この手順の全体的な目標は、若年性太平洋ランプレーとアメリカウナギの体内にミニチュア音響タグを埋め込み、タグ付けプロセス後の行動と物理的な影響を監視することです。水力ダムなどの河川構造物付近での魚の生存、行動、動きを理解するために、上流や下流の移動経路を妨げる可能性のある多くの研究が行われてきました。この継続的な使用ニーズに対処するために、パシフィックノースウエストナショナルラボは、特にランプレーとウナギタグと呼ばれる少年ランプレーとウナギでの使用のために設計された新しいミニチュア音響タグを開発しました。
この方法は、許容用量率を使用するためのプロトコルを識別し、魚を怪我なしで扱うか、ストレスを取り消し、タグを埋め込むことができる最適な場所を特定する。このタグ付け技術の主な利点は、縫合線が必要ないため、プロセスの速度です。体腔内のタグの位置は、生理学的ストレスを最小限に抑え、タグの保持を促進し、魚の泳ぐ能力や行動に有害な影響を及ぼしません。
まず、タグを消毒して移植用に準備します。20分から70%エタノール溶液にタグを入れます。その後、プラスチック製のピンセットを使用してタグを取り除き、滅菌水を含む小さなガラス皿に入れます。
次に、タグを取り除き、無菌ピルカップに入れ。次のステップでは、魚を扱い、タグ付けすることを可能にする麻酔浴を準備する必要があります。小さなプラスチックカップでは、トリカインの重量40グラム。
かき混ぜプレートとミキサーバーの水道水の500ミリリットルビーカーに粉末を溶解します。その後、500ミリリットルのペットボトルに移して、80グラム/リットルのストック溶液を達成します。重炭酸ナトリウムで同じ手順を繰り返し、別の500ミリリットルのボトルに追加します。
タグ付けする魚と同じソースから水の5リットルで10リットルのプラスチック浴槽を埋めます。500ミリリットルのボトルの上部に取り付けられた測定注ぐゲージを使用して、6.25ミリリットルのトリカイン溶液と6.25ミリリットルの重炭酸ナトリウムを加えます。これは、浴槽に1リットル当たりのミリグラムの線量になります。
重炭酸ナトリウムは、トリカインが酸性であるため、pHのバランスを保つためにトリカインに等しい用量で添加される。溶液を十分に混ぜ合わせ、浴槽に入れ、麻酔液中にランプレーが逃げないように浴槽を覆うために蓋を用意します。これで麻酔液の調製が完了します。
小さなディップネットを使用して、麻酔浴場に個々のランプレーを入れる。ランプレーが完全に復員され、ゆっくりと安定したギルの動きを維持しながら、水泳を停止するまで4〜5分待ちます。ディップネットを使用してランプレーを取り除きます。
長さと重量の測定を取り、音響タグの一意の識別コードを記録します。一方、厚さ1.3センチのクローズドセルフォームパッドを準備し、最初に水で飽和し、次に150マイクロリットル/リットルの保護コーティング溶液を用意します。コーティングは外科的処置の間に粘膜の中断を打ち消すのに役立つ。
準備した泡の上にランプレー腹側を上に置きます。高架水タンクからの水の規制供給がランプレーの口の領域を通って流れるよう、チューブの小さなセクションを配置します。これは魚がタグの注入を受けている間呼吸を可能にする。
次に、切開が行われる場所を、左右の側面のギル孔に約20ミリメートル後部に位置付ける。定規は、フォームパッドに配置された参照またはマーカーに使用できます。15度の刃を持つ無菌3.0ミリメートルの微小メスを使用して、慎重に2.5〜3ミリメートルの開口部を横方向に作り、メスが内側の皮膚壁を通って切断していることを確認します。
その後、慎重に手で、体腔に前に、化毒タグを配置します。タグがボディキャビティに移動したことを確認するために、タグ付け部位にわずかな圧力を加えます。次に、タグ付きランプレーを回復バケツに入れ、酸素ポンプチューブと空気石を備えた新鮮な川の水供給を含みます。
ランプレーが麻酔薬から回復し、将来の研究のために保持タンクに移されたことを確認してください。同じ手順に従って、イエローフェーズのアメリカウナギにこれらの違いをタグ付けします。1リットル当たり240ミリグラムの用量を達成するために、前に記載された80グラム/リットルトリケーヌおよび重炭酸ナトリウムの麻酔液を使用する。
5リットルの水浴にそれぞれ15ミリリットルを加えます。切開は、両側または右横側の胸部フィンの基部に25ミリメートル、またはウナギの全長の約1/3を作る。魚が回復容器の中で正常に泳いでいることを確認してください。
この図は、120〜160ミリメートルの4つのサイズ群について、一定の水速度の水泳チューブに衝突する持続時間を示しています。この結果は、タグ付けされた制御グループとタグなし制御グループの間に統計的な差異は表示されません。この図は、水泳室で行われたテストの1秒間の体長の重要な水泳速度を示しています。
サイズグループの範囲は111~120~161~175ミリメートルです。結果は、タグ付けされた制御グループとタグなし制御グループの間に統計的な違いがないことを示しています。この図は、テストされたすべてのサイズグループの1秒あたりの体長の中央値の水泳速度を示しています。
速度は、タグ付けされた場合は 1 秒あたり 4.12 ボディ長、コントロール グループの場合は 3.88 です。繰り返しますが、タグ付けグループと制御グループの間に統計的な違いはありません。これらの実験室研究の結果は、タグ付け手順とタグ付け効果が魚の生存性や水泳能力に悪影響を及ぼさないことを示しています。
タグ移植手順は、タグ付け部位で有意な出血または感染症を引き起こすことなく、体腔内にタグを配置するのに有効であった。タグ付けプロセスの持続時間は、60秒未満であり、麻酔中の魚に関連するストレスを軽減するという利点がある。これらの知見は、若年性ランプレーとウナギの通路研究のための新しいツールを特徴付け、将来の研究で利用することができる。
この技術により、研究者は水力発電ダムや魚の通過を妨げる可能性のある他の構造物に近づくにつれて、川システム内のランプレーやウナギの動きを追跡することができます。さらに、この結果は、少年のライフステージを通じてこれらの種を保全するのに役立つ管理上の決定をより良く知らせることができます。
