Um ensaio adaptado baseado em densidade óptica em microplacas para caracterizar a infecção por actinobacteriófagos

Em última análise, estamos interessados em interações bacteriófagos-hospedeiro. Este protocolo permite a mensuração da infecção fagogênica em bactérias de crescimento lento, gerando métricas descritivas de infecção. Esta metodologia é fundamental no estudo da coevolução bacteriófago-hospedeiro em bactérias Actinomicetos de crescimento lento.

Os métodos rápidos de microplacas fornecem excelentes resultados para hospedeiros bacterianos de crescimento rápido, mas são muito breves para mostrar a progressão da infecção por fungos bacterianos em hospedeiros bacterianos de crescimento mais lento, como os actinomicetos. Nosso método é adaptado para bactérias de crescimento lento, permitindo que bactérias e fagos sejam co-cultivados pelos vários dias necessários para caracterizar a dinâmica da infecção por bacteriófagos. Nosso protocolo permite que as interações bacteriófagos-hospedeiro sejam avaliadas para bactérias de crescimento lento em microplacas, em vez de exigir subamostragem de um frasco de cultura maior.

Este protocolo usa materiais prontamente disponíveis para se adaptar a longos tempos de cultivo e permite que várias réplicas sejam plaqueadas em uma única microplaca.