Hemos desarrollado un modelo animal de quemaduras de ratón simple, rentable y fácil de usar para crear quemaduras consistentes de espesor completo. Este estudio proporcionará a los investigadores herramientas esenciales para facilitar el desarrollo de nuevos tratamientos para las lesiones por quemaduras. Los métodos utilizados para producir superficies quemadas varían entre los modelos animales experimentales.
Sin embargo, la técnica de infligir quemaduras y las profundidades de quemaduras producidas también son inconsistentes y están mal descritas en estudios anteriores, lo cual es crucial para determinar la gravedad de la quemadura y los métodos de tratamiento de las quemaduras. En este protocolo, utilizamos un conveniente dispositivo de calentamiento digital para crear una herida de quemadura similar a un tablero de ajedrez en el dorso del ratón. Proporciona un control preciso de la temperatura, lo que mejora la seguridad y la reproducibilidad en comparación con otras técnicas variables, lo que minimiza el uso de animales y permite estudios fiables de cicatrización de heridas.
Para comenzar, ajuste la temperatura del dispositivo de calefacción digital a 97 grados centígrados. Una vez que el mouse esté profundamente anestesiado, transfiéralo a la almohadilla térmica en posición prona. Employ ha esterilizado una punta de pipeta de un mililitro con un diámetro de nueve milímetros para identificar con precisión los sitios de herida deseados.
Cubra la piel con un paño estéril previamente recortado, dejando expuesta el área quirúrgica. Póngase guantes resistentes al calor y verifique la temperatura del dispositivo de calefacción digital. A continuación, aplique la punta del dispositivo de calentamiento en el centro de los sitios de la herida localizados durante 10 segundos a 97 grados centígrados para crear seis heridas redondas, cada una con un diámetro de cuatro milímetros.
A continuación, aplique hielo a la herida de la quemadura para controlar el dolor potencial. Coloque al ratón en una jaula de recuperación, luego ablande algunos gránulos de comida con cinco a 10 gotas de agua potable y colóquelos en el piso de la jaula para facilitar la alimentación. Después de 24 horas de inducción de la quemadura, limpie todas las heridas con gasa estéril humedecida con solución salina.
Seque la piel con una gasa y aplique una pequeña cantidad de gel antibacteriano de hidrogel TKH con una jeringa para cubrir las heridas de las quemaduras. En días específicos después de la inducción de la quemadura, marque la herida con la punta de una pipeta estéril de un mililitro y capture una imagen con una cámara digital. Después de sacrificar al animal, con unas tijeras, aísle el sitio de la herida y la piel circundante, incluida la musculatura subyacente, midiendo uno por centímetro.
El análisis microscópico mostró la destrucción completa de la epidermis y un daño dérmico de espesor completo que se extendió a las capas subcutáneas de grasa y músculo. Al tercer día, las heridas estaban en la etapa inflamatoria con vasodilatación e infiltración significativa de células inflamatorias. Al séptimo día, se observó una notable reducción en el área de la herida, y al día 14, se formó tejido de granulación con una densa deposición de colágeno que marcó la etapa de remodelación.
La capacidad de cicatrización de heridas mejoró significativamente en las heridas tratadas con hidrogel de péptido TKH, como lo demuestran las áreas de heridas más pequeñas en los días siete, 10 y 14 en comparación con las heridas no tratadas.
