Extração rápida e econômica do RNA do tecido pancreático de rato

Olá a todos. Nós projetamos, um método descritivo simples e rápido na classe para a extração eficiente de RNA a partir de tecido pancreático. A principal vantagem deste método é um procedimento otimizado para extrair RNA da quantidade mínima de tecido devido à autolise. Oi de novo. A demonstração do procedimento será feita por Sanaz Dastghaib, que é meu aluno de DOUTORADO em nosso laboratório no Departamento de Bioquímica da Universidade de Ciências Médicas shiraz.Primeiro prepare o local da cirurgia, coloque todos os requisitos sob o capô. Para inativar RNase estérilize todos os instrumentos cirúrgicos em um forno. Injete cetamina-xilazina intraperitoneal 80/8 miligramas por quilograma. Adicione 1 reagente de estabilização cc.RNA no microtubo adequado para habitar a ativação da endonuclease nos tecidos existentes. Coloque imediatamente o rato no quadro cirúrgico. Afaste o cirurgião para uma incisão no meio da linha. Em seguida, esterilize toda a superfície abdominal com 70% de álcool para remover o cabelo de rato. Corte a pele para a cirurgia. A correção remodelou a incisão para abrir o abdômen da área púbica para as pernas dianteiras. Vire os órgãos abdominais para o lado esquerdo, para expor o pâncreas. Encontre cuidadosamente o tecido do pâncreas, que está espalhado na cavidade abdominal. Localize a área em exposição para descobrir o pâncreas sem ser confundido com o tecido adiposo. Remova imediatamente o pâncreas de 20 a 30 miligramas da cavidade abdominal em menos de dois minutos. Coloque o tecido removido no micro tubo muito rapidamente e corte-o com o cortador de astride para penetrar o reagente de estabilização RNA para tecidos separados. Coloque o microtubo no tanque de nitrogênio para congelar imediatamente. Todos os seus microtubos devem ser mantidos no 80