Nuestra investigación presenta un método completo y eficiente para producir organoides renales a partir de células madre pluripotentes inducidas, utilizando condiciones de cultivo en suspensión. Enfatizamos la importancia de la densidad celular inicial y la concentración de agonistas WNT durante la fase de inducción, lo que educará a los nuevos investigadores de organoides. En la actualidad, es difícil obtener una única línea celular de alta densidad para las iPSC.
El impacto de los lotes fue notable, particularmente en varias líneas de iPSC. Los organoides renales de cada lote pueden tener una forma y tamaño variados. Se necesitan varios intentos para obtener la mejor densidad celular inicial y la mejor concentración de CHIR para una línea de iPSC.
Hemos establecido que la diferenciación inicial del método intermediario es importante para la formación exitosa de organoides renales. Nuestro protocolo describe en detalle cómo elegir las densidades celulares óptimas y las concentraciones de CHIR durante el proceso, ya que las diferentes líneas de iPSC mostraron variaciones en la proliferación celular y la capacidad de diferenciación. Los investigadores pueden generar rápidamente los organoides renales específicos a partir de sus iPSC.
De acuerdo con nuestro protocolo, ajustando la densidad celular y la concentración de CHIR, sin duda es beneficioso para todos nuestros investigadores centrarse en su enfermedad renal. La investigación futura de nuestro laboratorio tiene que optimizar el método del protocolo en modelos de enfermedad, regenerar nuevos medicamentos y el cribado de fármacos. En los últimos cinco años, nuestro laboratorio se centrará en la epigenética y el desarrollo de fármacos de diversas enfermedades renales hereditarias, basándose en el desarrollo del paciente, la iPSC y los modelos de enfermedad renal organizada.