Procedimientos para el cultivo in vitro de Treponema pallidum, la espiroqueta de sífilis

Gran parte de nuestra investigación está dirigida a obtener una mejor comprensión del metabolismo de T. pallidum. Comprender sus requisitos de crecimiento facilitará muchos aspectos de la investigación de la sífilis. La comprensión de la fisiología, la estructura, la inmunidad del huésped, la susceptibilidad a los antimicrobianos y, en última instancia, podría conducir a nuevos métodos de control de la sífilis.

Uno de nuestros mayores desafíos es la presencia de células de mamíferos en el sistema de cultivo. Si podemos determinar qué nutrientes están proporcionando las células, podemos eliminarlos del sistema y lo simplificaría. Eso nos permitiría no tener ADN o proteína de células de mamífero contaminadas, lo que facilitaría el análisis experimental.

Durante más de 100 años después de su aislamiento inicial, T. pallidum se propagó a través de la infección de conejos. El sistema de cultivo in vitro permite evitar el uso de animales y es más rentable. También permite técnicas como la ingeniería genética que no serían posibles en el modelo animal.

La disponibilidad de un método de cultivo in vitro ya ha ampliado considerablemente el número de grupos que estudian Treponema pallidum. También ha dado lugar a avances como la primera mutagénesis del organismo, así como a la detección de antibióticos de alto rendimiento para aquellos útiles en el tratamiento de la sífilis. El cultivo in vitro ha allanado el camino para el análisis detallado de los requisitos de crecimiento de T. pallidum, la función génica y los objetivos inmunitarios.

Estas preguntas son difíciles, si no imposibles, de abordar de manera efectiva utilizando solo el modelo del conejo. Esperamos que estos enfoques ayuden a mejorar el diagnóstico, el tratamiento y la prevención de la sífilis. Además de nuestros esfuerzos para mejorar el sistema de cultivo in vitro, nos centraremos en la manipulación genética de T. pallidum mediante mutagénesis por transposones.

Esperamos hacer un cribado funcional a gran escala para identificar genes importantes en la patogénesis de T. pallidum.