Lesión crónica por constricción del nervio infraorbitario distal (DIoN-CCI) en ratones para estudiar el dolor neuropático del trigémino

Resumen

La lesión crónica por constricción del nervio infraorbitario distal en ratones induce cambios en el comportamiento espontáneo (aumento de la actividad de acicalamiento facial) y el comportamiento nocifensivo en respuesta a la estimulación táctil (hiperreactividad a la estimulación del cabello de von Frey) que son signos de dolor continuo y alodinia, y sirven como modelo para el dolor neuropático del trigémino.

Resumen

Los modelos animales siguen siendo herramientas necesarias para estudiar el dolor neuropático. Este manuscrito describe el modelo de lesión crónica por constricción del nervio infraorbitario distal (DIoN-CCI) para estudiar el dolor neuropático del trigémino en ratones. Esto incluye los procedimientos quirúrgicos para realizar la lesión por constricción crónica y las pruebas conductuales postoperatorias para evaluar los cambios en el comportamiento espontáneo y evocado que son signos de dolor continuo y alodinia mecánica. Los métodos y las lecturas de comportamiento son similares al modelo de lesión crónica por constricción del nervio infraorbitario (IoN-CCI) en ratas. Sin embargo, son necesarios cambios importantes para la adaptación del modelo IoN-CCI a ratones. En primer lugar, el abordaje intraorbital se sustituye por un abordaje más rostral con una incisión entre el ojo y la almohadilla de los bigotes. Por lo tanto, el IoN se liga distalmente fuera de la cavidad orbitaria. En segundo lugar, debido a la mayor actividad locomotora en ratones, permitir que las ratas se muevan libremente en jaulas pequeñas se reemplaza colocando a los ratones en dispositivos de restricción diseñados y construidos a medida. Después de la ligadura de DIoN, los ratones muestran cambios en el comportamiento espontáneo y en respuesta a la estimulación del cabello de von Frey que son similares a los de las ratas IoN-CCI, es decir, un aumento del aseo facial dirigido e hiperreactividad a la estimulación del cabello de von Frey del territorio de IoN.

Introducción

El dolor neuropático surge de un daño en el sistema nervioso somatosensorial, que conduce a una transmisión anormal de señales sensoriales al cerebro. El daño del nervio somatosensorial no siempre conduce al dolor neuropático, pero la prevalencia aumenta con la gravedad de la neuropatía clínica ^1,2. Los pacientes con dolor neuropático experimentan síntomas específicos como sensaciones espontáneas (ardor, hormigueo, sensaciones eléctricas) y dolor anormalmente intenso o prolongado a estimulación inocua o nociva que tienden a volverse crónicos y resistentes al tratamiento con an....

Protocolo

Los animales son tratados y cuidados de acuerdo con las directrices para la investigación del dolor en animales conscientes de la Asociación Internacional para el Estudio del Dolor y de acuerdo con la normativa flamenca y europea para la investigación con animales y las directrices ARRIVE. El protocolo es aprobado por el Comité de Ética institucional.

1. Animales

1. Utilice ratones machos y hembras C57BL/6J (Janvier, 10 semanas de edad a su llegada).
2. Aloje a los ratones macho y hembra por separado en jaulas estándar de fondo sólido en una sala de colonias con una humedad de....

Discusión

En ratas, se ha argumentado previamente que es preferible un enfoque intraorbital de la IoN, considerando la importancia de la musculatura fina intacta que controla los patrones complejos de batido en la discriminación vibrissotáctil y la distancia relativa de la incisión de la línea media al territorio nervioso infraorbitario cutáneo¹⁰. Otros han argumentado que un abordaje distal a través de una incisión en la piel pilosa caudal a la almohadilla vibrisal .......

Materiales

Name	Company	Catalog Number	Comments
Chromic catgut (6-0)	Dynek	CG602D	ligatures
Cotton applicator	Pharmacy
Digital video camera	Sony	HDR-CX330E
Dumont #5 forceps	Fine Science Tools	11251-10
Dumont forceps - Micro-blunted tips (#5/45)	Fine Science Tools	11253-25
Duratears	Alcon	0037-820	ophthalmic ointment
Hooked ligation aid	Fine Science Tools	18062-12
Ketalar	Pfizer		ketamine (50 mg/mL)
Operation microscope	Kaps	SOM 62
Precision cotton swab	Qosina	10225
Precision trimmer	Philips	HP6392/00
Rompun	Bayer		xylazine (2%)
Scissors - blunt tips	Fine Science Tools	14574-09
Semmes-Weinstein Von Frey Aesthesiometer kit	Stoelting	58011
Vicryl Rapide	Ethicon	MPVR489H	sutures