이 절차의 전반적인 목표는 청소년 태평양 램프레이와 미국 장어의 신체 구멍 내에 소형 음향 태그를 이식하고 태그 처리 후 자신의 행동과 물리적 효과를 모니터링하는 것입니다. 상류 또는 하류 이주 경로를 방해할 수 있는 수력 댐과 같은 강 구조물 근처의 어류 생존, 행동 및 움직임을 이해하기 위한 수많은 연구가 수행되었습니다. 이러한 지속적인 사용 요구 와 사용 필요성을 해결하기 위해 퍼시픽 노스웨스트 국립 연구소는 램프레이와 뱀장어 태그라고 불리는 청소년 램프레이와 뱀장어에 사용하도록 특별히 설계된 새로운 미니어처 어쿠스틱 태그를 개발했습니다.
이 방법은 허용 가능한 용량 비율을 사용하고, 부상없이 물고기를 처리하거나 스트레스를 취소하고, 태그를 이식 할 수있는 최적의 위치를 식별하기위한 프로토콜을 식별합니다. 이 태그 지정 기술의 주요 장점은 봉합사가 필요하지 않기 때문에 프로세스의 속도입니다. 신체 구멍 내태그의 위치는 생리적 스트레스를 최소화하고 태그 유지를 촉진하며 물고기의 수영 능력이나 행동에 해로운 영향을 주지 않습니다.
먼저 태그를 소독하여 이식용 태그를 준비합니다. 태그를 70% 에탄올 용액에 20분간 배치합니다. 그런 다음 플라스틱 핀셋을 사용하여 태그를 제거하고 멸균 물을 포함하는 작은 유리 접시에 놓습니다.
다음으로, 태그를 제거하고 멸균 알약 컵에 배치합니다. 다음 단계는 물고기를 처리하고 태그 할 수있는 마취 목욕을 준비하는 것입니다. 작은 플라스틱 컵에, 무게 40 트리카인의 그램.
저어접시와 믹서 바에서 500밀리리터 의 수돗물 비커에 파우더를 녹입니다. 그런 다음 500밀리리터 플라스틱 병으로 옮겨 리터당 80그램의 스톡 솔루션을 구현합니다. 중탄산나트륨과 동일한 절차를 반복하고 별도의 500 밀리리터 병에 추가하십시오.
10리터 플라스틱 욕조에 꼬리표를 달아 물고기와 동일한 소스에서 5리터의 물을 채웁니다. 500 밀리리터 병 의 상단에 부착 된 측정 붓기 게이지를 사용하여 트리카인 용액 6.25 밀리리터와 6.25 밀리리터 중탄산 나트륨을 추가하십시오. 이 결과 100 욕조에 리터당 밀리 그램 복용량.
중탄산나트륨은 트리카인이 산성이기 때문에 pH균형을 유지하기 위해 트리카인에 동등한 용량으로 첨가된다. 욕조에 용액을 철저히 섞고 욕조를 덮을 뚜껑을 사용하여 마취 용액에서 램프레이가 탈출하지 않도록 하십시오. 이렇게 하면 마취 솔루션 준비를 완료합니다.
작은 딥 넷을 사용하여 개별 램프리를 마취 욕조에 넣습니다. 램프리가 완전히 철거되고 수영을 중지할 때까지 4~5분 동안 기다리며 느리지만 꾸준한 아가미 움직임을 유지합니다. 딥 넷을 사용하여 램프리를 제거합니다.
길이 및 중량 측정을 하고 음향 태그의 고유 식별 코드를 기록합니다. 한편, 1.3센티미터 두께의 폐쇄형 셀 폼 패드를 먼저 물로 채점한 다음 150마이크로리터당 보호 코팅 용액을 준비합니다. 코팅은 외과 수술 중 점액 막의 중단을 중화하는 데 도움이됩니다.
램프리 복부쪽을 준비된 폼에 올려 놓습니다. 높은 물 탱크에서 물의 규제 공급이 램프레이의 입 영역을 통해 흐를 수 있도록 튜브의 작은 부분을 배치합니다. 이것은 물고기가 태그 이식을 겪고있는 동안 호흡을 허용합니다.
다음으로, 절개가 만들어질 위치를 찾아, 좌우 측의 아가미 모공에 약 20밀리미터 후방. 눈금자는 폼 패드에 배치된 참조 또는 마커에 사용할 수 있습니다. 15도 블레이드가 있는 멸균 3.0mm 미세 수술 메스를 사용하여 측면 방향으로 2.5~3mm의 개구부를 조심스럽게 만들어 메스가 내부 피부 벽을 통해 절단되도록 합니다.
그런 다음 소독된 태그를 손으로 신체 구멍에 미리 배치합니다. 태그 가에 약간의 압력을 가하여 태그가 바디 캐비티로 이동했는지 확인합니다. 다음으로, 산소 펌프 튜브와 공기 석재와 신선한 강 물 공급을 포함하는 복구 양동이에 태그 램프레이를 배치합니다.
램프레이가 마취에서 회복되었는지 확인하고 향후 연구를 위해 탱크를 들고 전달하십시오. 같은 단계를 따라 노란색 위상 미국 장어에 태그를 붙이면 이러한 차이점이 있습니다. 리터당 240밀리그램의 투여량을 얻으려면 리터당 80그램의 마취용 용액과 중탄산나트륨을 사용하십시오.
5리터 수조에 각각 15밀리리터를 넣습니다. 절개는 왼쪽 또는 오른쪽 측면의 가슴 지느러미의 기저에 25밀리미터 또는 뱀장어의 총 길이의 약 1/3을 만들 것이다. 물고기가 복구 용기에서 정상적으로 수영하고 있는지 확인하십시오.
이 수치는 120에서 160밀리미터에서 테스트된 4개의 크기 그룹에 대한 일정한 물 속도 수영 튜브에서 충돌하는 기간을 보여줍니다. 결과는 태그된 대조군과 태그가 지정되지 않은 대조군 간의 통계적 차이를 나타내지 않습니다. 이 그림은 수영 실에서 실시 하는 테스트에 대 한 초당 신체 길이에 중요 한 수영 속도 설명 합니다.
크기 그룹은 111에서 120에서 161에서 175 밀리미터범위입니다. 결과는 태그가 지정된 대조군과 태그가 지정되지 않은 대조군 사이에 통계적 차이가 없음을 보여줍니다. 이 수치는 테스트된 모든 크기 그룹에 대해 초당 신체 길이의 평균 수영 속도를 보여줍니다.
속도는 태그에 대한 초당 4.12 체거리와 대조군의 경우 3.88이었다. 다시 말하지만 태그된 그룹과 대조군 사이에는 통계적 차이가 없습니다. 이러한 실험실 연구의 결과 태그 절차 및 태그 효과 물고기 생존 또는 수영 능력에 부정적인 영향을 하지 않습니다 보여줍니다.
태그 이식 절차는 태그 부위에 상당한 출혈이나 감염을 일으키지 않고 신체 구멍에 태그를 배치하는 데 효과적이었다. 60초 미만의 태그 지정 과정의 지속 시간은 마취된 물고기와 관련된 스트레스를 줄여주는 데 유용합니다. 이 사실 인정은 청소년 램프레이와 뱀장어 통로 연구를 위한 새로운 공구를 특징지으며 미래 연구결과에서 이용될 수 있습니다.
이 기술을 통해 연구원들은 수력 발전 댐이나 어류 통로를 방해할 수 있는 다른 구조물에 접근할 때 강 시스템 내에서 램프레이와 뱀장어의 움직임을 추적할 수 있습니다. 차례로, 결과는 더 나은 그들의 청소년 생활 단계를 통해 이 종을 보존하는 것을 돕기 위하여 관리 결정을 통보할 수 있습니다.