Modelo murino espontáneo de cáncer anaplásico de tiroides

Presentamos un pipeline estándar para obtener tumores MATC y presentamos la dinámica tumoral y la información patológica. Este módulo ayudará a los investigadores a comprender la oncogénesis tumoral y facilitar los descubrimientos de fármacos. El MATC facilita la recolección de muestras de MATC en todo el curso de oncogénesis tumoral, y cada uno es un modelo de espejo espontáneo, con el sistema inmune completo y el microambiente inmune.

MATC se puede utilizar para estudiar los efectos de funciones genéticas específicas en ATC, comprender los mecanismos de progresión del tumor tiroideo y, en última instancia, mejorar el pronóstico de los pacientes con ATC. Para comenzar, pese el tamoxifeno y disuélvalo en 15 mililitros de aceite de maíz por ultrasonido a una concentración de 20 miligramos por mililitro. Luego guárdelo en un recipiente marrón a cuatro grados centígrados.

Alrededor de las ocho semanas, pesar los ratones con balanzas electrónicas y luego administrar tamoxifeno por vía intraperitoneal dos veces en un intervalo de una semana. Después de preparar las herramientas de disección y la solución de fijación de tejido de ratón, llene un plato limpio de 10 centímetros con aproximadamente 10 mililitros de PBS estéril para el almacenamiento temporal de tejidos y para lavar la sangre de la superficie del tejido. Para la extracción de la tiroides, coloque el ratón sacrificado en el tablero de disección.

Después de desinfectar el área del cuello, use tijeras y fórceps estériles. Haga una pequeña incisión por encima del centro de la clavícula y continúe en la línea media hasta la boca. Localice la glándula submandibular y retírela para exponer la ubicación anatómica de la tiroides, que está cerca del cartílago tiroides y la tráquea.

Una vez localizada la glándula tiroides, diseccionar cuidadosamente del resto de la región del cuello con tijeras estériles, y ponerla en el plato previamente preparado que contiene PBS estéril. Retire la sangre de la superficie del tejido tiroideo y, con tijeras estériles, corte cuidadosamente la tráquea. Luego coloque el tejido tiroideo en el paño estéril y mida el tamaño de los lóbulos izquierdo y derecho de la glándula tiroides usando calibradores Vernier.

Con una cuchilla estéril, divida los lóbulos izquierdo y derecho de la glándula tiroides en dos partes. Ponga una parte en dos mililitros de solución de paraformaldehído al 4% para la fijación y otra en nitrógeno líquido para su conservación. Para extraer el pulmón y el hígado, pellizque justo por encima del pene del ratón después de desinfectar el área.

Luego haga una pequeña incisión y corte a lo largo de la línea media del abdomen hasta el hueso subclavio. Exponga la cavidad abdominal. Después de localizar el hígado en la parte superior del abdomen, retírelo con cuidado y colóquelo en un nuevo plato que contenga PBS estéril.

Observe y cuente groseramente la metástasis en el pulmón y el hígado, seguido de la obtención de una imagen. Con una cuchilla estéril, divida los tejidos pulmonares y hepáticos en dos partes. Como se demostró anteriormente, fije una parte y conserve la otra parte en nitrógeno líquido.

La curva de crecimiento tumoral se trazó para observar la alteración dinámica del tamaño del tumor. Los tumores crecieron lentamente en la etapa temprana y se volvieron dramáticamente más rápidos en la etapa tardía. Por otro lado, se trazó una curva de supervivencia basada en el tiempo de supervivencia registrado.

La mediana de supervivencia de MATC fue de 130 días. Además, se encontró aproximadamente un 92% de metástasis pulmonar en la mayoría de los MATC. En la tinción HE de los tumores primarios y tejidos pulmonares metastásicos de MATC, los tejidos inducibles de un mes mostraron características solidificadas incompletas y la coexistencia de estructuras foliculares y células malignas, mientras que las estructuras foliculares tiroideas desaparecieron y el tumor se solidificó completamente después de una inducción de dos meses.

El tumor primario reveló que las células tumorales eran morfológicamente diversas, con células gigantes pleomórficas y células en forma de huso. Además, la tinción HE de tejidos pulmonares metastásicos mostró que el tejido pulmonar normal era una estructura reticular con estructuras alveolares claras y espacios aéreos. Sin embargo, las metástasis pulmonares mostraron una pérdida de la estructura reticular normal, engrosamiento de la cavidad aérea y parénquima pulmonar.

Mientras tanto, la tinción inmunohistoquímica del tumor MATC con diferentes anticuerpos mostró células tumorales altamente proliferativas, infiltración de linfocitos, una infiltración extensa de células mieloides, que fue consistente con muestras clínicas. Durante la disección, la ubicación anatómica de la glándula tiroides debe entenderse correctamente. La glándula tiroides se coloca cerca del cartílago tiroides y la tráquea.