Estrazione rapida ed economica dell'RNA del tessuto pancreatico ratto

Ciao a tutti. Abbiamo progettato, un metodo descrittivo semplice e rapido in classe per un'efficiente estrazione dell'RNA dal tessuto pancreatico. Il principale vantaggio di questo metodo è una procedura ottimizzata per estrarre l'RNA dalla quantità minima di tessuto a causa dell'autolisi. Ciao di nuovo. La dimostrazione della procedura sarà fatta da Sanaz Dastghaib, che è il mio dottorando nel nostro laboratorio presso il Dipartimento di Biochimica dell'Università di Scienze Mediche di Shiraz.Prima prepara il luogo dell'intervento chirurgico, metti tutti i requisiti sotto il cofano. Per inattivare la RNasi sterilizzare tutti gli strumenti chirurgici in forno. Iniettare chetamina-xiloazina intraperitoneale 80/8 milligrammo per chilogrammo. Aggiungere 1 reagente di stabilizzazione cc.RNA in un microtubo adeguato per abitare l'attivazione dell'endonucleasi nei tessuti esistenti. Posizionare immediatamente il topo sulla tavola chirurgica. Allontanati dal chirurgo per un'incisione della linea mediana. Quindi, sterilizzare tutta la superficie addominale con il 70% di alcol per rimuovere i peli del topo. Tagliare la pelle per l'intervento. L'incisione rimodella è stata fatta per aprire l'addome dall'area pubica alle zampe anteriori. Capovolgere gli organi addominali sul lato sinistro, per esporre il pancreas. Trova attentamente il tessuto del pancreas, che si diffonde nella cavità addominale. Individuare l'area esposta per scoprire il pancreas senza essere confusi con il tessuto adiposo. Rimuovere immediatamente il pancreas da 20 a 30 milligrammi dalla cavità addominale in meno di due minuti. Mettere il tessuto rimosso nel microtubo molto rapidamente e tagliarlo con la fresa a cavalco per penetrare nel reagente di stabilizzazione dell'RNA nei tessuti separati. Posizionare il microtubo nel serbatoio dell'azoto per congelare immediatamente. Tutti i loro microtubi devono essere conservati negli 80