In vivo Imágenes de todo el cerebro de larvas de pez cebra usando microscopía de fluorescencia tridimensional

Estamos desarrollando sistemas inmunes ópticos y algoritmos computacionales para registrar y analizar la neuroactividad de todo el cerebro con una alta resolución espacial y temporal. El pez de laboratorio es un animal modelo ideal para la investigación. Gracias a cada transparencia óptica y la disponibilidad de diversas herramientas genéticas, la calidad óptica de la imagen puede degradarse debido a la aberración introducida por el gel de agarosa utilizado para el montaje de muestras, y los peces pueden moverse durante la grabación causando artefactos de movimiento en las imágenes o impidiendo la extracción de señales de precisión de las imágenes.

Los protocolos disponibles públicamente proporcionan solo una breve descripción del procedimiento experimental, viviendo partes sustanciales de los detalles, como las técnicas de montaje preciso de la solidificación de agarosa y el posicionamiento simple. Por lo tanto, se necesita un protocolo efectivo y reproducible para adquirir datos de imagen de alta calidad. Con un mínimo de ruido y movimiento.

Nuestro protocolo proporciona un procedimiento experimental optimizado y reproducible. Este protocolo permite obtener imágenes in vivo de todo el cerebro durante un período prolongado y visualizaciones de los datos de imágenes adquiridos. El flujo de trabajo se centró en imágenes de todo el cerebro, pero se puede aplicar fácilmente a la obtención de imágenes de otros órganos de muchos de nuestros peces cebra.

Nuestro objetivo es desentrañar los principios subyacentes de la computación neuronal. Para eso, continuaremos trabajando en una tubería que involucre imágenes a gran escala de la actividad y estructura neuronal y el análisis computacional de tales para el mapeo cerebral sistemático.