Expresión de transgenes en células cultivadas utilizando vectores virales adenoasociados recombinantes no purificados

La terapia génica utiliza una cápside viral para introducir ADN en las células, y luego las células procesan ese ADN a través de mecanismos que no se comprenden completamente. Al estudiar cómo la célula procesa el ADN entregado por AAV, esperamos mejorar la seguridad, la eficacia y la longevidad de las terapias génicas AAV. Estudiar el procesamiento del ADN AAV a nivel de tejido u organismo fue bastante difícil.

Y mientras desarrollábamos protocolos de transducción de cultivos celulares para la visualización de AAV a través de microscopía de superresolución, descubrimos que la simplicidad de producir y usar preparaciones de AAV no purificadas en cultivos celulares no es bien conocida. Este método sencillo para la expresión transitoria puede ser ventajoso para los investigadores en numerosos campos. La creación de preparaciones crudas de AAV es bastante simple y tienen una larga vida útil F4C, lo que les permite usarse en numerosos experimentos.

Su aplicación es sencilla, lo que los convierte en una alternativa rentable y rápida a los reactivos de transfección estándar. A menudo, las preparaciones crudas de AAV son más eficientes y menos tóxicas que la transfección. La vectrología tiene dos brazos, la producción y la transducción, y ambos dependen completamente de la maquinaria celular huésped.

Nuestra investigación futura tiene como objetivo identificar la maquinaria celular involucrada en estos procesos y las formas de manipularlos para que podamos mejorar la eficiencia de la producción y la transducción. Comprender la biología básica que sustenta ambas ramas de la vectrología es vital para el éxito de las terapias génicas.