Un modelo de infección por Candida albicans relacionada con catéteres en ratones

Resumen

Establecemos un modelo murino de infección relacionada con el catéter (IRC) asociada a C. albicans, en el que se forma una biopelícula en el catéter, y la interacción entre C. albicans y el huésped se correlaciona bien con el IRC clínico. Este modelo ayuda a cribar terapias para el IRC asociado a la biopelícula de C. albicans , sentando las bases para la transformación clínica.

Resumen

La infección relacionada con catéteres (IRC) es una infección nosocomial común causada por candida albicans durante la implantación de catéteres. Por lo general, las biopelículas se forman en la superficie externa del catéter y conducen a infecciones diseminadas, que son fatales para los pacientes. No hay una prevención y un tratamiento eficaces en las clínicas. Por lo tanto, es urgente establecer un modelo animal de IRC para el cribado preclínico de nuevas estrategias para su prevención y tratamiento. En este estudio, se insertó un catéter de polietileno, un catéter médico ampliamente utilizado, en la parte posterior de los ratones BALB/c después de la depilación. Candida albicans Posteriormente, se inoculó ATCC MYA-2876 (SC5314) que expresa proteína fluorescente verde mejorada en la superficie de la piel a lo largo del catéter. Se observó una intensa fluorescencia en la superficie del catéter bajo un microscopio fluorescente 3 días después. Se encontraron biopelículas maduras y gruesas en la superficie del catéter mediante microscopía electrónica de barrido. Estos resultados indicaron la adhesión, colonización y formación de biopelículas de Candida albicans en la superficie del catéter. La hiperplasia de la epidermis y la infiltración de células inflamatorias en las muestras de piel indicaron los cambios histopatológicos de la piel asociada a la IRC. En resumen, se estableció con éxito un modelo CRI de ratón. Se espera que este modelo sea útil en la investigación y el desarrollo del manejo terapéutico para el IRC asociado a Candida albicans .

Introducción

En los últimos años, con el desarrollo y la aplicación de materiales biomédicos, las infecciones relacionadas con implantes están emergiendo como problemas clínicos difíciles ^1,2. Con la amplia aplicación de catéteres médicos en las clínicas, el número de infecciones y muertes relacionadas es enorme cada año ^3,4. Las vías de infección comunes de una infección relacionada con el catéter (IRC) incluyen: (1) los patógenos en la superficie de la piel se infiltran en el cuerpo y se adhieren a la superficie externa del catéter ^5,....

Protocolo

Los animales de experimentación, ratones machos BALB/c (12-16 g), se compraron en el Centro de Animales de Laboratorio del Centro de Ciencias de la Salud de la Universidad Jiaotong de Xi'an. Todos los procedimientos fueron aprobados por el Comité Institucional de Ética Animal de la Universidad Xi'an Jiaotong con el número de licencia SCXK (Shaanxi) 2021-103.

1. Preparación del tampón y del equipo

1. Transfectar cepas de C. albicans con un plásmido pCaExp de alta expresión.
   1. Compre C. albicans (SC5314) de ATCC. Obtener la cepa fluorescente de alta expresión^{EGFP 22} transf....

Discusión

El CRI es una de las infecciones nosocomiales más frecuentes en la práctica clínica²³. Los patógenos en los apéndices de la piel, como la epidermis, las glándulas sebáceas y los folículos pilosos, son todas posibles causas de IRC^23,24. Candida es el tercer patógeno más grande que causa IRC, en el cual Candida albicans fue el tipo más común de infección por biopelícula^25,26<.......

Materiales

Name	Company	Catalog Number	Comments
0.5 Mactutrius turbidibris	Shanghai Lujing Technology Co., Ltd	5106063
2.5% glutaraldehyde fixative solution	Xingzhi Biotechnology Co., Ltd	DF015
4 °C refrigerator	Electrolux (China) Electric Co., Ltd	ESE6539TA
Agar	Beijing Aoboxing Bio-tech Co., Ltd	01-023
Analytical balances	Shimadzu	ATX124
Autoclaves Sterilizer	SANYO	MLS-3750
Butanol	Tianjin Chemio Reagent Co., Ltd	200-889-7
Carbenicillin	Amresco	C0885
Eclipse Ci Nikon upright optical microscope	Nikon	Eclipse Ts2-FL
Glucose	Macklin	D823520
Inoculation ring	Thermo Scientific	251586
Isoflurane	RWD	20210103
Paraformaldehyde	Beyotime Biotechnology	P0099
PAS dye kit	Servicebio	G1285
Peptone	Beijing Aoboxing Bio-tech Co., Ltd	01-001
Polyethylene catheter	Shining Plastic Mall	PE100
RWD R550 multi-channel small animal anesthesia machine	RWD	R550
SEM	Hitachi	TM-1000
Temperature incubator	Shanghai Zhichu Instrument Co., Ltd	ZQTY-50N
Ultrapure water water generator	Heal Force	NW20VF
Ultrasound machine	Do-Chrom	DS10260D
Xylene	Sinopharm  Chemical Reagent Co., Ltd	10023428
Yeast extract	Thermo Scientific Oxoid	LP0021B