Unsere Forschung stellt eine umfassende und effiziente Methode zur Herstellung von Nierenorganoiden aus induzierten pluripotenten Stammzellen unter Verwendung von Suspensionskulturbedingungen dar. Wir betonen die Bedeutung der anfänglichen Zelldichte und der WNT-Agonistenkonzentration während der Induktionsphase, was neue Organoidforscher ausbilden wird. Derzeit ist es schwierig, eine einzige High-Density-Zelllinie für iPS-Zellen zu erhalten.
Die Auswirkungen auf die Charge waren insbesondere in verschiedenen iPSC-Linien spürbar. Die Nierenorganoide jeder Charge können eine unterschiedliche Form und Größe haben. Es sind mehrere Versuche notwendig, um die beste anfängliche Zelldichte und Konzentration von CHIR für eine iPSC-Linie zu erhalten.
Wir haben festgestellt, dass die initiale Differenzierung der Intermediärmethode wichtig für eine erfolgreiche Bildung von Nierenorganoiden ist. Unser Protokoll beschreibt detailliert, wie die optimalen Zelldichten und CHIR-Konzentrationen während des Prozesses ausgewählt werden, da verschiedene iPSC-Linien Unterschiede in der Zellproliferation und Differenzierungsfähigkeit aufwiesen. Forscher können aus ihren iPS-Zellen schnell die spezifischen Nierenorganoide erzeugen.
Gemäß unserem Protokoll ist es durch die Anpassung der Zelldichte und der Konzentration von CHIR zweifellos für alle unsere Forscher von Vorteil, sich auf ihre Nierenerkrankung zu konzentrieren. Unsere Laborforschung muss die Methode des Protokolls in Krankheitsmodellen optimieren, neue Medikamente und das Wirkstoffscreening regenerieren. In den letzten fünf Jahren wird sich unser Labor auf die Epigenetik und die Entwicklung von Medikamenten für verschiedene erbliche Nierenerkrankungen konzentrieren, basierend auf der Patientenentwicklung, iPSC und den nierenorganisierten Krankheitsmodellen.