7 기능 자기 공명 분광학 수염 활성화 중 쥐 신 피 질에서 T

요약

혈액 산소-레벨-종속적 기능 자기 공명 영상 (대담한 fMRI)는 해당 somatosensory 배럴 필드 피 질 영역 (S1BF 라고 함)가 올바르게 활성화, 주요 검사 후 젖 산 콘텐츠를 계량 하는 것입니다이 연구의 목표 지역화 된 양성자 자기 공명 분광학 (¹H 부인) 7 t.에 의해 활성화 된 쥐 두뇌에 있는 동요

초록

뇌 대사 산물 내용에을 vivo에서 측정 하기 위해 기회를 제공 하는 핵 자기 공명 (NMR) 분광학 및 noninvasively. 지난 10 년간 그리고 자기 강도 증가 기술 개발, 덕분에 그것은 지금 좋은 해상도 스펙트럼에서 vivo에서 쥐 뇌에서 얻을 수 있습니다. Neuroenergetics (즉, 뇌 대사의 연구) 및, 특히, 대사 상호 작용 다른 세포 유형 사이 최근 몇 년 동안에서 점점 더 많은 관심을 받고 있다. 이러한 대사 상호 작용 중 뉴런 사이의 이다 젖 산 셔틀의 존재는 여전히 논의 되었다. 그것은, 따라서, 큰 관심 뇌 활성화 및 모니터 젖 산의 쥐 모델에서 기능 양성자 자기 공명 분광학 (¹H 부인)를 수행. 그러나, 메 틸 젖 피크 지질 공명 봉우리를 중복 하 고 계량 하기 어렵습니다. 아래에 설명 된 프로토콜 대사 있으며 활성화 된 뇌 영역에서 모니터링할 변동 젖이 나올. 뇌 활성화 수염 자극에 의해 얻은 고 ¹H 부인 그 지역 혈액 산소 수준 종속 기능 자기 공명 영상 (대담한 fMRI)를 사용 하 여 검출은 해당 활성화 배럴 피 질에서 수행 됩니다. 모든 단계는 완전히 설명: 마 취약, 코일, 그리고 시퀀스, 자석, 및 데이터 처리에 직접 효율적인 수염 자극을 달성의 선택.

서문

두뇌는 모두 기여 및 지역 대뇌 활동에 변화에 따라 그 활용에 대 한 (즉, 포도 당), 그것의 주요 기판의 규칙을 허용 하는 기본 메커니즘을 소유한 다. 포도 당 두뇌에 대 한 주요 에너지 기질 이지만, 최근 몇 년 동안에서 수행 하는 실험 그 젖은 이다에 의해 생성 하는 뉴런에 대 한 효율적인 에너지 기질 수 나타났습니다. 이 이다 및 신경¹사이 젖 셔틀의 가설을 발생 시킵니다. 사이토 신경 젖 셔틀², ANLS로 알려진 이론은 아직도 매우 토론 된다 하지만 그 포도 당 제안에 주도하 고 있다, 뉴런으로 직접가 이다, 어디에 대사는 입력할 수 있습니다 보다는 젖이 나올, 즉 대사 산물 다음, 효율적인 에너지 기질으로 사용 하는 신경으로. 이러한 셔틀 비보에있으면, 그것은 몇 가지 중요 한 결과가, 기능적 뇌 영상 (양전자 방출 단층 촬영 [애완 동물])에서 기본 기술 이해 하 고 해독 대사 변경 관찰 했 두뇌 병 리.

뇌 대사를 공부 하 고, 특히, 신경 및 이다, 4 개의 주요 기술 간의 상호 작용을 신진 대사 있습니다 (제외한 마이크로-/ nanosensors): autoradiography, 애완 동물, 2-광자 형광 confocal 현미경 검사 법, 그리고 부인. Autoradiography 제안 하는 첫 번째 방법 중 하나는 고 방사성 ¹⁴C-2-deoxyglucose 뇌 조각, 방사성 ¹⁸ 의 지역 이해의 이미지 vivo에서 애완 동물 수익률 동안 지역 축적의 이미지를 제공 합니다. F-deoxyglucose입니다. 그들은 모두 낮은 공간 해상도 이미지를 생산 하는 동안 irradiative 분자를 사용 하 여 단점이 있다. 두 광자 현미경 형광 프로브, 셀룰러 해상도 제공 하지만 조직에 의해 산란 이미징 깊이 제한. 이러한 세 가지 기술 이전 수염 자극^3,4,,56동안 설치류에 neuroenergetics을 공부에 사용 되었습니다. Vivo에서 부인의 비 침범 성 및 nonradioactive, 듀얼 장점이 고 어떤 뇌 구조를 탐험 하실 수 있습니다. 또한, 부인 신경 활성화, 설치류⁷에서 최근 개발 된 기능 부인 (fMRS) 이라는 기법 중 수행할 수 있습니다. 따라서, 프로토콜 대뇌 활동을 vivo에서 ¹H 부인에 의해 noninvasively 동안 뇌 대사를 모니터링 하는 제안 합니다. 절차 7 T 자기 공명 (MR) 영상에서 직접 수행 하는 어 퍼프 수염 자극에 의해 얻은 뇌 활성화와 성인 건강 한 쥐에서 설명 하지만 유전자 변형된 동물, 뿐만 아니라 어떤 병 적인 조건에 적용할 수 있습니다. .

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프로토콜

모든 동물 절차는 1986 년 11 월 24 일 (86/609/EEC)의 유럽 공동체 위원회 지시문의 동물 실험 지침에 따라 실시 했다. 프로토콜과 프랑스 농업과 숲의 윤리적 지침을 충족 지역 윤리 위원회에 의해 승인 되었다 (위원회 회의 d 'éthique L를 부 어' expérimentation Animale 보르도 n ° 50112090-A).

참고: 미스터 측정 하는 동안 마 취 및 생리 적 모니터링 (체온, 호흡 속도)의 적절 한 수준을 필수 요구 됩니다.

1입니다. 동물

1. 남성 Wistar 쥐 350와 450 g 사이 무게를 사용 합니다.
2. 12:12 h 빛: 다크 주기를 음식을 제공 하 고 광고 libitum물에 그들을 유지.

2입니다. 마 취

1. 마 취에 필요한 장비를 준비 (그림 1A, B, 재료의 표참조): 생리 염 분 해결책 (240 µ g/k g/h, 20 µ L/min의 관류 속도)에 medetomidine를 포함 하는 5 mL 주사기 0.5 mL 주사기를 포함 하는 atipamezole (20 μ, 염 분 해결책의 0.5 ml에서), 그리고 눈 연 고.
   참고: 후드 추출기, 미스터 인수 하는 동안 마 취에 대 한 자석 근처 주사기 펌프에 배치 되는 medetomidine를 포함 하는 5 mL 주사기를 제외 하 고 모든 장비 유지.
2. 유도 실에서 쥐를 배치, 4 %isoflurane 제공 함으로써 마 취를 시작 하 고 1.5 L/min에 산소 흐름 속도 조정할.
3. 발 반사의 철수를 평가 하 여 마 취의 깊이 평가 합니다.
4. 쥐 자극에 응답 하지 않는 경우 마 취 상자, isoflurane 마스크에 그것의 코를 가진 벤치에 그것을 배치 하 고 2.5 %1.5 L/min에 산소에 전달 하 여 마 취를 유지.
5. 부드럽게 마사지는 꼬리와 지 혈 대 (그림 1C) 장소.
   참고: 마사지는 따뜻한 물, 38 그리고 42 ° C, 정 맥의 더 나은 엷게를 사이의 온도에서 수행할 수 있습니다.
6. 주변 정 맥 카 테 터 (22 세대), 이전 heparinized, 왼쪽 또는 오른쪽 꼬리 정 맥에 삽입 합니다. 정 맥 반환 관찰 됩니다 참고 (피 한 방울은 바늘의 원심 부분에 표시) 때 테가 올바로 삽입 (그림 1D).
7. 어떤 기포 생리 염 분 해결책 및 헤 파 린 2 mL 주사기를 사용 하 여 카 테 터 죽은 공간 볼륨에 밖으로 날 려.
8. 눈 연 고를 적용 하 고 실험의 끝에 쥐를 각 성 하 atipamezole (17 µ g/mL)를 포함 하는 주사기를 준비.

3. 쥐 배치 자석에 수염 자극에 대 한

1. 자석 침대에 호흡 센서를 놓고 자석 침대 벤치에서 쥐를 전송 합니다. 흉 곽과 자석 침대 사이 있는 호흡 센서와 isoflurane 마스크에 그것의 코를 가진 경향이 위치에 놓습니다.
   참고: MRI 룸을 입력 하는 모든 장비는 MRI-안전 해야 합니다.
2. 쥐 배치 중 (4% ~ 1.5%-2%)에서 isoflurane 감소 하 고이 절차의 끝에 medetomidine에 마 취를 전환 합니다. 바로 수염 쥐 수염의 움직임을 허용 하도록 미리 MRI 침대의 앞에 오른쪽 가장자리를 잘라 데 무료 인지 확인 합니다.
3. 테이프와 위치에 쥐를 누른 사이의 분당 60 및 80 호흡의 호흡을 모니터링 합니다.
4. 종이 테이프 (그림 2)에서 모든 바로 수염을 트래핑 하는 항해를 확인 합니다. 튜브를 종료 부분은 수직 그리고 항해에서 약 1.5 c m에 따라 쥐 MRI 침대에 어 퍼프 시스템의 유연한 출구 파이프를 맞춥니다. 종이 테이프와 함께 그것을 해결.

4. 수염 자극

1. 솔레노이드 제어 밸브 입력 및 출구 파이프 솔레노이드 제어 밸브 출력 (그림 3)를 압축 공기 소스 (1 바)에서 유연한 유입 관을 연결 합니다. 솔레노이드 제어 밸브는 자석 외부 유지 확인 합니다.
2. 트랜지스터-트랜지스터 논리 (TTL)을 사용 하 여 자석으로 펄싱 장치 솔레노이드 밸브에 연결-포트. 그것을 구성 하는 것은 있도록 pulsing 주파수 = 8 Hz 펄스 시간 = 20 s, 그리고 휴식 시간 = 10 s.
   참고: 이러한 매개 변수를 작은 액정에 시각 디스플레이 (LCD) 스크린, 조정 가능한 통해 3 전용된 비슷한 포 텐 쇼 미터. 패러다임을 제어, 전자 펄스 장치 시간 매개 변수 (올바른 후 처리)에 어떤 드리프트를 방지 하려면 전자 부품을 높은 품질의 구성 해야 합니다.

5. 대담한 fMRI 수집

1. 수직 위치에 되도록 쥐 뇌를 놓고 귀 막대를 사용 하 여 그것을 유지 합니다. 볼륨 배열 코일 쥐의 머리 (그림 4A) 위에 놓고 테이프를 사용 하 여 문제를 해결 합니다. (Anteroposterior 운동, 회전 안 및 항해의 아무 마찰) 항해를 올바르게 이동 확인 공기 퍼프 시스템은 때 에; 다음, 그것을 떨어져스위치.
2. 자석의 중앙에는 침대와 코일을 삽입 합니다. 항해 인지 확인 여전히 이동 올바르게 일단 침대는 자석 내부에 어 퍼프 시스템에 경우 에; 다음, 그것을 떨어져스위치. Medetomidine isoflurane에서 완전히 전환 (관류 속도: 20 µ L/min).
3. 체크는 쥐 잘 있는 지역화 시퀀스를 사용 하 여 (테 = 2.5 ms; TR = 100 ms; 평균 = 1; 반복 = 1; 슬라이스 = 1 밀리미터; 이미지 크기 256 x 256; = 시야 (FOV) = 50 x 50 mm; 스캔 시간 = 12 s 800 ms). 명령 이름 으로 지역화 시퀀스 탭을 드래그 하 고 계속클릭 하십시오.
4. 명령 이름, 센터, 두뇌의 중간에 FOV에 T2_Star_FID_EPI 시퀀스 탭을 끌어서 조정 플랫폼 탭 편집된 검색 명령 열을 클릭 합니다. B₀ 지도 기록 하 고 검사 심 진행.
   참고: B₀ 지도 사용 하 여 다음 매개 변수: 첫 번째 에코 시간 = 1.65 ms; TR = 20 밀리초, 평균 = 1; 각도 대칭 = 30 °; 에코 간격 = 3.805 석사; 조각 = 58 m m; 이미지 크기 = 64 x 64 x 64; FOV = 58 x 58 x 58 mm; 스캔 시간 = 1 m 24의 920 양 스캔 shim에 대 한 다음 매개 변수 사용: 복 선택적 여기 = 증기 가우시안 펄스; 테 = 5 석사; 혼합 시간 = 10 ms; 수집 기간 = 204.8 석사; 대역폭 = 10000 Hz; 유지 시간 = 50 μ s).
5. T2 Star_FID_EPI 시퀀스 시작 (테 = 16.096 석사; TR = 500 석사; 평균 = 1; 반복 = 600; 슬라이스 = 1 밀리미터; 4 연속 조각; 이미지 크기 = 128 x 128; FOV = 20 x 20 m m; 대역폭 = 333,333.3 Hz; 스캔 시간 = 5 분 00 s).
   참고: 때문에 TTL 포트는 외부 트리거 신호 동시에 어 퍼프 시스템을 시작 합니다. 패러다임 [20 s 활성화 + 10 s 나머지] = 600 스캔, 스캔 당 500 ms의 전체 기간에 대 한 x 10. 슬라이스는 배럴 필드 지역의 중간에 중심으로.
6. 첫 번째 비교 및 쥐 T2_Star_FID_EPI 시퀀스 동안 이동 했습니다 여부를 확인 (1에서 설명한 단계 5.3 동일) 다른 지역화 시퀀스를 취득 합니다.
7. 침대를 초기 위치로 가져, 볼륨 배열 코일을 제거 하 고 표면 코일을 연결.

6. 굵게 처리

1. T2 Star_FID_EPI 파일을 열고 읽기 이미지 디스플레이에서 T2 Star_FID_EPI 이미지. FunController라는 기능 컨트롤러의 시작 창을 엽니다.
2. 이 처리 탭에서 선택 기능 영상 창 고 자극 프로토콜 정의 (기간 및 에교체 /오프 기간에 해당 하는 패러다임 사용).
3. 프로토콜 창 (600 프레임 데이터 집합)을 선택 하 고 기간에 탭 및 기간에서 탭 반전 속성 탭에서 클릭에에서 20에서 40의 값을 삽입 하 고 자극 상태 슬라이더를 드래그 선택 하 여 값 1.
4. 전처리 창에서 클릭 평면에서 중간값 필터 전처리 후 처리에 대 한 중간값 필터 (2D, 3D) 에.
5. 실행 탭에서 클릭 하 고 오버레이 체계표를 조정 하려면 커서를 끕니다. 활성화 된 뇌 영역 (그림 4B) 시각화.

7. 양성자 부인 인수

1. 올바르게 위치 표면 코일, 쥐 머리의 위치를 수정 합니다. 표면 코일 (그림 5A) 자석 내에 있을 때 자석 센터에 수평 한 위치 하면서 왼쪽된 배럴 피 질 바로 위에 놓일 수 있다 그래야 (약 30 ° 시계 방향으로) 머리를 회전 합니다.
2. 표면 코일을 배치 (그림 5B), 테이프를 사용 하 여 쥐 두뇌에 그것을 수정 하 고 확인 (anteroposterior 운동, 회전 안 및 항해의 아무 마찰) 항해를 올바르게 이동 때에 어 퍼프 시스템은 에; 그런 다음 전환 그것은 메인 스위치에.
3. 일단 침대는 자석 내부 에 어 퍼프 시스템 켜져있을 때 항해를 올바르게 이동 확인 하십시오. 다음, 그것을 떨어져스위치.
4. 쥐 잘못 지역화 시퀀스를 사용 하 여 배치 됩니다 확인 하십시오. 매개 변수를 다음과 같이 설정: 테 = 2.5 ms; TR = 100 ms; 평균 = 1; 반복 = 1; 슬라이스 = 1 밀리미터; 이미지 크기 256 x 256; = FOV = 50 x 50 mm; 스캔 시간 = 12 s 800 ms.
   1. 명령 이름 창에 지역화 시퀀스 탭을 끌어서 스캔 프로그램 실행을 계속 탭을 클릭 하십시오.
5. 두뇌 지역화 올바른지 때 T2_TurboRARE 시퀀스 탭 명령 이름 창에서 끌어서 계속 스캔 프로그램을 실행을 클릭 하십시오. 이전 대담한 fMRI 인수 함께 이러한 해부학 적 이미지는 S1BF에 부인에 대 한 올바른 지역화는 복의 수 있게 됩니다.
   참고: T2_TurboRARE 매개 변수는 14 조각, 조각, 시야 당 2 m m 2.5 x 2.5 cm, 테 = 100 ms, TR = 5000 ms = 매트릭스 = 128 x 128, 시퀀스 시간 = 2 분 40 s.
6. 명령 이름 창에 레이저 시퀀스 탭 끌어, S1BF 영역의 중앙에 복 (높이 2 m m, 2.5 m m 긴, 3 밀리미터 깊은) 장소.
   1. 쥐 뇌 아틀라스와 대담한 fMRI 향상에 사용 하 여 t 2 이미지 (그림 6)에 영역을 지역화. 조정 플랫폼 탭 편집된 검색 명령 열을 클릭 합니다. 동요 탭에서 클릭 하 고 그것을 조정 하는 약간 수신 코일의 임피던스 (전자 로드) 변경. 적용 탭에서 클릭 튜닝이 끝나면 명령 편집기를 닫고 편집된 명령에 변경 내용을 적용 합니다.
7. B₀ 지도 기록 하 고 심 검사 하 고, 다음, 로컬 심 수행을 진행.
   참고: B₀ 지도 사용 하 여 다음 매개 변수: 첫 번째 에코 시간 = 1.65 ms; TR = 20 밀리초, 평균 = 1; 각도 대칭 = 30 °; 에코 간격 = 3.805 석사; 조각 = 58 m m; 이미지 크기 = 64 x 64 x 64; FOV = 58 x 58 x 58 mm; 스캔 시간 = 1 m 24의 920 양 스캔 shim에 대 한 다음 매개 변수 사용: 선택적 여기 복 증기 가우시안 펄스; 테 = 5 석사; 혼합 시간 = 10 ms; 수집 기간 = 204.8 석사; 대역폭 = 10000 Hz; 유지 시간 = 50 μ. 로컬 심에 대 한 다음 매개 변수를 사용 하 여: 억제 물, 증기 수집 기간 = 1,363.15 석사; 포인트 4 096; = hz에서 대역폭 = 3,004.81 Hz; ppm에서 대역폭 = 10 ppm; 유지 시간 = 166.40 μ s; 스펙트럼 분해능 = 0.37 Hz/포인트. 레이저 매개 변수는: 에코 시간 = 19.26 석사; TR = 2500 ms; 평균 = 128 또는 32; 스캔 시간 = 5 분 20 초 또는 1 분 20 s; 획득 포인트 = 4 096.
8. ¹H-부인 수행 합니다.
   1. ¹먼저 휴식 기간 동안 H 부인 수집 시작 (4 x 32 레이저 스캔 + 128 레이저 검사; 당 2500 ms 검색).
   2. 첫 번째 기록으로 비교 하는 레이저 중 쥐가 이동 하지 않도록 다른 지역화 시퀀스 (1에서 설명한 단계 5.3 동일)를 취득.
   3. ¹H-부인 수염 활성화 레이저 시퀀스를 사용 하 여 수행 (4 x 32 레이저 스캔 + 128 레이저 검사; 당 2500 ms 스캔) 에 어 퍼프 시스템 (패러다임 = 20의의 활성화 및 10의 나머지 s).
   4. 다시 한번, 쥐 이동 했습니다 여부를 확인 하려면 지역화 시퀀스를 수행 합니다.
      참고: 검색 및 휴식/활성화 기간 수 적응 및 수정할 수, 하지만 항상 쥐는 지역화 시퀀스를 정기적으로 수행 하 여 이동 하지.
9. 침대를 초기 위치로 가져, 표면 코일을 쥐 다시 벤치에. 마 취과 그것을 각 성 쥐의 뒷면에 피부 겹으로 atipamezole를 주사.

8. 양성자 부인 처리

1. LCModel 소프트웨어를 열고 올바른 데이터 형식 ( 무료 유도 부패 파일)을 선택 하 고 오른쪽 파일을 적절 한 탭을 클릭 합니다. 이 완료 되 면 확인 탭을 클릭 합니다.
2. 단계별로 정량화 제어 매개 변수를 최적화 합니다.
   1. 제목 섹션에서 수동으로 제목을 입력 하 고 각 분야에서 필요한 값을 수동으로 입력 하 여 적절 한 ppm 범위 (예를 들어, 4.0에 0.2 ppm)를 정의 합니다.
   2. 기초 파일 섹션에서 선택 하 고 올바르게 고분자 기준선에 맞게 필요한 파일 다운로드 (그것은 소프트웨어 공급자에 의해 제공 수).
   3. 정의 하 고 입력된 컨트롤 매개 변수를 로드 합니다. 저장을 준비 모든 유용한 파일 형식의 사전 프로세스 (테이블 = 소형 테이블; 추 신 = 필요한 포스트 스크립트 출력; CSV 형식은 스프레드시트; = COORD 플롯에 대 한 좌표 =). RunLCModel 탭 LCModel 정량화를 시작을 클릭 합니다.
3. 통계를 생성 하기 위해 선택 된 대사 산물을 정의 합니다.
   참고: LCModel 대사 산물 정량화 하며, 크래머-라오 하 한 (CRLB) 라고 하는 값으로 오류를 추정. 값은 CRLB < 15은 최적의 정량화로 간주 됩니다. CRLB > 25는 신뢰할 수 없는 값을 나타냅니다.

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결과

이 의정서는 자석에 직접 오른쪽 수염 자극 하 여 대뇌 활성화 중 변동 대사 산물의 정량화를 허용 한다.

이 연구에서 대담한 fMRI의 전반적인 목표 수염 자극 활성화 S1BF 영역을 시각화 하 고 올바르게 ¹H-fMRS에 대 한 복을 찾아 효율적 이었다고 확인 했다. 수염 활성화를 위한 내장 장치가 효율적입니다. 사실, 바로 수염 ...

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토론

Somatosensory 피 질 또는 배럴 필드에 대 한 S1BF 라고도 신 피 질은 대뇌 피 질의 레이어 얼룩⁹, 시 토 크롬 c 산화 효소를 사용 하 여 관찰 될 수 있다 4 내 영역 그리고 조직을 잘 알려져 크게 설명된 ^{이후로 10,11}. 한 vibrissa 열¹²약 19000 뉴런 구성 됩니다 한 배럴에 연결 된다. 수염-신 피 질 통로 몇 가지 장점이 있습니다. 첫?...

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자료

Name	Company	Catalog Number	Comments
0.5 mL syringe with needle	Becton, Dickinson and Company, USA	2020-10	0.33 mm (29 G) x 12.7 mm
1H spectroscopy surface coil	Bruker, Ettlingen, Germany	T116344
7T Bruker Biospec system	Bruker, Ettlingen, Germany	70/20 USR
Arduino Uno based pulsing device	custom made
Atipamezole	Vétoquinol, S.A., France	V8335602	Antisedan, 4.28 mg
Breathing mask	custom made
Eye ointment	TVM laboratoire, France	40365	Ocry gel 10 g
Induction chamber	custom made		30x17x15 cm
Inlet flexible pipe	Gardena, Germany	1348-20	4.6-mm diameter, 3m long
Isoflurane pump, Model 100 series vaporizer, classic T3	Surgivet, Harvard Apparatus	WWV90TT	from OH 43017, U.S.A
Isoflurane, liquid for inhalation	Vertflurane, Virbac, France	QN01AB06	1000 mg/mL
KD Scientific syringe pump	KD sientific, Holliston, USA	Legato 110
LCModel software	LCModel Inc., Ontario, Canada	6.2
Medetomidine hydrochloride	Vétoquinol, S.A., France	QN05CM91	Domitor, 1 mg/mL
Micropore roll of adhesive plaster	3M micropore, Minnesota, United States	MI912
Micropore roll of adhesive plaster	3M micropore, Minnesota, United States	MI925
Monitoring system of physiologic parameter	SA Instruments, Inc, Stony Brook, NY, USA	Model 1025
NaCl	Fresenius Kabi, Germany	B05XA03	0.9 % 250 mL
Outlet flexible pipe	Gardena, Germany	1348-20	4.6-mm diameter, 4m long
Paravision software	Bruker, Ettlingen, Germany	6.0.1
Peripheral intravenous catheter	Terumo, Shibuya, Tokyo, Japon	SP500930S	22 G x 1", 0.85x25 mm, 35 mL/min
Rat head coil	Bruker, Ettlingen, Germany
Sodic heparin, injectable solution	Choai, Sanofi, Paris, France	B01AB01	5000 IU/mL
Solenoid control valves, plunger valve 2/2 way direct-acting	Burkert, Germany	3099939	Model type 6013
Terumo 2 ml syringe	Terumo, Shibuya, Tokyo, Japon	SY243	with 21 g x 5/8" needle
Terumo 5 mL syringe	Terumo, Shibuya, Tokyo, Japon	05SE1
Wistar RJ-Han rats	Janvier Laboratories, France