El objetivo general de este procedimiento es implantar etiquetas acústicas en miniatura dentro de las cavidades corporales de la lamprea juvenil del Pacífico y la anguila americana y monitorear su comportamiento y efectos físicos después del proceso de etiquetado. Se han realizado numerosos estudios para comprender la supervivencia, el comportamiento y los movimientos de los peces cerca de las estructuras fluviales, como las presas hidroeléctricas, que pueden impedir las rutas migratorias aguas arriba o aguas abajo. Para ayudar a abordar esta necesidad continua y de uso, Pacific Northwest National Lab desarrolló una nueva etiqueta acústica en miniatura que se diseñó específicamente para su uso en lampreas juveniles y anguilas llamada lamprea y etiqueta de anguila.
Este método identifica los protocolos para el uso de dosis aceptables, el manejo de peces sin lesiones o esfuerzos de deshacer e identificar la ubicación óptima donde se pueden implantar etiquetas. La principal ventaja de esta técnica de etiquetado es la velocidad del proceso, ya que no se requieren suturas. La ubicación de la etiqueta dentro de la cavidad del cuerpo minimiza el estrés fisiológico, promueve la retención de la etiqueta y no causa ningún efecto perjudicial para la capacidad o el comportamiento de los peces.
Para empezar, prepare las etiquetas para la implantación desinfectándolas. Coloque las etiquetas en una solución de etanol al 70% a partir de 20 minutos. A continuación, retire las etiquetas con pinzas de plástico y colóquelas en un plato de vidrio pequeño que contenga agua estéril.
A continuación, retire las etiquetas y colóquelas en una taza de píldora estéril. El siguiente paso consiste en preparar el baño anestésico que permite manipular y etiquetar el pescado. En una taza de plástico pequeña, pesa 40 gramos de tricaína.
Disuelva el polvo en un vaso de agua del grifo de 500 mililitros en una placa de agitación y una barra de mezclador. A continuación, transfiera a una botella de plástico de 500 mililitros para lograr una solución de stock de 80 gramos por litro. Repita el mismo procedimiento con bicarbonato de sodio y agréguelo a un frasco separado de 500 mililitros.
Llene una tina de plástico de 10 litros con cinco litros de agua de la misma fuente que los peces a etiquetar. Añadir 6,25 mililitros de solución de tricaína y bicarbonato de sodio de 6,25 mililitros, utilizando un medidor de vertido unido a la parte superior de las botellas de 500 mililitros. Esto resulta en una dosis de 100 miligramos por litro a la bañera.
El bicarbonato de sodio se añade a la misma dosis a la tricaína para mantener el pH equilibrado, porque la tricaína es ácida. Revuelva para mezclar bien la solución, en la bañera, y tenga una tapa disponible para cubrir la bañera para asegurarse de que la lamprea no escape mientras está en la solución anestésica. Esto completa la preparación de la solución anestésica.
Coloque una lamprea individual en el baño anestésico, usando una pequeña red de inmersión. Espere de cuatro a cinco minutos para que la lamprea se desmovilice por completo y deje de nadar, manteniendo un movimiento lento pero constante de las branquias. Utilice una red de inmersión para quitar la lamprea.
Tome la medida de longitud y peso y registre el código de identificación único de la etiqueta acústica. Mientras tanto, prepare una almohadilla de espuma de celda cerrada de 1,3 centímetros de espesor, saturada de agua primero, y luego 150 microlitros por litro de solución de recubrimiento protector. El recubrimiento ayuda a contrarrestar la interrupción de las membranas mucosas durante el procedimiento quirúrgico.
Coloque el lado ventral de la lamprea hacia arriba sobre la espuma preparada. Coloque una pequeña sección de tubería de modo que un suministro regulado de agua de un tanque de agua elevado fluya a través de la región de la boca de la lamprea. Esto permite la respiración mientras los peces se someten a implantación de etiquetas.
A continuación, localice donde se va a realizar la incisión, aproximadamente 20 milímetros posteriores a los poros branquiales en el lado lateral izquierdo o derecho. Una regla se puede utilizar para referencia o marcadores colocados en la almohadilla de espuma. Usando un bisturí microquirúrgico estéril de 3.0 milímetros con una cuchilla de 15 grados, haga cuidadosamente una abertura de 2.5 a tres milímetros en la dirección lateral, asegurando que el bisturí esté cortando justo a través de la pared interior de la piel.
A continuación, coloque cuidadosamente la etiqueta desinfectada antes en la cavidad del cuerpo, a mano. Aplique una ligera presión en el sitio de etiquetado para asegurarse de que la etiqueta se ha movido a la cavidad del cuerpo. A continuación, coloque la lamprea etiquetada en un cubo de recuperación, que contiene el suministro de agua dulce del río con un tubo de bomba de oxígeno y piedra de aire.
Asegúrese de que la lamprea se haya recuperado del anestésico y transfiera al tanque de retención para su estudio futuro. Siga los mismos pasos para etiquetar la anguila americana de fase amarilla con estas diferencias. Para alcanzar una tasa de dosis de 240 miligramos por litro, utilice la solución anestésica descrita anteriormente de 80 gramos por litro de tricaína y bicarbonato de sodio.
Agregue 15 mililitros de cada uno al baño de agua de cinco litros. La incisión debe hacerse 25 milímetros a la base de la aleta pectoral en el lado lateral izquierdo o derecho o aproximadamente 1/3 de la longitud total de la anguila. Asegúrese de que los peces estén nadando normalmente en el contenedor de recuperación.
Esta figura ilustra la duración de la impingement en un tubo de natación de velocidad de agua constante para los cuatro grupos de tamaños probados, de 120 a 160 milímetros. Los resultados no muestran ninguna diferencia estadística entre los grupos de control etiquetados y no etiquetados. Esta figura ilustra la velocidad de natación crítica en longitudes corporales por segundo para las pruebas realizadas en una cámara de natación.
Los grupos de tamaños oscilan entre 111 y 120 a 161 y 175 milímetros. Los resultados muestran que no hay ninguna diferencia estadística entre los grupos de control etiquetados y sin etiquetar. Esta figura muestra la velocidad media de natación en longitudes corporales por segundo para todos los grupos de tamaños probados.
Las velocidades eran de 4,12 longitudes de cuerpo por segundo para las etiquetadas y 3,88 para el grupo de control. Una vez más, no hay diferencia estadística entre los grupos etiquetados y de control. Los resultados de estos estudios de laboratorio demuestran que el procedimiento de etiquetado y los efectos de etiquetado no tienen impactos adversos para la supervivencia de los peces o la capacidad de natación.
El procedimiento de implantación de la etiqueta fue eficaz para colocar etiquetas en la cavidad del cuerpo sin causar hemorragias o infecciones significativas en el sitio de etiquetado. La duración del proceso de etiquetado, menos de 60 segundos, es beneficiosa ya que reduce el estrés asociado con el pescado siendo anestesiado. Estos hallazgos caracterizan una nueva herramienta para la investigación de lamprea juvenil y paso de anguila y se pueden utilizar en estudios futuros.
Esta tecnología permitirá a los investigadores rastrear los movimientos de lamprea y anguila dentro de los sistemas fluviales a medida que se acercan a las presas hidroeléctricas u otras estructuras que pueden impedir el paso de peces. A su vez, los resultados pueden informar mejor las decisiones de gestión para ayudar a conservar estas especies a lo largo de sus etapas de vida juvenil.
