Este trabajo está financiado por la Comisión de Nueva Jersey para la Investigación de Lesiones Cerebrales.

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No hay conflictos de interés declarado.

El método que aquí se presenta LFP muchos modelos de los resultados neuropathalogical y de comportamiento de leve a moderada lesión cerebral traumática por lo que se ha convertido en un modelo animal ampliamente utilizado de la LCT. Hay varios pasos fundamentales para tener en cuenta para aumentar la validez y fiabilidad de esta técnica. Por ejemplo, es importante que sólo los animales en los que la integridad de la duramadre no ha sido comprometido durante la craniectomía ser sometido a LFP y utilizados en el estudio. Además, si la craniectomía se halla cerrado con algún tipo de pegamento o cemento de forma que parte de la dura debajo de la craniectomía no está expuesto a la fuerza de la presión del líquido, el animal debe ser eliminado del estudio. Por último, si el tiempo de los reflejos o la tasa de mortalidad no está dentro del rango deseado, el animal no debe ser incluido en el estudio. La intensidad del pulso de presión se puede aumentar la generación de lesiones más graves. Como se muestra en la Figura 1, la configuración de los dispositivos LFP es relativamente simple y la reproducibilidad del grado de lesión se mantiene mediante el control de las atmósferas de presión en el osciloscopio. Su forma suave de la curva en el osciloscopio indica que no hay burbujas de aire en el líquido que pueda interferir con la inducción de la lesión LFP. Un pulso de prueba debe ser entregada antes de la inducción de la lesión y si el osciloscopio no muestra una curva suave, burbujas de aire debe ser eliminado. La duración del pulso es de aproximadamente 20 ms, que representa el tiempo de inducción medido en las simulaciones de pruebas de choque. Las lesiones de pulsos más cortos tienden a producir más lesiones focales. Por lo tanto, la duración de los modelos de pulso humano TBI. Los cambios morfológicos y celulares siguientes LFP incluye el daño físico a los tejidos, así como aumento del número de astrocitos y macrófagos como se muestra en la Figura 2. Es bien sabido que uno de los signos de la lesión característica es la hiperplasia de los astrocitos y la formación de una cicatriz glial. La cicatriz glial se ha demostrado que tiene efectos tanto beneficiosos como perjudiciales 24. Del mismo modo, los macrófagos se acumulan en diversos tejidos durante la fase después de la lesión cuando se inicia el proceso de curación 25. Así, el aumento del número de GFAP y MAC1 células positivas en las muestras de LFP en relación con los controles de farsa es indicativo de la inducción de la lesión. La falta de expresión de los marcadores celulares específicos en los controles sham indica que la manipulación quirúrgica por sí sola no tiene consecuencias negativas en la salud de los tejidos del cerebro y que los cambios en la expresión de proteínas específicas para el paradigma de la lesión. Las consecuencias del comportamiento de la LFP leve ilustra en la Figura 3 se incluyen los déficits cognitivos y motores. Los resultados indican que el MWM ratones LFP eventualmente aprender la tarea, pero a un ritmo más lento que los ratones farsa y no recuerdan la tarea y un día después de la formación. Por lo tanto, aunque los ratones con lesiones leves son menos eficientes que los ratones farsa en el uso de señales externas para procesar, consolidar y almacenar la información espacial, que debe ser recuperada durante las pruebas posteriores. Otras dependiente del hipocampo tareas cognitivas, como respuesta al miedo condicionado se ha demostrado que se altera en ratones sometidos a LFP 26. Por último, la latencia más corta para caer a los ratones LFP en relación con los ratones simulado en el paradigma rotarod hasta 3 semanas después de una lesión leve es un indicador de déficit en vestibulomotor integrado y funciones sensoriales y motrices. Una lesión más moderado que revelan los cambios más notables en la función cognitiva y motora, como ha sido demostrado por otros grupos 27-30. En suma, la LFP es un modelo válido para el consumo humano TBI, ya que cumple muchos de los criterios de lo esperado. LFP proporciona la validez de constructo en el que recrea los procesos etiológicos que inducen la LCT en los seres humanos. En concreto, la magnitud de la fuerza y ​​la tasa de mortalidad es similar a lo que ocurre en los deportes de leve a moderada y las lesiones auto relacionado con la salvedad de que las intervenciones quirúrgicas antes de la lesión son únicas en el modelo animal. LFP también muestra la validez aparente en el que recapitula LFP muchos de los anatómicos, los efectos bioquímicos, neuropatológicos y de comportamiento observados en humanos TBI. Hay dos cambios focal y difuso detectado después de LFP y la lateralización del impacto permite comparar el daño morfológico en el lado ipsilateral a la lesión para que en el lado contralateral. Una advertencia es que los efectos cognitivos y motores pueden ser más sutiles, como resultado de heridas sólo un hemisferio. Por último, LFP muestra la validez predictiva y la fiabilidad de la técnica LFP permite la evaluación de diversas manipulaciones farmacológicas y genéticas antes o después de la inducción de la lesión 20. Variables fisiológicas como la presión arterial, el pH sanguíneo y la sangregases tendrá que medirse en presencia y en ausencia de un medicamento de prueba para determinar el mecanismo de acción de un agente terapéutico. Sin embargo, debido a la compleja naturaleza de las consecuencias primarias y secundarias de la LCT, es una tarea difícil identificar una única intervención que puede mitigar todos los síntomas. Una consideración en el futuro para la técnica LFP puede ser el uso de micro fluidos de percusión que utiliza un microprocesador controlado, instrumento de accionamiento neumático para eliminar la necesidad de calibrar la fuerza transmitida por el péndulo, y para evitar las variables operacionales, tales como las burbujas de aire en el líquido de 15 . Sin embargo, el enfoque estándar LFP ha sido demostrado por muchos investigadores como una técnica fiable y fácil de explorar los mecanismos moleculares que subyacen a los daños y la recuperación después de una LCT, que dará lugar a mejores intervenciones y terapias.

<ul><li> Instrumento de alineación estereotáxico para los ratones (Instrumentos Kopf) </li><li> De gas del ratón anestesia cabeza titular (Instrumentos Kopf) </li><li> La anestesia de la máquina con O 2 al ras (Parkland Científica) </li><li> La anestesia de la máquina con O2 al ras (Parkland Científica) </li><li> Buprenorphrine (Supply Webster Animal) </li><li> Actualizar LACRI Lube ungüento oftálmico (Fisher) </li><li> Bupivacaína / bupivacaína (Supply Webster Animal) </li><li> Solución de povidona yodada (Fisher) </li><li> 20 g de 1 ½ &quot;agujas (Becton Dickinson) </li><li> Hoja de bisturí (# 15) y el soporte (Becton Dickinson) </li><li> Bulldog abrazaderas (Herramientas Artes Ciencia) </li><li> Herramienta dental o un raspador de hueso (Herramientas Artes Ciencia) </li><li> Lado agarrar unas pinzas Dumont # 6 (Herramientas de Bellas Ciencia) </li><li> 3 mm de diámetro exterior trépano (Tienda de Investigación de Instrumentación de la Universidad de Pennsylvania) </li><li> Cuerda de nylon sólido (1,7 mm de diámetro, por ejemplo, la línea cortadora de malezas) </li><li> Pegamento en gel </li><li> Cianoacrilato de Loctite pegamento (Loctite 444 Tak Pak) (Henkel) </li><li> Chorro de líquido acrílico (Butler Schein) </li><li> Revestimiento de Perm / Reparación Resina (Butler Schein) </li><li> Almacenamiento del osciloscopio TDS 1001B, 40 MHz, 500MS / s (Tektronix) </li><li> Inductor trauma transductor de presión de un amplificador (Diseño y Fabricación de encargo, Virginia Commonwealth University) </li><li> Dispositivos LFP (Diseño y Fabricación de encargo, Virginia Commonwealth University) </li><li> De alta presión de la tubería, 41cm de longitud, 2 ml de volumen (Baxter) </li><li> 3M Vetbond tejido adhesivo (Fisher) </li></ul>

lateral fluid percussion: model of traumatic brain injury in mice

Lesión traumática del cerebro (TBI) de investigación ha logrado un impulso renovado, debido a la creciente conciencia de lesiones en la cabeza, que se traducen en morbilidad y mortalidad. En base a la naturaleza de la lesión primaria siguiente resultado TBI, secundaria compleja y heterogénea consecuencias, que son seguidos por 1,2 los procesos regenerativos. Lesión primaria puede ser inducida por una contusión directa en el cerebro de una fractura de cráneo o de la corte y estiramiento de los tejidos causando el desplazamiento del cerebro debido al movimiento de 3,4. Los hematomas y laceraciones resultantes causan una respuesta vascular 3,5, y el daño morfológico y funcional de la sustancia blanca conduce a una lesión axonal difusa 6-8. Otros cambios secundarios comúnmente vistos en el cerebro son el edema y aumento de la presión intracraneal 9. Después de TBI existen alteraciones microscópicas en las vías bioquímicas y fisiológicas que implican la liberación de neurotransmisores excitotoxicidad, mediadores inmunes y los radicales de oxígeno 10-12, que en última instancia, dar lugar a discapacidades a largo plazo neurológicas 13,14. Por lo tanto la elección de modelos animales apropiados de TBI que presentan eventos celulares y moleculares similares en humanos y roedores TBI es fundamental para el estudio de los mecanismos subyacentes a la lesión y la reparación. Diversos modelos experimentales de la LCT se han desarrollado para reproducir los aspectos de la LCT en humanos, entre ellos tres modelos específicos son ampliamente adaptados para los roedores: la percusión de líquidos, el impacto cortical y el peso de caída / impacto de aceleración 1. El dispositivo de percusión de líquido produce una lesión a través de una craniectomía mediante la aplicación de un pulso de presión de fluido en breve a la dura intacta. El pulso es creado por un péndulo golpeando el pistón de un depósito de líquido. La percusión produce un desplazamiento breve y deformación del tejido neural 1,15. Por el contrario, las lesiones corticales impacto proporciona energía mecánica a la dura intacta a través de un péndulo rígido bajo la presión neumática 16,17. La maza / impacto del modelo se caracteriza por la caída de una barra con un peso específico en el cráneo cerrado 18. Entre los modelos de TBI, LFP es el modelo más establecido y se utiliza comúnmente para evaluar una lesión cerebral focal y mezcla difusa 19. Es reproducible y está estandarizado para permitir la manipulación de los parámetros de la lesión. Recapitula la LFP lesiones observadas en los seres humanos, lo cual lo hace clínicamente relevante, y permite la exploración de nuevas terapias para la traducción clínica 20. Se describe el protocolo detallado para realizar el procedimiento de LFP en ratones. El daño infligido es de leve a moderado, con regiones del cerebro como la corteza, el hipocampo y el cuerpo calloso es más vulnerable. Tareas de aprendizaje en el hipocampo y el motor se exploran los siguientes LFP.

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Lateral Fluid Percussion: Model of Traumatic Brain Injury in Mice

Lateral fluido percusión (LFP), un modelo establecido de lesión traumática del cerebro en ratones, se demostró. LFP cumple tres criterios principales para los modelos animales: relevancia validez, fiabilidad y clínicos. El procedimiento, que consiste en una craneotomía quirúrgica, la fijación del cubo seguida por la inducción de la lesión, lo que resulta en lesiones focales y difusas, que se describe es.

Percusión fluido lateral: Modelo de Lesión Cerebral Traumática en ratones

Traumatic brain injury (TBI) research has attained renewed momentum due to the increasing awareness of head injuries, which result in morbidity and ...

lateral-fluid-percussion-model-of-traumatic-brain-injury-in-mice

Research

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Neuroscience

40.2K vistas.  University of Medicine and Dentistry of New Jersey-Robert Wood Johnson Medical School. Lateral fluido percusión (LFP), un modelo establecido de lesión traumática del cerebro en ratones, se demostró. LFP cumple tres criterios principales para los modelos animales: relevancia validez, fiabilidad y clínicos. El procedimiento, que consiste en una craneotomía quirúrgica, la fijación del cubo seguida por la inducción de la lesión, lo que resulta en lesiones focales y difusas, que se describe es.