Frozen Liver Tissue Sectioning and BODIPY Staining of Lipid Droplets

Encienda el criostato y corte secciones de 12 micras de espesor del tejido hepático congelado recolectado de una rata. Coloque las secciones en los portaobjetos de microscopio etiquetados a temperatura ambiente. Para la tinción BODIPY, lave las secciones de tejido tres veces con PBS durante cinco minutos cada una.

Después del último lavado, rodee las secciones de la diapositiva con una capa hidrófoba con un bolígrafo de barrera. Prepare una solución de tinción que contenga BODIPY 493/503 y DAPI. Luego, pipetear 75 microlitros de la solución en cada portaobjetos.

Incubar los portaobjetos a temperatura ambiente durante 40 minutos en la oscuridad. Después de la incubación, lave los portaobjetos tres veces con PBS durante cinco minutos cada uno. Luego, utilizando un medio de montaje de fluorescencia, monte cuidadosamente los deslizamientos de la cubierta en cada portaobjetos.

Deje que los portaobjetos se sequen durante 30 minutos antes de sellar los bordes con esmalte de uñas.