Un ensayo de microplacas basado en densidad óptica adaptado para caracterizar la infección por actinobacteriófagos

En última instancia, estamos interesados en las interacciones bacteriófago-huésped. Este protocolo permite la medición de la infección por fagos en bacterias de crecimiento lento, generando métricas descriptivas de infección. Esta metodología es fundamental para estudiar la coevolución bacteriófago-huésped en bacterias actinomicetos de crecimiento lento.

Los métodos rápidos de microplacas dan excelentes resultados para los huéspedes bacterianos de crecimiento rápido, pero son demasiado breves para mostrar la progresión de la infección bacteriano-fagos en huéspedes bacterianos de crecimiento más lento, como los actinomicetos. Nuestro método está adaptado para bacterias de crecimiento lento, lo que permite que las bacterias y los fagos se cultiven conjuntamente durante los múltiples días necesarios para caracterizar la dinámica de la infección por bacteriófagos. Nuestro protocolo permite evaluar las interacciones bacteriófago-huésped para detectar bacterias de crecimiento lento en microplacas en lugar de requerir un submuestreo de un matraz de cultivo más grande.

Este protocolo utiliza materiales fácilmente disponibles para adaptarse a tiempos de cultivo prolongados y permite que múltiples réplicas se coloquen en una sola microplaca.