Fluorespirometria de alta resolução para avaliar mudanças dinâmicas no potencial da membrana mitocondrial em células imunes humanas

Para que uma célula funcione e sobreviva após um período de estresse fisiológico, ela precisa ser capaz de atender à demanda de energia necessária para restaurar a homeostase. Em nosso laboratório, procuramos identificar como as mitocôndrias respondem e se adaptam aos estressores nutricionais para entender melhor como as mitocôndrias medeiam o risco de desenvolver doenças. Os métodos atuais para testar a bioenergética do PBMC envolvem a medição da capacidade respiratória após a adição de inibidores e desacopladores.

Esses métodos nos ajudaram a entender mudanças bioenergéticas significativas em PBMCs em diferentes estados de doença. O potencial de membrana é essencial para a síntese de ATP e regula processos como fluxo respiratório, espécies reativas de oxigênio e autofagia. No entanto, ainda temos conhecimento limitado sobre como a respiração mitocondrial e o potencial de membrana respondem juntos às concentrações de substrato fisiológico em PBMCs.

A vantagem dessa técnica é que ela permite uma análise integrada do potencial da membrana mitocondrial e do consumo de oxigênio em PBMCs humanas em resposta ao aumento dos níveis de ADP. Este método permite quantificar a sensibilidade das mitocôndrias a uma mudança na demanda de energia.