Extracción rápida y rentable de ARN de tejido pancreático de rata

Hola a todos. Hemos diseñado un método descriptivo sencillo y rápido en clase para la extracción eficiente de ARN del tejido pancreático. La principal ventaja de este método es un procedimiento optimizado para extraer ARN de la cantidad mínima de tejido debido a la autolisis. Hola otra vez. La demostración del procedimiento será hecha por Sanaz Dastghaib, que es mi estudiante de PHD en nuestro laboratorio en el Departamento de Bioquímica de la Universidad de Ciencias Médicas de Shiraz.Primero preparar el lugar de la cirugía, poner todos los requisitos bajo el capó. Para inactivar RNase esterilizar todos los instrumentos de cirugía en un horno. Inyectar ketamina-xiaziazina por vía intraperitoneal 80/8 miligramos por kilogramo. Añadir 1 cc.reactivo de estabilización de ARN en el microtubo adecuado para habitar la activación de la endonucleasa en los tejidos existentes. Coloque inmediatamente la rata en la placa quirúrgica. Aleje al cirujano para una incisión de línea media. Luego, esteriliza toda la superficie abdominal con 70%alcohol para eliminar el vello de rata. Corta la piel para la cirugía. Se hizo una incisión de remodelación para abrir el abdomen desde el área púbica hasta las patas delanteras. Voltear los órganos abdominales hacia el lado izquierdo, para exponer el páncreas. Encuentra cuidadosamente el tejido del páncreas, que se propaga en la cavidad abdominal. Localice el área que se muestra para averiguar el páncreas sin confundirse con el tejido graso. Retire inmediatamente el páncreas de 20 a 30 miligramos de la cavidad abdominal en menos de dos minutos. Coloque el tejido extraído en el microtubo muy rápidamente y córtelo con el cortador de astride para penetrar el reactivo de estabilización del ARN en los tejidos separados. Coloque el microtubo en el tanque de nitrógeno para congelar inmediatamente. Todos sus microtubos deben mantenerse en los 80