Array Spule über die Ratte Kopf (Abb. 4A) und mit Klebeband fixieren. Überprüfen Sie, ob das Segel richtig bewegt (Anteroposterior Bewegung, keine Rotation und keine Reibung des Segels) wenn der Luftstoß System ist gedreht auf; dann schalten Sie es aus.
  2. Legen Sie das Bett und die Spule in der Mitte des Magneten. Überprüfen Sie, ob das Segel richtig noch in Bewegung ist, sobald das Bett innerhalb der Magnet ist, wenn der Luftstoß System eingeschaltetist; dann schalten Sie es aus. Wechseln Sie komplett von Isofluran in Medetomidine (Perfusion Rate: 20 µL/min).
  3. Überprüfen Sie, dass die Ratte gut gelegen unter Verwendung einer Lokalisierung-Sequenz (TE = 2,5 ms; TR = 100 ms; Durchschnitt = 1; Wiederholung = 1; Stück = 1 mm; Bildgröße = 256 x 256; Sichtfeld (FOV) = 50 x 50 mm; Scan-Zeit = 12 s 800 ms). Ziehen Sie der Localizer -Sequenz-Registerkarte in der Anweisung Namen und klicken Sie auf weiter.
  4. Ziehen Sie die T2_Star_FID_EPI -Sequenz-Registerkarte in der Anweisung Name, Zentrum der FOV auf der Mitte des Gehirns, und klicken Sie auf der Registerkarte " Einstellung Plattform ", die bearbeitete Scan-Anweisung zu öffnen. Zeichnen Sie eine B-0 -Karte und fahren Sie mit einem Scan-Shim.
    Hinweis: Für eine B-0 -Karte, verwenden Sie die folgenden Parameter: Echo erstmals = 1,65 ms; TR = 20 ms, durchschnittliche = 1; Flip-Winkel = 30°; Echo Abstand = 3,805 ms; Scheibe = 58 mm; Bildgröße = 64 x 64 x 64; FOV = 58 x 58 x 58 mm; Scan-Zeit = 1 m 24 s 920 Frau für Scan Shim, verwenden Sie die folgenden Parameter: Voxel selektive Anregung = Dampf "glockenförmig" Puls; TE = 5 ms; Mischzeit = 10 ms; Übernahme Dauer = 204,8 ms; Bandbreite = 10.000 Hz; Verweilzeit = 50 μs).
  5. Starten Sie die Sequenz T2 Star_FID_EPI (TE = 16,096 ms; TR = 500 ms; Durchschnitt = 1; Wiederholung = 600; Stück = 1 mm; vier aufeinanderfolgende Scheiben; Bildgröße = 128 x 128; FOV = 20 x 20 mm; Bandbreite = 333.333,3 Hz; Scan-Zeit = 5 min 00 s).
    Hinweis: Aufgrund der TTL-Port, ein externes Triggersignal Luftstoß System zur gleichen Zeit startet. Das Paradigma = [20 s Aktivierung + 10 s Rest] X 10 für die gesamte Dauer der 600 Scans, 500 ms pro Scan. Die Scheiben sind in der Mitte des Bereichs Fass Bereich zentriert.
  6. Erwerben Sie eine andere Lokalisierung-Sequenz (gleiche wie eine beschriebene in Schritt 5.3), um mit dem ersten zu vergleichen und prüfen, ob die Ratte ist während der T2_Star_FID_EPI Sequenz umgezogen.
  7. Das Bett in die Ausgangsposition zu bringen, entfernen Sie die Volumen-Array-Spule und die Oberfläche Spule zu verbinden.

6. Fett Verarbeitung

  1. Öffnen Sie die T2-Star_FID_EPI-Datei und lesen Sie das T2 Star_FID_EPI Bild in Bild-Anzeige. Öffnen Sie das Start-up-Fenster der funktionale Steuerung, genannt FunController.
  2. In dieser Registerkarte " Bearbeiten " wählen Sie das funktionelle Bildgebung Fenster und definieren Sie die Stimulation-Protokoll (Dauer und Wechsel von On/Off Perioden, entspricht das Paradigma verwendet).
  3. Wählen Sie das Protokoll-Fenster (Dataset mit 600 Frames) und legen Sie den Wert von 40 in der Registerkarte " Auf Zeit " und 20 in die Widerrufsfrist Registerkarte klicken Sie auf die Registerkarte " Attribution invertieren " und ziehen Sie den Schieberegler Stimulation Staaten auf der linken Seite, wählen die Wert 1.
  4. Klicken Sie im Fenster Vorverarbeitung auf dem Median-Filter im Flugzeug für die Vorverarbeitung und auf dem Median-Filter (2D, 3D) für die Nachbearbeitung.
  5. Klicken Sie auf die Registerkarte " Execute " und ziehen Sie den Cursor um die Overlay-Lookup-Tabelle anzupassen. Visualisieren Sie die aktivierte Hirnareal (Abbildung 4 b).

(7) Proton Frau Akquisitionen

  1. Um die Oberfläche Spule richtig zu positionieren, ändern Sie die Position des Kopfes Ratte. Drehen Sie den Kopf (ca. 30° im Uhrzeigersinn), so dass die Oberfläche Spule (Abb. 5A) oberhalb des linken Fasses Kortex dabei horizontal und befindet sich im Zentrum innerhalb der Magnet Magnet platziert werden kann.
  2. Legen Sie die Oberfläche Spule, befestigen Sie es an die Rattengehirn mit Klebeband (Abb. 5 b) und überprüfen Sie, ob das Segel richtig bewegt (Anteroposterior Bewegung, keine Rotation und keine Reibung des Segels) wenn der Luftstoß System ist gedreht auf; dann schalten Sie es aus mit dem Hauptschalter.
  3. Überprüfen Sie, dass das Segel richtig bewegt, sobald das Bett innerhalb der Magnet ist, wenn der Luftstoß System eingeschaltetist. Dann schalten Sie es aus.
  4. Überprüfen Sie, dass die Ratte sitzt korrekt verwenden eine Folge von Lokalisierung. Legen Sie die Parameter wie folgt: TE = 2,5 ms; TR = 100 ms; Durchschnitt = 1; Wiederholung = 1; Stück = 1 mm; Bildgröße = 256 x 256; FOV = 50 x 50 mm; Scan-Zeit = 12 s 800 ms.
    1. Ziehen Sie der Localizer -Sequenz-Registerkarte in der Anweisung Name Fenster und klicken Sie auf die Registerkarte " weiter ", um das Scan-Programm auszuführen.
  5. Wenn die Gehirn Lokalisierung korrekt ist, ziehen Sie die T2_TurboRARE -Sequenz-Registerkarte im Fenster Befehl Name und klicken Sie auf weiter , um das Scan-Programm ausführen. Diese anatomische Bilder, zusammen mit der früheren BOLD fMRT-Übernahme ermöglicht die korrekte Lokalisierung der Voxel in der S1BF für MRS.
    Hinweis: Die T2_TurboRARE-Parameter sind 14 Scheiben, 2 mm pro Scheibe, FOV = 2,5 x 2,5 cm, TE = 100 ms, TR = 5.000 ms Matrix = 128 x 128, Sequenz-Zeit = 2 min 40 s.
  6. Ziehen Sie LASER -Sequenz-Registerkarte in der Anweisung Name -Fenster, stellen Sie die Voxel (Höhe 2 mm, 2,5 mm lang, 3 mm tief) in den Mittelpunkt des Gebiets S1BF.
    1. Verwenden Sie eine Ratte Gehirn-Atlas und die BOLD fMRT-Verbesserung die Zone auf die T2-Bilder (Abbildung 6) zu lokalisieren. Klicken Sie auf der Registerkarte " Einstellung Plattform ", die bearbeitete Scan-Anweisung zu öffnen. Klicken Sie auf die Registerkarte " wackeln " und ändern Sie die Impedanz (elektronische laden) der Spule empfangen es leicht Tune. Klicken Sie auf die Registerkarte " anwenden ", wenn die Abstimmung abgeschlossen ist, schließen Sie den Editor Anleitung und übernehmen Sie die Änderungen in der bearbeiteten Anweisung.
  7. Aufzeichnen einer B-0 -Karte und fahren Sie mit Shim zu scannen, und führen Sie dann einen lokalen Shim.
    Hinweis: Für die B-0 -Karte, verwenden Sie die folgenden Parameter: Echo erstmals = 1,65 ms; TR = 20 ms, durchschnittliche = 1; Flip-Winkel = 30°; Echo Abstand = 3,805 ms; Scheibe = 58 mm; Bildgröße = 64 x 64 x 64; FOV = 58 x 58 x 58 mm; Scan-Zeit = 1 m 24 s 920 Frau für die Scan-Shim, verwenden Sie die folgenden Parameter: Voxel selektive Anregung Dampf "glockenförmig" Puls; TE = 5 ms; Mischzeit = 10 ms; Übernahme Dauer = 204,8 ms; Bandbreite = 10.000 Hz; Verweilzeit = 50 μs. Für die lokalen Shim, verwenden Sie die folgenden Parameter: Wasser-Unterdrückung, Dampf Übernahme Dauer = 1.363,15 ms; Punkte = 4.096; Bandbreite in Hz = 3.004,81 Hz; Bandbreite in ppm = 10 ppm; Verweilzeit = 166,40 μs; spektrale Auflösung = 0,37 Hz/Punkte. Die LASER-Parameter sind: echo der Zeit = 19,26 ms; TR = 2.500 ms; Durchschnitt = 128 oder 32; Scan-Zeit = 5 min 20 s oder 1 min 20 s; Erwerb Punkte = 4.096.
  8. Führen Sie 1H-Frau.
    1. Start der 1H-MRS Erwerb zunächst während einer Ruhephase (Laserscans 4 x 32 + 128 LASER scannt; 2.500 ms pro scan).
    2. Erwerben Sie eine andere Lokalisierung-Sequenz (gleiche wie eine beschriebene in Schritt 5.3) zu vergleichen mit dem ersten aufgenommen und sorgen dafür, dass die Ratte nicht schon beim Erwerb der LASER bewegt hat.
    3. 1H-MRS während Whisker Aktivierung unter Verwendung des LASER-Sequenz durchführen (Laserscans 4 x 32 + 128 LASER scannt; 2.500 ms pro scan) mit dem Luftstoß System (Paradigma = 20 s der Aktivierung und 10 s Rest).
    4. Wieder einmal führen Sie eine Lokalisierung Abfolge zu prüfen, ob die Ratte ist umgezogen.
      Hinweis: Die Anzahl der Scans und ruhen/aktiviert Perioden kann angepasst und geändert werden, aber darauf achten, dass die Ratte nicht bewegt wird, durch eine Lokalisierung Sequenz regelmäßig durchführen.
  9. Bringen Sie das Bett in die Ausgangsposition zu, entfernen Sie die Oberfläche Spule zu und verschieben Sie die Ratte zurück auf die Bank. Injizieren Sie Atipamezol in eine Hautfalte gemacht in der Ratte zurück zum Umkehren der Narkose und wecken sie.

(8) Proton Frau Verarbeitung

  1. Öffnen Sie die LCModel-Software, und klicken Sie auf die entsprechende Registerkarte, wählen den richtigen Datentyp ( Free Induction Decay -Datei) und wählen die richtige Datei. Klicken Sie auf die Registerkarte " OK ", wenn dies geschehen ist.
  2. Die Quantifizierung Steuerungsparameter Schritt für Schritt zu optimieren.
    1. Im Abschnitt Titel manuell geben Sie einen Titel und definieren Sie eine angemessene ppm-Bereich (z.B. 0,2 bis 4,0 ppm) durch manuelle Eingabe in den benötigten Wert in die entsprechenden Felder.
    2. Im Abschnitt Basis-Datei wählen Sie und laden Sie die gewünschte Datei korrekt angepasst Makromolekül Baseline (es kann durch die Software-Anbieter bereitgestellt werden).
    3. Definieren und die input-Regler-Parameter zu laden. Bereiten Sie den Speichervorgang Prozess aller nützlichen Dateitypen im Voraus (Tabelle = kompakte Tabellen; PS = notwendig PostScript-Ausgabe; CSV = Format für Arbeitsblätter; KOORD = Koordinaten für Grundstücke). Klicken Sie auf die Registerkarte " RunLCModel ", um die Quantifizierung von LCModel zu starten.
  3. Definieren Sie ausgewählte Metaboliten um Statistiken zu generieren.
    Hinweis: LCModel bietet Metabolit Quantifizierung und schätzt Fehler durch einen Wert Cramér-Rao Untergrenze (CRLB) bezeichnet. Ein Wert mit einem CRLB < 15 gilt als eine optimale Quantifizierung. Ein CRLB > 25 zeigt einen unzuverlässigen Wert.

Ergebnisse

Dieses Protokoll ermöglicht die Quantifizierung der Metabolit Schwankungen während der zerebrale Aktivierung, die durch richtige Whisker Stimulation direkt im Magneten erzielt wird.

In dieser Studie wurde das Gesamtziel der BOLD fMRT zu prüfen, ob die Whisker Stimulation effizient war, aktivierte S1BF Bereich zu visualisieren und die Voxel für 1H-fMRS richtig lokalisieren. Das Gerät gebaut für Whisker Aktivierun...

Diskussion

Der Lauf Kortex, auch als S1BF für die somatosensorischen Cortex oder Fass Feld ist eine Region innerhalb der kortikalen Schicht IV, die Cytochrom C Oxidase9Färbung beobachtet werden kann, und seiner Organisation ist bekannt, seit es weitgehend beschrieben 10,11. Ein Vibrissa ist mit einem Fass, verbunden in dem rund 19.000 Neuronen in einer Spalte12organisiert sind. Die Whisker-Fass Kortex Weg hat mehrere Vorteil...

Offenlegungen

Die Autoren haben nichts preisgeben.

Danksagungen

Diese Arbeit wurde durch den Zuschuss LabEx TRAIL unterstützt Referenz ANR-10-LABX-57 und eine Französisch-Schweizerische ANR-FNS gewähren Referenz ANR-15-CE37-0012. Die Autoren danken Aurélien Trotier für seine technische Unterstützung.

Materialien

NameCompanyCatalog NumberComments
0.5 mL syringe with needleBecton, Dickinson and Company, USA2020-100.33 mm (29 G) x 12.7 mm
1H spectroscopy surface coilBruker, Ettlingen, GermanyT116344
7T Bruker Biospec systemBruker, Ettlingen, Germany70/20 USR
Arduino Uno based pulsing devicecustom made
AtipamezoleVétoquinol, S.A., FranceV8335602Antisedan, 4.28 mg
Breathing maskcustom made
Eye ointmentTVM laboratoire, France40365Ocry gel 10 g
Induction chambercustom made30x17x15 cm
Inlet flexible pipeGardena, Germany1348-204.6-mm diameter, 3m long
Isoflurane pump, Model 100 series vaporizer, classic T3Surgivet, Harvard ApparatusWWV90TTfrom OH 43017, U.S.A
Isoflurane, liquid for inhalationVertflurane, Virbac, FranceQN01AB061000 mg/mL
KD Scientific syringe pumpKD sientific, Holliston, USALegato 110
LCModel softwareLCModel Inc., Ontario, Canada6.2
Medetomidine hydrochlorideVétoquinol, S.A., FranceQN05CM91Domitor, 1 mg/mL
Micropore roll of adhesive plaster3M micropore, Minnesota, United StatesMI912
Micropore roll of adhesive plaster3M micropore, Minnesota, United StatesMI925
Monitoring system of physiologic parameterSA Instruments, Inc, Stony Brook, NY, USAModel 1025
NaClFresenius Kabi, GermanyB05XA030.9 % 250 mL
Outlet flexible pipeGardena, Germany1348-204.6-mm diameter, 4m long
Paravision softwareBruker, Ettlingen, Germany6.0.1
Peripheral intravenous catheterTerumo, Shibuya, Tokyo, JaponSP500930S22 G x 1", 0.85x25 mm, 35 mL/min
Rat head coilBruker, Ettlingen, Germany
Sodic heparin, injectable solutionChoai, Sanofi, Paris, FranceB01AB015000 IU/mL
Solenoid control valves, plunger valve 2/2 way direct-actingBurkert, Germany3099939Model type 6013
Terumo 2 ml syringeTerumo, Shibuya, Tokyo, JaponSY243with 21 g x 5/8" needle
Terumo 5 mL syringeTerumo, Shibuya, Tokyo, Japon05SE1
Wistar RJ-Han ratsJanvier Laboratories, France

Referenzen

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  28. Bak, L. K., Walls, A. B. CrossTalk opposing view: lack of evidence supporting an astrocyte-to-neuron lactate shuttle coupling neuronal activity to glucose utilisation in the brain. The Journal of Physiology. 596, 351-353 (2018).

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