Un protocolo eficiente para el análisis CUT&RUN de células satélite de ratón aisladas de FACS

Desde hace más de 20 años, nuestro laboratorio está interesado en el papel fisiopatológico de los receptores nucleares. Para descifrar su función in vivo, diseñamos un modelo de ratón que permite el control espacial y temporal de su expresión. Paralelamente, desarrollamos técnicas de vanguardia para investigar su función molecular en los tejidos de ratón.

Nuestro interés científico nos ha llevado recientemente a determinar la señalización de los secosteroides y de los receptores de esteroides en varios tejidos, incluido el músculo esquelético. Recientemente hemos demostrado que el receptor de andrógenos en las miofibras que diferencian las células del músculo esquelético es fundamental en sus funciones contráctiles y metabólicas. Nuestros hallazgos recientes brindan una comprensión más profunda de la dinámica fisiopatológica del músculo esquelético que es crucial para desarrollar tratamientos efectivos para los trastornos asociados a los músculos.

Desarrollamos este protocolo para poder realizar análisis de cistroma en células madre musculares in vivo. Todos los protocolos anteriores utilizaron modales in vitro, lo que disocia completamente la investigación del contexto de un organismo completo. Además de ser de bajo costo y eficiente en el tiempo, este protocolo proporciona un entorno experimental eficaz para estudiar el reclutamiento de factores de transcripción y el panorama de la cromatina en las células progenitoras del músculo esquelético.

La cromatina preparada por este protocolo ha proporcionado el primer análisis de todo el genoma del cistromo AR en células satélite, y facilitará futuros estudios sobre la regulación génica. Entre muchos, nuestro objetivo futuro sería extender estas investigaciones a otros receptores oxoesteroides y explorar sus correguladores específicos en los diversos tipos celulares involucrados en el proceso de regeneración en el músculo esquelético.