Para comenzar, coloque las jeringas de insulina de calibre 30 de un mililitro en un refrigerador de cuatro grados centígrados para que se enfríen. Mantenga la mezcla de gel de matriz recién preparada que contiene células vasculares en hielo hasta que el ratón esté listo para la inyección. A continuación, coloque el ratón correctamente anestesiado en la placa de operaciones en posición prona y asegure sus extremidades a la placa con cinta adhesiva.
Cargue una jeringa de insulina preenfriada con 300 microlitros de la mezcla de gel de matriz, evitando la formación de burbujas. Desinfecte la piel de la parte posterior del ratón con almohadillas con alcohol al 75%, luego inyecte subcutáneamente 300 microlitros de la mezcla de gel de matriz en la jeringa en un lado de la espalda del animal. Retire con cuidado la aguja del lugar de la inyección para evitar cualquier fuga de la mezcla de gel.
Asegúrese de que se forme una pequeña joroba en el lugar de la inyección. Coloque el mouse sobre una almohadilla térmica durante dos minutos para permitir que la mezcla de gel de matriz se coagule y forme un tapón. Repita los pasos demostrados para crear un enchufe en el otro lado de la parte posterior del mouse.
Marca los bordes de la joroba con un rotulador. Aloje al animal en un laboratorio de animales de experimentación libre de patógenos específicos a 20 a 24 grados con ciclos de 12 horas de luz y 12 horas de oscuridad durante siete días.
