Fluorrespirometría de alta resolución para evaluar los cambios dinámicos en el potencial de la membrana mitocondrial en células inmunitarias humanas

Para que una célula funcione y sobreviva después de un período de estrés fisiológico, debe ser capaz de satisfacer la demanda de energía necesaria para restaurar la homeostasis. En nuestro laboratorio, buscamos identificar cómo las mitocondrias responden y se adaptan a los factores estresantes nutricionales para comprender mejor cómo las mitocondrias median el riesgo de desarrollar enfermedades. Los métodos actuales para probar la bioenergética de PBMC implican medir la capacidad respiratoria después de agregar inhibidores y desacoplantes.

Estos métodos nos han ayudado a comprender cambios bioenergéticos significativos en las PBMC en diferentes estados de enfermedad. El potencial de membrana es esencial para la síntesis de ATP y regula procesos como el flujo respiratorio, las especies reactivas de oxígeno y la autofagia. Sin embargo, todavía tenemos un conocimiento limitado sobre cómo la respiración mitocondrial y el potencial de membrana responden juntos a las concentraciones de sustrato fisiológico en las PBMC.

La ventaja de esta técnica es que permite un análisis integrado del potencial de membrana mitocondrial y el consumo de oxígeno en las PBMC humanas en respuesta al aumento de los niveles de ADP. Este método permite cuantificar la sensibilidad de las mitocondrias a un cambio en la demanda de energía.