Para comenzar, inicie el software compatible con el sistema de imágenes in vivo. Inicie sesión y espere a que el panel del asistente de creación de imágenes se cargue por completo. Haga clic en el botón Inicializar en el panel del asistente de imágenes para iniciar el enfriamiento de la cámara.
Luego ajuste la temperatura de la almohadilla térmica entre 30 y 37 grados centígrados para mantener calientes a los animales. A continuación, pellizque suavemente las almohadillas de los pies de los animales anestesiados para evaluar su reflejo pedaleador. Inyectar intraperitonealmente 10 microlitros por gramo de peso corporal de luciferina sódica en los animales afeitados.
Ahora alinee el animal contra el centro de la cámara, como lo indica el símbolo más en el instrumento de imagen. Establezca el tiempo de imagen en el panel del asistente de imágenes en tres minutos para las imágenes de luminiscencia y seleccione las casillas de verificación tanto para la foto como para la luminiscencia. Haga clic en Adquirir para tomar la primera medición.
Una vez que se hayan registrado todas las mediciones, convierta la escala de la imagen en radiancia. Ahora determine la configuración óptima de agrupación y escala de color para las imágenes y manténgala uniforme para todas las imágenes. A continuación, haga clic en la herramienta ROI en el panel de la paleta de herramientas y utilice la opción Colocar ROI para seleccionar las áreas de interés de la imagen.
Por último, haga clic en Medir el ROI y copie los datos resultantes para exportarlos al software de organización o estadística de su elección. Las imágenes in vivo de los ratones THAI mostraron que las áreas que carecían de pelo, como las almohadillas de las patas, la cola y la nariz, tenían señales basales más altas. La señal de luciferasa fue influenciada por el estado de la hormona tiroidea.
Se observaron señales robustas en la región testicular. La acción de la hormona tiroidea se incrementó significativamente en el tejido adiposo marrón de ratones THAI estresados por frío. El tratamiento no afectó las señales de luciferasa de las almohadillas de los pies y la cola.
Los estudios de imágenes también capturaron la acumulación y eliminación de diclazurilo, un compuesto que altera el sistema endocrino, durante un período de tres semanas.
