Diese Arbeit wurde von der American Diabetes Association (ADA), Grant JF1-10-14 (MDiF) gefördert. Wir möchten das Personal des Labors für Tier-Ressourcen an der WSU danken. Autoren danken für die Unterstützung bei der statistischen Analyse der Daten von Neil Paton, Ph.D.

TNTs von Mäusen und Ratten werden durch Verwendung bestimmt das inkrementelle Hot-Plate-Analgesie Meter [iHPAM, IITC Life Science Inc. (Woodland Hills, CA)]. Die Ausrüstung besteht aus mehreren Komponenten: eine Aluminium-Platte (10 x 20 cm) mit der Heizung und unter einer Plexiglas-Kammer über Beobachtung, ein Wärme-Steuereinheit, Software zur Datenerfassung (IITC Part # Soft-Series 8), ein PC (Personal Computer) und einem Fußschalter für Remote Start, Stop oder Reset-Steuerung des Gerätes. Die Heizung ermöglicht auch Start / Stopp / Rücksetzen des Heizprozesses manuell über eine Tastatur vor der Ausrüstung. Die iHPAM kann zu verschiedenen Heizraten, Standby / Ecktemperaturen eingestellt werden. 1. Ausstattung Set-up <ol><li> Vor der Prüfung Tiere, das Gerät optisch untersuchen zu erhärten die gewählten Heizraten (z. B. 6 ° C / min), ursprünglichen Standby-und Final Cut-Off-Temperaturen (z. B. 28 ° C und 55 ° C, jeweils). </li><li> Überprüfen Sie alle Verbindungen. Um elektronische Kopie der Ergebnisse zu halten, muss das Gerät an einen Computer mit Software Series 8 angeschlossen werden. Alternativ können Ausdrucke der Ergebnisse erfolgt über die serielle Schnittstelle des Gerätes ausgedruckt werden. </li><li> Testen Sie das Telefon. Drücken Sie den Fußschalter einmal sicherstellen, dass die Software Series 8 zeichnet die Daten: Standby ersten, letzten Ecktemperaturen und Zeit in Sekunden erforderlich, um den Cut-Off-Temperatur zu erreichen. </li><li> Als eine weitere Kontrolle Test können die Forscher bei den Experimenten beteiligt brauchen, um das Gerät selbst zu erfahren. Zurückziehen der Hand von der Metallplatte im Moment der Schmerzwahrnehmung (46-48 ° C) darf weder schaden der Haut oder zur Erzeugung von beliebigen späteren Beschwerden. </li><li> Sobald das Gerät eingestellt wurde und die Ergebnisse aus den Schritten 1.3 und 1.4 erfasst sie verglichen werden können. Dies ist hilfreich, um mögliche Probleme, die die Verwendung des Geräts ungültig erkennen konnte. Zum Beispiel, Diskrepanzen zwischen anfänglichen Standby / Final Cut-off-Tempeturen und die eigentliche Lesung des Gerätes und / oder Unterschiede zwischen den Temperaturen von der Einheit und der tatsächlichen Temperatur der Platte für Hand Rückzug erforderlich angezeigt. </li></ol> 2. Testen normalen Tieren Entweder junge oder erwachsene Wistar-Ratten [postnatale (p) Alter 21-25 Tage], oder Mäusen (p21-25) von einem genetischen Hintergrund oder Geschlecht genutzt werden kann. Die Mäuse in unseren Experimenten verwendet werden, der Stamm C57BL/6J. <ol><li> In der Nacht zuvor die Experimente durchgeführt werden, die Tiere zu gewöhnen, indem man ihren Käfigen auf der Bank, wo die iHPAM platziert wird. Zwei Stunden vor Durchführung der Tests, auf dem iHPAM drehen, die Tiere mit der Geräuschkulisse des Gerätes vertraut zu machen. An diesem Punkt kann der iHPAM eingerichtet und getestet, um eine ordnungsgemäße Funktion zu überprüfen (siehe Schritt 1). Lebensmittel und Wasser ad libitum während der gesamten Prüfung zur Verfügung gestellt, außer wenn das Tier in der Beobachtung Kammer (siehe Schritt 2.1). Hinweis: Es ist important nicht anzunehmen, dass die Laborbedingungen in Verhaltensexperimente standardmäßig kontrolliert werden. Besondere Aufmerksamkeit sollte der genetischen und umweltbedingten Faktoren, die das Ergebnis der Verhaltensforschung (Übersicht in 7) beeinflussen können, bezahlt werden. </li><li> Vorsichtig einen normalen Maus / Ratte in den Plexiglas-Kammer Beobachtung auf der Oberseite der Heizplatte des Gerätes. Lassen Sie das Tier auf der erwärmten Oberfläche (eingestellt auf 28 ° C) zu akklimatisieren, bis das Tier zeigt eine komfortable Verhalten. Hinweis: Unter diesen Bedingungen normalen erwachsenen Ratten zeigen einen ersten explorativen Verhalten, gelegentlich im Stehen auf den Deckel der Kammer während der Beobachtung Sniffing. Nach ein paar Minuten, kann Ratten zeigen lässig Anfälle von Grooming und ein entspanntes Verhalten. Manchmal lagen Ratten mit einer entspannten Körperhaltung (anfällig Verlängerung), während nebenbei schnüffelt die Umgebung. Normale Mäuse sind in der Regel aktiver als Ratten. Allerdings zeigen Mäuse eine entspannte Erkundungsverhalten nach wenigen Minuten in die Beobachtung Kammer. Es ist außerordentlich selten, um entweder zu entkommen Verhaltensweisen (zB Springen, versuchen, aus der Beobachtung Kammer zu entkommen) oder defensive Haltung (zB Quietschen) zu beobachten. Es ist auch wichtig zu beachten, dass Mäuse, können die Schmerzen von einer Maus zu einer anderen 8 zu kommunizieren. Daher kann es wichtig sein, Versuchsmäuse in getrennten Käfigen. </li><li> Ort spiegelt in der Rückseite der Kammer Beobachtung, um Beobachtungen aus allen Winkeln zu ermöglichen. Ein Stativ im Besitz einer digitalen Videokamera kann hilfreich sein, den genauen Zeitpunkt, an dem nozifensiven (Schmerzen zu vermeiden) Verhalten eingetreten zu bestimmen. </li><li> Sobald das Tier ist bequem in der Beobachtung Kammer erwärmen sich die Platte durch Drücken der Fußschalter. Wenn die Temperatur der Platte heizt mit einer Rate von 6 ° C / Minute, zeigen normale Tiere nozifensiven Verhalten mit entweder Hinterbeine Pfote * in der Regel Temperaturen tobenden 46 bis 48 ° C 3,5,9,10. Somit ist das Tier entfernt typischen Form der beobachtbarenation Kammer nach ca. 3 Minuten. Hinweis: Die Beachtung der typischen nozifensiven Reaktion einer Ratte oder Maus dh Hinterbeine Pfote leckt, unter Schütteln und / oder Heben, genügt, um den thermischen Reiz zu kündigen. Dies geschieht durch Drücken des Fußschalters erreicht. In diesem Moment nimmt die Software die Platte die Temperatur und die Platte sofort abkühlt, bis Standby-Temperatur (28 ° C) erreicht ist (~ 0,5 min). Diese Temperatur bedeutet, die auf das jeder nozifensiven Reaktion hervorruft als schädliche dem Schwellwert (TNT) der normalen (Kontrolle) Tieres. * Manchmal, vor allem bei Mäusen, kann nozifensiven Verhalten auf schädliche Temperatur zuerst in einer beobachtet werden oder beide Vorderpfoten (zB Lecken im Sitzen), wenige Sekunden vor Hinterpfoten. Allerdings ist Vorderpfote leckte ein normaler Bestandteil des Putzverhalten. Daher werden nur Hinterbeine Pfote Reaktionen beurteilt. In Gelegenheiten Mäuse können putzen ihre Hinterpfoten ebenso. Allerdings tun normalen Grooming not zuletzt mehr als ein paar Sekunden, nicht um intensive Lecken und endet in der Regel nach der Reinigung seine Krallen. </li><li> Entfernen Sie vorsichtig das Tier von der Platte und legen Sie sie in ihrer jeweiligen Käfig. Die Wärme Schwellenwertmesseinheit wird dann für andere Steuerelement (normal) tierischen wiederholt. Hinweis: TNTs bei einem Tier in Intervallen von 1-2 Minuten, ohne das Tier aus der Beobachtungskammer bestimmt werden. TNT Bestimmungen an Ratten oder Mäusen kann mehrere Male während mehreren Tagen wiederholt werden. Dies ist besonders nützlich, um die mittlere TNT eines einzelnen Tieres sowie seine Variation mit dem Alter zu bestimmen. </li><li> Die TNT Kontrolltieren wird als Mittelwert von drei oder mehr Schwellenwerte ± SEM ausgedrückt. </li><li> Die statistische Analyse der gewonnenen Daten wird durchgeführt, um eine unterschiedliche Behandlung Gruppen von Mäusen oder Ratten zu vergleichen. Parametrische Verfahren einschließlich Analysis of Variance kann in geeigneter Weise eingesetzt werden, wo Daten normal verteilt sind und wo Behandlungsgruppen sind Homoskedastic, wenn diese Bedingungen erfüllt wurden folgende Ansätze angewendet werden können. Analyse der Varianz durch den Newman-Keuls-Test, um Unterschiede in mehrere Messungen bedeutet, wiederholt einzelne TNTs mit / ohne Behandlung oder zu verschiedenen Zeitpunkten (zB Daten in 3) zu erfassen, gefolgt. Die gepaarten Student-t-Test verwendet werden, um zwei Datengruppen bedeutet, TNTs vor vs vergleiche nach der Arzneimittelbehandlung werden, die ungepaarten t-Test verwendet werden, um Unterschiede in TNT Veränderungen zu bestimmen vs Vehikel behandelten Tieren Medikament behandelt (z. B. Daten, die in Abbildung 4). </li></ol> 3. Testen diabetischen Tieren Die Streptozotocin (STZ)-induzierten diabetischen Ratte ist das am häufigsten verwendete Tiermodell, um die Mechanismen der PDN zu untersuchen und Analgetika und Therapien 11,12 beurteilen. Diabetisch gemachten Ratten, von einer einzigen intraperitonealen Dosis von STZ (60 mg / kg) kann be für thermische Hyperalgesie während des 3. Woche nach dem Ausbruch von Diabetes 11 getestet. Es ist wichtig zu beachten, dass nicht alle diabetischen Ratten PDN zu entwickeln. Allerdings können Tiere, die Hyperalgesie (~ 50%) entwickeln kann leicht identifiziert werden. Tatsächlich sind ihre TNTs niedriger als normal *. * Um TNTs von STZ-diabetischen Ratten zu bestimmen, ein Ausgangspunkt Platte Temperatur von 15 ° C statt 28 ° C verwendet wird. Der Grund für diese Änderung ist, dass die meisten diabetischen Tieren mit PDN wird erwartet, dass hyperalgetische 2,11 sein. Deshalb werden sie haben weniger als normale schädliche Hitze Schwellenwerte (zB &lt;45 ° C). <ol><li> Ein diabetischen Ratte wird in der jeweiligen Kammer auf der Oberseite der Prüfvorrichtung verwendet wird. Das Tier erlaubt ist, zu der Plattenoberfläche akklimatisieren, bis das Tier eine komfortable Verhalten. Hinweis: Typischerweise wird eine diabetische Ratten zeigen nicht viel von dem normalen Verhalten. Diabetischen Ratten sind in der Regel hypoactive, lethargisch; oft zeigeneingeschränkten Bewegungen und langsamen Pflege. Es ist selten, Tabellenführer gegen den Deckel der Kammer Beobachtung zu beobachten. Nach wenigen Minuten kann diabetischen Ratten ruhig in einer Ecke der Kammer bleiben mit Casual Schnüffeln auf die Umgebung. </li><li> Sobald der diabetischen Tieren ist bequem in der Beobachtung Kammer wird die Platte wie in Schritt 2.3 der diabetischen Ratte nozifensiven Verhalten entweder mit Hinterbein / Vorderpfote aufweisen kann erwärmt werden. Dies geschieht meist bei nicht-schädliche Platte Temperaturen (zB &lt;45 ° C), oder spätestens nach 5 Minuten in der Kammer mit dem 6 ° C / min Temperaturanstieg. Hinweis: Die nozifensiven Reaktion eines jungen Erwachsenen diabetischen Ratte nicht von der einer normalen Ratte unterscheiden. Jedoch ist die niedrigste Temperatur hervorzurufen solches Verhalten deutlich gesenkt. </li><li> Siehe Schritt 2.4 </li><li> Der Mittelwert der mehr als drei Schwellen in der Tag des Experiments, ausgedrückt in ° C ± SEM wird als schädliche Hitze Schwelle des diabetic Tier. Hinweis: Ein ähnliches Paradigma zu dem einen erklärt, für den normalen oder diabetischen Ratten kann gefolgt, um die thermische anti-nozifensiven Wirkung von Schmerzmitteln bei der Wärme-Schwellenwerte zu bestimmen. </li></ol> 4. Testen Analgesie Die antinozizeptive Eigenschaften von Arzneimitteln (zB Analgetika) sowie die Bestimmung der pharmakologischen Parameter wie die minimale wirksame Dosis kann leicht durch Verwendung der oben erläuterten Schritte erhalten werden. Es wird prognostiziert, dass geeignete Dosen eines Schmerzmittels verabreicht, um die Ratten / Mäusen deutlich erhöht würde ihre TNTs. Dies ist besonders empfindlich bei Tieren mit thermischer Hyperalgesie 3. Jedoch von Verzerrungen bei der Interpretation der Ergebnisse zu vermeiden, müssen die Ermittler in der Verhaltensbeobachtung eines Tieres Gruppe beteiligt oder nicht, bewusst sein, wenn die Tiere behandelt worden waren oder nicht. Ferner können Arzneimittel, die von dem Beobachter injiziert werden von einem anderen Ermittler hergestellt werden und gekennzeichnetA, B, C, etc. Dosierung in einem Ausdruck bereitgestellt, Einzeldosen pro Eintrag identifizierte Tier. Je nach der Droge getestet, kann verschiedene Dosen eines potentiellen Analgetikum zur normalen oder diabetischen Tieren 5-15 min vor Verhaltenstests verabreicht werden. Entsprechenden Kontrollen einzubeziehen (dh im Alter passende Fahrzeug mit Tieren injiziert, allein und / oder diabetischen Ratten ohne PDN) und getestet werden unter Verwendung von identischen Bedingungen (zB gleiche Starttemperatur der Platte). Chronische Wirkungen von Drogen kann ebenso getestet werden. 5. Repräsentative Ergebnisse Die niedrigste Temperatur der Platte hervorzurufen nozifensiven Reaktionen in beiden Hinterbeine Pfote von jungen erwachsenen normalen nicht-behandelten Ratten oder Mäusen bestimmt wurden folgende Schritte 2-1 bis 2-6. Wie in Abbildung 1, TNT von normalen jungen erwachsenen Ratten und Mäusen gezeigt, waren 47,2 ± 0,2 ° C und 47,5 ± 0,5 ° C sind. Wir haben Observed weder signifikante Tagesverlauf der individuellen TNTs (Abbildung 2A), noch wesentliche Änderungen von TNTs zwischen den Individuen des gleichen Alters (Abbildung 2B). TNT Unterschiede bezüglich Geschlecht wurden nicht beobachtet (nicht gezeigt). TNTs von jungen erwachsenen STZ-diabetischen Ratten wurden in einer ähnlichen Weise wie bei normalen Ratten (Schritte 3.1 bis 3.3) bestimmt. Allerdings fiel der Startschuss Platte die Temperatur auf 15 ° C statt 28 ° C. Die nozifensiven Verhalten STZ-diabetischen Ratten wurde mindestens dreimal in einem Individuum und in einer täglichen Mode Startelf Tage nach der Injektion STZ bewertet. Wie in Abbildung 3, ein deutlicher Rückgang (p &lt;0,01) in den TNT von STZ-diabetischen Ratten gezeigt wird deutlich, zwei Wochen nach der STZ Injektion. Die mittlere TNT von STZ-diabetischen Ratten war 45,6 ± 0,1 ° C (n = 16, gepoolten Werte von 14 bis 23 Tage). Diabetischen Ratten zeigen signifikant niedrigere TNT als Normal wurden als PDN haben. Diese Ratten wurden verwendet, um die akute antinozizeptive Eigenschaften eines Analgetikums (Verbindung A) zu testen. TNTs wurden in normalen und diabetischen Ratten entweder mit einer einzelnen Dosis der Verbindung oder Vehikel allein fünf Minuten vor dem Test injiziert bestimmt. Wie in 4 gezeigt, eine einzelne intraperitoneale Dosis der Verbindung deutlich TNTs von diabetischen Ratten erhöht, wenn die Ratten mit Vehikel allein (45,6 ° C 47,6 ° C vs, jeweils) behandelt wurden. Die Anti-nozifensiven Wirkung der Verbindung A wurde auch in normalen Ratten beobachtet, obwohl signifikant (p &lt;0,01), es war weniger ausgeprägt (47,4 ° C vs 48,0 ° C, jeweils). <img alt="1" src="/files/ftp_upload/3785/3785fig1.jpg" /> Abbildung 1. Bestimmung von TNTs der normalen jungen erwachsenen Ratten oder Mäuse: Die TNTs von jungen erwachsenen Ratten (P21-24) oder Mäusen (p20-21) wurden in der folgenden getesteten iHPAM die beschriebenen Schritte above. Insgesamt 12 Ratten und 25 Mäuse wurden getestet. Die Messungen wurden mehrere Tage lang durchgeführt und die Ergebnisse wurden gepoolt. Die Ergebnisse sind als Mittelwert ± SEM ausgedrückt. Die minimale und maximale Werte TNT bei diesen Ratten aufgezeichnet waren 46,2 ° C und 48,6 ° C bzw.. Bei Mäusen waren die maximalen und minimalen Werte aufzuzeichnen TNT 48,8 ° C und 44,9 ° C eingestellt. <img alt="2" src="/files/ftp_upload/3785/3785fig2.jpg" /> Abbildung 2. Altersabhängigkeit von TNTs bei Ratten und Mäusen: A) Dargestellt sind die TNTs von vier normalen Ratten (n = 4) von 21 Tagen nach Alter bestimmt mindestens dreimal täglich während 5 Tagen B) TNTs von Mäusen Wurfgeschwister einmal angegeben bestimmt. Altersgruppen. Die Zahlen auf jeder Bestimmung Punkt stellt die Anzahl der Wurfgeschwister verwendet. <img alt="Abbildung 3" src="/files/ftp_upload/3785/3785fig3.jpg" /> Abbildung 3. Diabetischen Ratten geworden hyperalgetische 3 haben wireks nach dem Auftreten von Diabetes: TNTs von sechs (n = 6) altersangepassten jungen Erwachsenen STZ-diabetischen Ratten bestimmt täglich ab 11 Tage nach der Induktion von Diabetes. Gezeigt werden täglich TNT Durchschnitte (Mittelwert ± SEM). Diabetische TNTs zwischen 11-13 Tage nach der Injektion bestimmt STZ waren im normalen Bereich (rote Linie). Zwei Wochen nach STZ Injektion TNTs deutlich zurückgegangen auf 45,1 ± 0,4 ° C, (p &lt;0,05). <img alt="Abbildung 4" src="/files/ftp_upload/3785/3785fig4.jpg" /> Abbildung 4. Akute Anti-nozifensiven Auswirkungen der Verbindung B in STZ-diabetischen Ratten. Young adult normalen Ratten (blaue Gruppe n = 12) und dem Alter angepasst STZ-diabetischen Ratten Hyperalgesie (grüne Gruppe n = 6) in der iHPAM wurden nach intraperitonealer Injektion von Fahrzeug getestet (dunkle Balken) oder Verbindung A (helle Balken). Die mittlere TNT ± SEM für jede Behandlung (Fahrzeugsteuerung oder Verbindung A-behandelten) dargestellt. Sternchen gekennzeichnet statistischen Unterschiede(P &lt;0,05).

<ol>
	<li>Baron, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peripheral+neuropathic+pain:+From+mechanisms+to+symptoms.">Peripheral neuropathic pain: From mechanisms to symptoms.</a> Clin. J. Pain. 16, S12-S20 (2000).</li><li>Calcutt, N. A., Jorge, M. C., Yaksh, T. L., Chaplan, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tactile+allodynia+and+formalin+hyperalgesia+in+streptozotocin-diabetic+rats:+Effects+of+insulin,+aldose+reductase+inhibition+and+lidocaine.">Tactile allodynia and formalin hyperalgesia in streptozotocin-diabetic rats: Effects of insulin, aldose reductase inhibition and lidocaine.</a> Pain. 68, 293-299 (1996).</li><li>Bolcskei, K., Petho, G., Szolcsanyi, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noxious+heat+threshold+measured+with+slowly+increasing+temperatures:+Novel+rat+thermal+hyperalgesia+models.">Noxious heat threshold measured with slowly increasing temperatures: Novel rat thermal hyperalgesia models.</a> Methods Mol. Biol. 617, 57-66 (2010).</li><li>Ankier, S. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+hot+plate+tests+to+quantify+antinociceptive+and+narcotic+antagonist+activities.">New hot plate tests to quantify antinociceptive and narcotic antagonist activities.</a> Eur. J. Pharmacol. 27, 1-4 (1974).</li><li>Almasi, R., Petho, G., Bolcskei, K., Szolcsanyi, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+resiniferatoxin+on+the+noxious+heat+threshold+temperature+in+the+rat:+A+novel+heat+allodynia+model+sensitive+to+analgesics.">Effect of resiniferatoxin on the noxious heat threshold temperature in the rat: A novel heat allodynia model sensitive to analgesics.</a> Br. J. Pharmacol. 139, 49-58 (2003).</li><li>Bolcskei, K., Horvath, D., Szolcsanyi, J., Petho, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heat+injury-induced+drop+of+the+noxious+heat+threshold+measured+with+an+increasing-temperature+water+bath:+A+novel+rat+thermal+hyperalgesia+model.">Heat injury-induced drop of the noxious heat threshold measured with an increasing-temperature water bath: A novel rat thermal hyperalgesia model.</a> Eur. J. Pharmacol. 564, 80-87 (2007).</li><li>Chesler, E. J., Wilson, S. G., Lariviere, W. R., Rodriguez-Zas, S. L., Mogil, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+and+ranking+of+genetic+and+laboratory+environment+factors+influencing+a+behavioral+trait,+thermal+nociception,+via+computational+analysis+of+a+large+data+archive.">Identification and ranking of genetic and laboratory environment factors influencing a behavioral trait, thermal nociception, via computational analysis of a large data archive.</a> Neurosci. Biobehav. Rev. 26, 907-923 (2002).</li><li>Langford, D. J., Crager, S. E., Shehzad, Z., Smith, S. B., Sotocinal, S. G., Levenstadt, J. S., Chanda, M. L., Levitin, D. J., Mogil, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Social+modulation+of+pain+as+evidence+for+empathy+in+mice.">Social modulation of pain as evidence for empathy in mice.</a> Science. 312, 1967-1970 (2006).</li><li>Hunt, S. P., Koltzenburg, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The neurobiology of pain. , (2005).</li><li>Willis, W. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The pain system : The neural basis of nociceptive transmission in the mammalian nervous system. , (1985).</li><li>Calcutt, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Modeling diabetic sensory neuropathy in rats. In: Methods in molecular medicine. Pain research: Methods and protocols. , (2004).</li><li>Bars, D. L. e., Gozariu, M., Cadden, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+nociception.">Animal models of nociception.</a> Pharmacol. Rev. 53, 597-652 (2001).</li><li>Shaikh, A. S., Somani, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+and+biomarkers+of+neuropathy+in+diabetic+rodents.">Animal models and biomarkers of neuropathy in diabetic rodents.</a> Indian J. Pharmacol. 42, 129-134 (2010).</li><li>Hargreaves, K., Dubner, R., Brown, F., Flores, C., Joris, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+and+sensitive+method+for+measuring+thermal+nociception+in+cutaneous+hyperalgesia.">A new and sensitive method for measuring thermal nociception in cutaneous hyperalgesia.</a> Pain. 32, 77-88 (1988).</li><li>Hardy, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Method+for+the+rapid+measurement+of+skin+temperature+during+exposure+to+intense+thermal+radiation.">Method for the rapid measurement of skin temperature during exposure to intense thermal radiation.</a> J. Appl. Physiol. 5, 559-566 (1953).</li><li>Sumino, R., Dubner, R., Starkman, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Responses+of+small+myelinated+&amp;quot;warm&amp;quot;+fibers+to+noxious+heat+stimuli+applied+to+the+monkey's+face.">Responses of small myelinated &amp;quot;warm&amp;quot; fibers to noxious heat stimuli applied to the monkey's face.</a> Brain Res. 62, 260-263 (1973).</li><li>Hammond, D. L., Ruda, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental+alterations+in+thermal+nociceptive+threshold+and+the+distribution+of+immunoreactive+calcitonin+gene-related+peptide+and+substance+p+after+neonatal+administration+of+capsaicin+in+the+rat.">Developmental alterations in thermal nociceptive threshold and the distribution of immunoreactive calcitonin gene-related peptide and substance p after neonatal administration of capsaicin in the rat.</a> Neurosci. Lett. 97, 57-62 (1989).</li></ol>

Wir haben beschlossen, nicht die Identität des Schmerzmittels in diesen Versuchen verwendeten offen zu legen. Ein Teil der hier gezeigten Ergebnisse wurde in der 71. Scientific Sessions der American Diabetes Association (San Diego, CA) und der 47. Jahrestagung der Europäischen Vereinigung zum Studium des Diabetes (Lissabon, Portugal) vorgestellt worden.

Ähnlich wie bei der klassischen Kochplatte Test auf thermische Hyperalgesie 4,13 quantifizieren, beschrieb der Test der Nozizeption hier erlaubt einen schnellen und zuverlässigen Weg, um nozifensiven Verhalten bei Ratten und Mäusen zu quantifizieren. Im Gegensatz zu klassischen Test, ist das inkrementelle Hot-Plate-Verfahren nicht-invasiv und praktisch stressfrei. Obwohl einige zurückhalten ist notwendig, um den Test durchzuführen (dh das Tier muss in der Beobachtung Kammer sein), werden Ratten ...

<table border="1"><tbody><tr><td> Name </td><td> Firma </td><td> Katalog-Nummer </td></tr><tr><td> Inkrementelle Hot-Plate Analgesie Meter </td><td> IITC Life Science Inc. </td><td> Part # PE34 </td></tr><tr><td> Soft-Serie 8 </td><td> IITC Life Science Inc. </td><td> Part # Series8 </td></tr><tr><td> Streptozotocin </td><td> Calbiochem </td><td> 572201 </td></tr></tbody></table>

rapid determination of the thermal nociceptive threshold in diabetic rats

Schmerzhafter diabetischer Neuropathie (PDN) wird von Hyperalgesie, dh, erhöhte Empfindlichkeit gegenüber schädlichen Reiz, und Allodynie dh Überempfindlichkeit gegen normalerweise harmlose Reize 1 gekennzeichnet. Hyperalgesie und Allodynie wurden in vielen verschiedenen Tiermodellen des Diabetes mellitus 2 untersucht worden. Jedoch wird, wie durch Bölcskei et al, Bestimmung der &quot;Schmerz&quot; in Tiermodellen festgestellt Herausforderung aufgrund seiner subjektiven Natur 3. Darüber hinaus sind die traditionellen Methoden verwendet werden, um Verhaltensreaktionen auf schädliche thermische Reize bestimmen in der Regel fehlt die Reproduzierbarkeit und Empfindlichkeit pharmakologische 3. Zum Beispiel, indem Sie die Hot-Plate-Verfahren von Ankier 4, zusammenzucken, ist Rückzug und / oder Lecken der beiden Hinterbeine und / oder Vorderpfoten als Reflex Latenzen bei einer konstanten hohen thermischen Reizen (52-55 ° C) quantifiziert. Jedoch keine Tiere, die Hyperalgesie auf thermische Reize sind nicht reproduzierbar zeigen Unterschiede in der Reflex Latenzen bei der Nutzung dieser supra-Schwelle Temperaturen 3,5. Wie der kürzlich beschriebenen Methode der Bölcskei et al. 6, können die hier beschriebenen Verfahren für die schnelle, empfindliche und reproduzierbare Bestimmung der thermischen nozizeptiven Grenzwerte (TNTs) bei Mäusen und Ratten. Das Verfahren verwendet langsam ansteigenden thermischen Stimulus meist auf die Haut der Maus / Ratte plantare Oberfläche aufgebracht. Das Verfahren ist besonders empfindlich gegen Anti-Nozizeption während hyperalgetische Staaten wie PDN zu studieren. Die beschriebenen Verfahren sind unten auf die, die im Detail von Almási et al 5 und Bölcskei et al 3 veröffentlicht wurde. Die hier beschriebenen Verfahren genehmigt worden sind die Versuchstierkunde Care und Use Committee (LACUC), Wright State University.

Watch this Scientific Journal Video about Rapid Determination of the Thermal Nociceptive Threshold in Diabetic Rats at JoVE.com

Rapid Determination of the Thermal Nociceptive Threshold in Diabetic Rats

Hier beschreiben wir eine schnelle zuverlässige und einfache Verfahren, um die niedrigste Temperatur, bei der Ratten oder Mäusen zeigen nozifensiven Verhalten bestimmen,<em&gt; Dh</em&gt; Die<em&gt; Thermische nozizeptive Schwelle</em&gt; (TNT). Diese Methode gilt eine langsam zunehmende thermische Reiz ermöglicht präzise und reproduzierbare Bestimmung von TNTs mit einem Minimum, wenn überhaupt, den Stress der Tiere.

Schnelle Bestimmung der Wärmeleistung und nozizeptiven Grenzwerts bei diabetischen Ratten

Painful diabetic neuropathy (PDN) is characterized by hyperalgesia i.e., increased sensitivity to noxious stimulus, and allodynia i.e., hypersensitivity ...

rapid-determination-thermal-nociceptive-threshold-diabetic

Research

JoVE Journal

Neuroscience

27.4K Aufrufe.  Wright State University. Hier beschreiben wir eine schnelle zuverlässige und einfache Verfahren, um die niedrigste Temperatur, bei der Ratten oder Mäusen zeigen nozifensiven Verhalten bestimmen, Dh Die Thermische nozizeptive Schwelle (TNT). Diese Methode gilt eine langsam zunehmende thermische Reiz ermöglicht präzise und reproduzierbare Bestimmung von TNTs mit einem Minimum, wenn überhaupt, den Stress der Tiere.

Serie: Rapid Determination of the Thermal Nociceptive Threshold in Diabetic Rats

A General Method for Evaluating Incubation of Sucrose Craving in Rats

For someone on a food-restricted diet, food craving in response to food-paired cues may serve as a key behavioral transition point between abstinence and relapse to food taking 1. Food craving conceptualized in this way is akin to drug craving in response to drug-paired cues. A rich literature has been developed around understanding the behavioral and neurobiological determinants of drug craving; we and others have been focusing recently on translating techniques from basic addiction research to better understand addiction-like behaviors related to food 2-4.
As done in previous studies of drug craving, we examine sucrose craving behavior by utilizing a rat model of relapse. In this model, rats self-administer either drug or food in sessions over several days. In a session, lever responding delivers the reward along with a tone+light stimulus. Craving behavior is then operationally defined as responding in a subsequent session where the reward is not available. Rats will reliably respond for the tone+light stimulus, likely due to its acquired conditioned reinforcing properties 5. This behavior is sometimes referred to as sucrose seeking or cue reactivity. In the present discussion we will use the term "sucrose craving" to subsume both of these constructs.
In the past decade, we have focused on how the length of time following reward self-administration influences reward craving. Interestingly, rats increase responding for the reward-paired cue over the course of several weeks of a period of forced-abstinence. This "incubation of craving" is observed in rats that have self-administered either food or drugs of abuse 4,6. This time-dependent increase in craving we have identified in the animal model may have great potential relevance to human drug and food addiction behaviors.
Here we present a protocol for assessing incubation of sucrose craving in rats. Variants of the procedure will be indicated where craving is assessed as responding for a discrete sucrose-paired cue following extinction of lever pressing within the sucrose self-administration context (Extinction without cues) or as responding for sucrose-paired cues in a general extinction context (Extinction with cues).

Responding for food or drug-paired cues increases over the course of a period of abstinence and this may relate to an increased susceptibility to relapse behaviors. Here we detail a procedure for evaluating this "incubation of craving" in rats that have self-administered sucrose.

Eine allgemeine Methode zur Bewertung der Inkubation von Saccharose Craving in Ratten

For someone on a food-restricted diet, food craving in response to food-paired cues may serve as a key behavioral transition point between abstinence and ...

Forschung

Neurowissenschaften

Local and Global Methods of Assessing Thermal Nociception in Drosophila Larvae

In this article, we demonstrate assays to study thermal nociception in Drosophila larvae. One assay involves spatially-restricted (local) stimulation of thermal nociceptors1,2 while the second involves a wholesale (global) activation of most or all such neurons3. Together, these techniques allow visualization and quantification of the behavioral functions of Drosophila nociceptive sensory neurons.
The Drosophila larva is an established model system to study thermal nociception, a sensory response to potentially harmful temperatures that is evolutionarily conserved across species1,2. The advantages of Drosophila for such studies are the relative simplicity of its nervous system and the sophistication of the genetic techniques that can be used to dissect the molecular basis of the underlying biology4-6 In Drosophila, as in all metazoans, the response to noxious thermal stimuli generally involves a "nocifensive" aversive withdrawal to the presented stimulus7. Such stimuli are detected through free nerve endings or nociceptors and the amplitude of the organismal response depends on the number of nociceptors receiving the noxious stimulus8. In Drosophila, it is the class IV dendritic arborization sensory neurons that detect noxious thermal and mechanical stimuli9 in addition to their recently discovered role as photoreceptors10. These neurons, which have been very well studied at the developmental level, arborize over the barrier epidermal sheet and make contacts with nearly all epidermal cells11,12. The single axon of each class IV neuron projects into the ventral nerve cord of the central nervous system11 where they may connect to second-order neurons that project to the brain.
Under baseline conditions, nociceptive sensory neurons will not fire until a relatively high threshold is reached. The assays described here allow the investigator to quantify baseline behavioral responses or, presumably, the sensitization that ensues following tissue damage. Each assay provokes distinct but related locomotory behavioral responses to noxious thermal stimuli and permits the researcher to visualize and quantify various aspects of thermal nociception in Drosophila larvae. The assays can be applied to larvae of desired genotypes or to larvae raised under different environmental conditions that might impact nociception. Since thermal nociception is conserved across species, the findings gleaned from genetic dissection in Drosophila will likely inform our understanding of thermal nociception in other species, including vertebrates.

Local and Global Methods of Assessing Thermal Nociception in Drosophila Larvae

In this article, we demonstrate assays to study thermal nociception in Drosophila larvae. One assay involves spatially-restricted (local) stimulation of thermal nociceptors1,2 while the second involves a wholesale (global) activation of most or all such neurons3. Together, these techniques allow visualization and quantification of the behavioral functions of Drosophila nociceptive sensory neurons.

Lokale und globale Methoden zur Beurteilung der thermischen Nozizeption in<em&gt; Drosophila</em&gt; Larven

In this article, we demonstrate assays to study thermal nociception in Drosophila larvae. One assay involves spatially-restricted (local) stimulation of ...

Assessment of Morphine-induced Hyperalgesia and Analgesic Tolerance in Mice Using Thermal and Mechanical Nociceptive Modalities

Opioid-induced hyperalgesia and tolerance severely impact the clinical efficacy of opiates as pain relievers in animals and humans. The molecular mechanisms underlying both phenomena are not well understood and their elucidation should benefit from the study of animal models and from the design of appropriate experimental protocols. 
We describe here a methodological approach for inducing, recording and quantifying morphine-induced hyperalgesia as well as for evidencing analgesic tolerance, using the tail-immersion and tail pressure tests in wild-type mice. As shown in the video, the protocol is divided into five sequential steps. Handling and habituation phases allow a safe determination of the basal nociceptive response of the animals. Chronic morphine administration induces significant hyperalgesia as shown by an increase in both thermal and mechanical sensitivity, whereas the comparison of analgesia time-courses after acute or repeated morphine treatment clearly indicates the development of tolerance manifested by a decline in analgesic response amplitude. This protocol may be similarly adapted to genetically modified mice in order to evaluate the role of individual genes in the modulation of nociception and morphine analgesia. It also provides a model system to investigate the effectiveness of potential therapeutic agents to improve opiate analgesic efficacy.

We describe a protocol to examine the development of opioid-induced hyperalgesia and tolerance in mice. Based on the measurement of thermal and mechanical nociceptive responses of na&#239;ve and morphine-treated animals, it allows to quantify the increase in pain sensitivity (hyperalgesia) and decrease in analgesia (tolerance) associated with chronic opiate administration.

Bewertung von Morphin-induzierte Hyperalgesie und Schmerztoleranz in Mäuse mit Thermal-und Maschinen Nozizeptive Modalitäten

Opioid-induced hyperalgesia and tolerance severely impact the clinical efficacy of opiates as pain relievers in animals and humans. The molecular ...

Determination of the Spontaneous Locomotor Activity in Drosophila melanogaster

Drosophila melanogaster has been used as an excellent model organism to study environmental and genetic manipulations that affect behavior. One such behavior is spontaneous locomotor activity. Here we describe our protocol that utilizes Drosophila population monitors and a tracking system that allows continuous monitoring of the spontaneous locomotor activity of flies for several days at a time. This method is simple, reliable, and objective and can be used to examine the effects of aging, sex, changes in caloric content of food, addition of drugs, or genetic manipulations that mimic human diseases.

Determination of the Spontaneous Locomotor Activity in Drosophila melanogaster

Drosophila melanogaster are useful in studying genetic or environmental manipulations that affect behaviors such as spontaneous locomotor activity.&#160; Here we describe a protocol that utilizes monitors with infrared beams and data analysis software to quantify spontaneous locomotor activity.&#160;

Bestimmung der spontanen lokomotorischen Aktivität in<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Drosophila melanogaster has been used as an excellent model organism to study environmental and genetic manipulations that affect behavior. One such ...

Rapid In Situ Hybridization using Oligonucleotide Probes on Paraformaldehyde-prefixed Brain of Rats with Serotonin Syndrome

3,4-Methylenedioxymethamphetamine (MDMA; ecstasy) toxicity may cause region-specific changes in serotonergic mRNA expression due to acute serotonin (5-hydroxytryptamine; 5-HT) syndrome. This hypothesis can be tested using in situ hybridization to detect the serotonin 5-HT2A receptor gene htr2a. In the past, such procedures, utilizing radioactive riboprobe, were difficult because of the complicated workflow that needs several days to perform and the added difficulty that the technique required the use of fresh frozen tissues maintained in an RNase-free environment. Recently, the development of short oligonucleotide probes has simplified in situ hybridization procedures and allowed the use of paraformaldehyde-prefixed brain sections, which are more widely available in laboratories. Here, we describe a detailed protocol using non-radioactive oligonucleotide probes on the prefixed brain tissues. Hybridization probes used for this study include dapB (a bacterial gene coding for dihydrodipicolinate reductase), ppiB (a housekeeping gene coding for peptidylprolyl isomerase B), and htr2a (a serotonin gene coding for 5-HT2A receptors). This method is relatively simply, cheap, reproducible and requires less than two days to complete.

Rapid In Situ Hybridization using Oligonucleotide Probes on Paraformaldehyde-prefixed Brain of Rats with Serotonin Syndrome

This protocol describes a rapid and simplified in situ hybridization method ideal forparaformaldehyde-prefixed brain, thus reducing the need for prolonged complex steps while using fresh frozen tissues. The method is validated using the identification of the serotonin 5-HT2A receptor gene htr2a in rats.

Schnelle<em&gt; In-situ-</em&gt; Hybridisierung unter Verwendung von Oligonukleotidsonden auf Paraformaldehyd-Präfix Gehirn von Ratten mit Serotonin-Syndrom

3,4-Methylenedioxymethamphetamine (MDMA; ecstasy) toxicity may cause region-specific changes in serotonergic mRNA expression due to acute serotonin ...

Measurement &amp; Analysis of the Temporal Discrimination Threshold Applied to Cervical Dystonia

The temporal discrimination threshold (TDT) is the shortest time interval at which an observer can discriminate two sequential stimuli as being asynchronous (typically 30-50 ms). It has been shown to be abnormal (prolonged) in neurological disorders, including cervical dystonia, a phenotype of adult onset idiopathic isolated focal dystonia. The TDT is a quantitative measure of the ability to perceive rapid changes in the environment and is considered indicative of the behavior of the visual neurons in the superior colliculus, a key node in covert attentional orienting. This article sets out methods for measuring the TDT (including two hardware options and two modes of stimuli presentation). We also explore two approaches of data analysis and TDT calculation. The application of the assessment of temporal discrimination to the understanding of the pathogenesis of cervical dystonia and adult onset idiopathic isolated focal dystonia is also discussed.

Methods for the measurement and analysis of the temporal discrimination threshold are presented, and its application to the study of the pathogenesis of cervical dystonia are discussed.

Messung und Analyse der zeitlichen Diskriminierung Schwelle angewendet, zervikale Dystonie

The temporal discrimination threshold (TDT) is the shortest time interval at which an observer can discriminate two sequential stimuli as being ...

Rapid and Specific Immunomagnetic Isolation of Mouse Primary Oligodendrocytes

The efficient and robust isolation and culture of primary oligodendrocytes (OLs) is a valuable tool for the in vitro study of the development of oligodendroglia as well as the biology of demyelinating diseases such as multiple sclerosis and Pelizaeus-Merzbacher-like disease (PMLD). Here, we present a simple and efficient selection method for the immunomagnetic isolation of stage three O4+ preoligodendrocytes cells from neonatal mice pups. Since immature OL constitute more than 80% of the rodent-brain white matter at postnatal day 7 (P7) this isolation method not only ensures high cellular yield, but also the specific isolation of OLs already committed to the oligodendroglial lineage, decreasing the possibility of isolating contaminating cells such as astrocytes and other cells from the mouse brain. This method is a modification of the techniques reported previously, and provides oligodendrocyte preparation purity above 80% in about 4 h.

We describe the immunomagnetic isolation of primary mouse oligodendrocytes, which allows the rapid and specific isolation of the cells for in vitro culture.

Schnelle und spezifische Immunomagnetic Isolierung der Maus primären Oligodendrozyten

The efficient and robust isolation and culture of primary oligodendrocytes (OLs) is a valuable tool for the in vitro study of the development of ...

Establishment of Acute Pontine Infarction in Rats by Electrical Stimulation

Pontine infarction is the most common stroke subtype in the posterior circulation, while there lacks a rodent model mimicking pontine infarction. Provided here is a protocol for successfully establishing a rat model of acute pontine infarction. Rats weighing about 250 g are used, and a probe with an insulated sheath is injected into the pons using a stereotaxic apparatus. A lesion is produced by the electrical stimulation with a single pulse. The Longa score, Berderson score, and beam balance test are used to assess neurological deficits. Additionally, the adhesive-removal somatosensory test is used to determine sensorimotor function, and the limb placement test is used to evaluate proprioception. MRI scans are then used to assess the infarction in vivo, and TTC staining is used to confirm the infarction in vitro. Here, a successful infarction is identified that is located in the anterolateral basis of the rostral pons. In conclusion, a new method is described to establish an acute pontine infarction rat model.

Presented here is a protocol for establishing acute pontine infarction in a rat model via electrical stimulation with a single pulse.

Einrichtung eines akuten Pontininfarkts bei Ratten durch elektrische Stimulation

Pontine infarction is the most common stroke subtype in the posterior circulation, while there lacks a rodent model mimicking pontine infarction. Provided ...

Laser-Induced Brain Injury in the Motor Cortex of Rats

A common technique for inducing stroke in experimental rodent models involves the transient (often denoted as MCAO-t) or permanent (designated as MCAO-p) occlusion of the middle cerebral artery (MCA) using a catheter. This generally accepted technique, however, has some limitations, thereby limiting its extensive use. Stroke induction by this method is often characterized by high variability in the localization and size of the ischemic area, periodical occurrences of hemorrhage, and high death rates. Also, the successful completion of any of the transient or permanent procedures requires expertise and often lasts for about 30 minutes. In this protocol, a laser irradiation technique is presented that can serve as an alternative method for inducing and studying brain injury in rodent models.
When compared to rats in the control and MCAO groups, the brain injury by laser induction showed reduced variability in body temperature, infarct volume, brain edema, intracranial hemorrhage, and mortality. Furthermore, the use of a laser-induced injury caused damage to the brain tissues only in the motor cortex unlike in the MCAO experiments where destruction of both the motor cortex and striatal tissues is observed.
Findings from this investigation suggest that laser irradiation could serve as an alternative and effective technique for inducing brain injury in the motor cortex. The method also shortens the time for completing the procedure and does not require expert handlers.

The protocol presented here shows a technique to create a rodent model of brain injury. The method described here uses laser irradiation and targets motor cortex.

Laserinduzierte Hirnverletzung im Motor Cortex von Ratten

A common technique for inducing stroke in experimental rodent models involves the transient (often denoted as MCAO-t) or permanent (designated as MCAO-p) ...

Induction of Diffuse Axonal Brain Injury in Rats Based on Rotational Acceleration

Traumatic brain injury (TBI) is a major cause of death and disability. Diffuse axonal injury (DAI) is the predominant mechanism of injury in a large percentage of TBI patients requiring hospitalization. DAI involves widespread axonal damage from shaking, rotation or blast injury, leading to rapid axonal stretch injury and secondary axonal changes that are associated with a long-lasting impact on functional recovery. Historically, experimental models of DAI without focal injury have been difficult to design. Here we validate a simple, reproducible and reliable rodent model of DAI that causes widespread white matter damage without skull fractures or contusions.

This protocol validates a reliable, easy-to-perform and reproducible rodent model of brain diffuse axonal injury (DAI) that induces widespread white matter damage without skull fractures or contusions.

Induktion von diffusen axonalen Hirnverletzungen bei Ratten basierend auf Rotationsbeschleunigung

Traumatic brain injury (TBI) is a major cause of death and disability. Diffuse axonal injury (DAI) is the predominant mechanism of injury in a large ...